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研究生:馬玥
研究生(外文):Yueh Ma
論文名稱:中藥材五倍子萃取液對茄科疫病菌之抑菌作用及對茄科疫病之田間防治效果評估
論文名稱(外文):The inhibitory effect of Chinese medicines Galla rhois on Phytophthora capsici and control of Phytophthora blight of pepper by Galla rhois
指導教授:何婉清何婉清引用關係
指導教授(外文):Wang-Ching Ho
學位類別:碩士
校院名稱:國立屏東科技大學
系所名稱:植物保護系
學門:農業科學學門
學類:植物保護學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2006
畢業學年度:94
語文別:中文
論文頁數:69
中文關鍵詞:茄科疫病生物農藥中藥材五倍子疫病菌(Phytophthora capsici)抑菌特性田間防治效果
外文關鍵詞:Bio-pesticideChinese medicinesGalla rhoisPhytophthora capsici
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化學農藥具有快速防治作物病蟲害的效果,但長期的使用除了會導致藥劑對目標生物產生抗藥性外,更會造成對環境的污染、土壤結構的劣化以及微生物生態失衡等問題;利用生物農藥來防治作物病蟲害,可降低農藥對環境生態及人類健康的影響,此為未來病蟲害防治的趨勢,而中藥材抑菌物質的研究與開發,又是其中一個重要的方向。本實驗利用茄科番椒屬疫病菌(Phytophthora capsici)游走孢子的發芽率,來評估70種中藥之高溫高壓(121℃、15 lb/in2、20min)水萃取液的抑菌效果,發現五倍子、乾漆、虎杖、厚朴及大風子等五種中藥的500倍水萃取液對P. capsici游走孢子的發芽具有不同程度的抑菌效果。進一步的研究顯示,上述供試中藥中又以五倍子的抑菌效果最佳,其500倍之稀釋水萃取液不但可使P. capsici游走孢子破裂,萃取液經稀釋3000倍仍只有34.2%的游走孢子會發芽,而對照組游走孢子的發芽率為97.2%。五倍子水萃取液也對不同來源的菌株具有相同的抑菌效果。另探討五倍子水萃取液中抑菌物質的抑菌特性時發現,pH 3至pH 12含1000ppm 葡萄糖的葡萄糖溶液中,P. capsici 均完全不受pH值的影響,游走孢子的發芽率均在90%以上,pH值4以下以及pH值9以上之500倍五倍子水萃取液,不會影響其抑菌物質的抑菌活性,但在5到8的pH值範圍內,五倍子水萃取液的抑菌活性就會隨著pH值的上升而逐漸下降;五倍子的抑菌活性成份可溶於極性溶劑,但不可溶於非極性溶劑中,水、甲醇、乙醇及丙酮對活性物質的萃取效果均佳,乙酸乙酯的萃取液,其抑菌活性下降,而乙醚及氯仿則完全沒有萃取效果。針對五倍子水萃取液,分別以不同孔徑透析膜進行透析處理,以評估其有效成分之分子量範圍,或測試經陰、陽離子交換樹脂作用後之萃取液,其抑菌活性之改變,及經有效成分層析後,各純化後之物質對茄科疫病菌游走孢子發芽之影響。結果顯示五倍子水萃取液經過分子量為1000的透析膜之透析處理後,經稀釋1000倍對游走孢子失去抑制發芽的效果,其抑菌成分應該同時具有帶正電荷及負電荷之物質,層析其有效成分活性後發現共有13組物質,其中以S-4、S-5、S-6及-S-1具有抑菌效果,而以S-6及-S-1之抑菌效果為最佳。在溫室實驗及田間防治效果實驗中發現,直接利用五倍子高溫高壓水萃取液,於幼苗期灌注地基部,發現並無法預防幼苗期疫病的發生,但直接灑施1~3克五倍子藥粉於地基部時,可以預防幼苗期疫病的發生。


關鍵字:茄科疫病、生物農藥、中藥材、五倍子、疫病菌(Phytophthora capsici)、抑菌特性、田間防治效果
Chemical pesticides for controlling pests are efficient and fast. However, causes the problems of drug resistance and pollution to the environment after long term usage. Using bio-pesticides to prevent diseases is the future trend. It could not only minimize the effect on the environment but human health also.70 Chinese medicines extract with water under high temperature and pressure (121℃、15 lb/in2、20min) were screened for ability to control germination of Phytophthora capsici. Germination of P. capsici was inhibited by the aqueous extracts at 500 fold dilution of Galla rhois, Lacca sinica exsiccatae, Knotweed, Magnolia and Chaulmoogra. Galla rhois at 500 fold dilution was found to be most effective in suppressing the zoospore germination of P. capsici. It was also found that aqueous extract of Galla rhois was affected by pH value. The extract became less inhibitory when the pH was adjusted from 5 to 8. The inhibitory substance in Galla rhois was soluble in polar solvents but not non-polar solvents. It could be dialyzable in the membrane tubing with molecular weight cut-off of 3500 but not 1000 and exchanged by Cation exchange resins. The results suggested that inhibitor’s molecule weight between 1000 and 3500 with positive charge. In the field test, it was found that Galla rhois powder could reduce Phytophthora blight of sweet pepper seedlings and it was also better than 25% Etridiazole EC solution at 1500 fold dilution, which was drenched to the roots.


Key words:Bio-pesticide、Chinese medicines、Galla rhois、Phytophthora capsici
目錄

摘要…………………………………………………………………Ⅰ
Abstract…………………………………………………………Ⅲ
誌謝…………………………………………………………………Ⅴ
目錄…………………………………………………………………Ⅶ
圖表目錄……………………………………………………………Ⅹ
壹、前言……………………………………………………………1
貳、前人研究………………………………………………………4
一、茄科作物疫病菌之基礎研究……………………………………4
二、植物源農藥及中藥材萃取物在植物病蟲害防治上的研
究…………………………………………………………………6
三、中藥五倍子之藥理及抑菌作用…………………………………11
參、材料與方法……………………………………………………13
ㄧ、供試病原菌游走孢子懸浮液的製備……………………………13
二、茄科疫病菌的發芽生理…………………………………………13
(一)不同濃度葡萄糖溶液對茄科疫病菌游走孢子發
芽之影響…………………………………………………………13
(二)溫度與光照對茄科疫病菌游走孢子發芽之影響……14
(三)酸鹼值對茄科疫病菌游走孢子發芽之影響…………14
三、供試中藥的來源及中藥水萃取液的配製…………………14
(一)供試中藥的來源………………………………………14
(二)中藥水萃取液的配製流程……………………………15
四、茄科疫病菌抑菌中藥的篩選……………………………………15
五、五倍子萃取液抑菌特性之探討……………………………………15
(一)不同稀釋濃度之五倍子水萃取液對茄科疫病菌之
抑菌效果………………………………………………15
(二)五倍子水萃取液對茄科疫病菌不同菌株之抑菌測
試…………………………………………………………16
(三)酸鹼值對五倍子水萃取液抑菌效果之影響…………16
(四)強酸強鹼對五倍子水萃取液抑菌效果之影響…………17
(五)透析作用對五倍子水萃取液抑菌效果之影響…………17
(六)不同極性溶劑對五倍子抑菌活性成分的萃取效
果……………………………………………………………17
(七)陰陽離子交換樹脂之交換作用對五倍子水萃取
液抑菌效果之影響…………………………………………18
(八)五倍子水萃取液活性成分抑菌測試……………………18
1、五倍子各層析成分之萃取…………………………….18
2、五倍子水萃取液之層析成分對P. capsici之
抑菌效果測試………………………………………19
(九)甜椒疫病之溫室防治實驗………………………………19
(十)甜椒疫病之田間防治實驗………………………………20
肆、結果……………………………………………………………22
ㄧ、茄科疫病菌的發芽生理……………………………………22
(一)不同濃度葡萄溶液對茄科疫病菌游走孢子發芽
之影響……………………………………………………22
(二)溫度與光照對茄科疫病菌游走孢子發芽之影響………22
(三)酸鹼值對茄科疫病菌游走孢子發芽之影響……………23
二、抑菌中藥的篩選……………………………………………23
三、五倍子萃取液抑菌特性之探討…………………………………24
(一)不同稀釋濃度五倍子水萃取液對茄科疫病菌之
抑菌效果……………………………………………………24
(二)五倍子水萃取液對茄科疫病菌不同菌株之抑菌效
果……………………………………………………………24
(三)酸鹼值對五倍子水萃取液抑菌效果之影響………………24
(四)強酸強鹼對五倍子水萃取液抑菌效果之影響……………25
(五)透析作用對五倍子水萃取液抑菌效果之影響……………25
(六)不同極性溶劑萃取對五倍子抑菌活性成分的
萃取效果………………………………………………………25
(七)陰陽離子交換樹脂之交換作用對五倍子水萃取
液抑菌效果之影響……………………………………………26
(八)經分離純化之五倍子層析成分之抑菌活性分析……………26
1、五倍子有效成分分析……………………………………26
2、五倍子層析成分對P. capsici之抑菌效果…………27
(九)甜椒疫病之溫室防治實驗……………………………………27
(十)甜椒疫病之田間防治實驗…………………………………27
伍、討論………………………………………………………………29
陸、結論………………………………………………………………36
參考文獻………………………………………………………………37
附錄……………………………………………………………………62
作者簡介………………………………………………………………69

圖表目錄

表1、不同濃度葡萄糖液對茄科疫病菌游走孢子發芽之影
響…………………………………………………………………………43
表2、酸鹼值對茄科疫病菌游走孢子發芽之影響……………………………44
表3、以中藥材水萃取液稀釋500倍液對茄科疫病菌游走孢子
發芽試驗篩選測試………………………………………………………45
表4、不同稀釋濃度之五倍子水萃取液對茄科疫病菌游走孢
子發芽之影響……………………………………………………………46
表5、五倍子水萃取液對茄科疫病菌不同菌株之抑菌測試………………47
表6、酸鹼值對五倍子水萃取液抑菌效果之影響…………………………48
表7、強酸及強鹼處理ㄧ小時對五倍子水萃取液抑菌效果
的影響…………………………………………………………………49
表8、強酸及強鹼處理二十四小時對五倍子水萃取液抑菌
效果的影響……………………………………………………………50
表9、五倍子水萃取液經不同孔徑透析膜透析後之抑菌
效果……………………………………………………………………51
表10、不同溶劑萃取對五倍子抑菌活性的影響…………………………52
表11、五倍子水萃取液經陰、陽離子交換樹脂交換後之抑菌
效果………………………………………………………………………53
表12、陽離子交換樹脂交換後之五倍子的層析成分對茄科疫病菌
之抑菌測試…………………………………………………………54
表13、陰離子交換樹脂交換後之五倍子的層析成分對茄科疫病菌
之抑菌測試…………………………………………………………55
表14、五倍子水萃取液及粉末對茄科疫病菌之田間防治效果…………56
圖1、鹽膚木外觀……………………………………………………………57
圖2、肚倍外觀及角倍外觀…………………………………………………57
圖3、五倍子分離出之五種有效化合物……………………………………58
圖4、游走孢子發芽設備……………………………………………………58
圖5、有光照情況下溫度對茄科疫病菌游走孢子發芽之影響……………59
圖6、無光照情況下溫度對茄科疫病菌游走孢子發芽之影響……………60
圖7、游走孢子正常發芽經五倍子500倍稀釋液處理後游走孢子破裂狀…………61
附表1、供試中藥名稱對照………………………………………………………62
附表2、供試中藥500倍萃取液對茄科疫病菌游走孢子發芽的影響…………………65
附表3、供試菌株來源…………………………………………………………68
參考文獻

1.中華民國植物病理學會。2002。台灣植物病害名彙。第四版。中華民國植物病理學會。台中。386頁。
2.冉懋雄、周厚瓊。1999。現代中藥栽培養殖與加工手冊。中國中醫藥出版社。北京。1682頁。
3.朱友倫。2005。白粉病菌抑菌中藥之篩選及大黃抑菌萃取物性質探討。國立屏東科技大學植物保護碩士論文。77頁。
4.江建廷。2002。丁香油防治甘藍立枯病的影響因子及其抑菌的功效。國立中興大學植物病理學系碩士論文。70頁。
5.何婉清、吳宗諭。2002。影響扛板歸抑菌效果的因子。植保會刊 44: 364-365(摘要)。
6.何婉清、李惠玲、李智緯、吳宗諭、李興進。2002。抑菌植物材料的篩選。植保會刊 44:365(摘要)。
7.呂理燊、高清文。1981。Phytophthora capsici引起的甜椒及辣椒之疫病。植保會刊 23:59-66。
8.吳文希。1987。植物病害防治學。茂昌圖書有限公司。台北。211-363頁。
9.吳宗諭。2005。植物汁液對Alternaria brassicicola孢子發芽的影響及扛板歸抑菌物質的特性。國立屏東科技大學植物保護研究所碩士論文。48頁。
10.李淑增、石正人。1995。苦楝種仁萃取物對斜紋夜蛾拒食及忌避作用之探討。植保會刊 37:249~254。
11.李智緯。2005。中藥之水萃取液Alternaria brassicicola孢子發芽的影響及五倍子抑菌物質的特性。國立屏東科技大學植物保護研究所碩士論文。67頁。
12.沈穎初、張一實編著。2000。生物農藥。化學工業出版社。北京。121頁。
13.周廷光。1986。蔬菜主要病害彩色圖鑑。淑馨出版社。台北。221頁。
14.林宗俊。2000。丁香及其主成分防治甘藍苗立枯病的功效。國立中興大學植物病理學系碩士論文。72頁。
15.林煥哲。1998。小本山葡萄及羅氏鹽膚木蟲癭成份之研究。台北醫學院藥學研究所碩士論文。114頁。
16.武藤真知子。2001。蘿蔔種子粉水溶性抽出物防治萵苣褐斑病的功效。國立中興大學植物病理學系碩士論文。83頁。
17.邱年永、張光雄。1986。原色台灣藥用植物圖鑑(1)。南天書局。台北。283頁。
18.邱年永、張光雄。1987。原色台灣藥用植物圖鑑(2)。南天書局。台北。316頁。
19.邱年永、張光雄。1992。原色台灣藥用植物圖鑑(3)。南天書局。台北。312頁。
20.邱年永、張光雄。1995。原色台灣藥用植物圖鑑(4)。南天書局。台北。320頁。
21.柯治國。1997。植物性農藥的研究與開發應用前景。農業世界163:65-70。
22.胡敏夫、謝廷芳、許秀惠、余志儒、黃晉興、柯文雄。2005。植物萃取液對植物病原菌之抑制及綿蚜之忌避。2004。果菜健康管理研討會專輯。158-174頁。
23.徐鴻華。1994。中草藥彩色圖鑑 (二)。西北出版社。台南。280頁。
24.高清文、呂理燊。1977。台灣未發表之三種疫病病菌。植保會刊 19:302-303。
25.常敏毅。1993。實用抗癌草藥。文橋出版社。台北。163-166頁。
26.張和喜。1983。台灣作物疫病概況。植保會刊 25:231-237。
27.梁文俐。2003。市售五倍子品質及抗菌活性之探討。562-580頁。行政院衛生署編。行政院衛生署中醫藥年報。行政院衛生署。台北。
28.許鴻源。1968。中藥成分最近的研究。國立中國醫藥研究所。台北。234頁。
29.陳建名。1996。甜椒疫病生物防治。國立台灣大學植物病蟲害學研究所碩士論文。90頁。
30.陳昱初。1992。茄科作物疫病菌Phytophthora capsici之生物學及其病原性測定。國立中興大學植物病理研究所碩士論文。70頁。
31.陳秋男、葉瑩。1992。作物病蟲害防治之政策。病蟲害非農藥防治技術研究會專刊 2-1~21。
32.陳哲民。1996。植物油抑制植物病原真菌孢子發芽之效果。花蓮區農業改良場研究彙報 12:71-92。
33.費雯綺、王喻其編。2004。植物保護手冊。行政院農業委員會農業藥物毒物試驗所。台中。835頁。
34.黃涵、洪立。1988。台灣蔬菜彩色圖說。大進印刷有限公司。台北。155頁。
35.黃惠曼。2003。五倍子對Methicillin與Penicillin抗藥性金黃葡萄球菌與表皮葡萄球菌之抗菌活性研究。台北醫學大學生藥學研究所碩士論文。114頁。
36.鄭止善。1948。五倍子。正中書局。上海。67頁。
37.鄭明欽、楊大吉。1998。三種生物性農藥對水稻害蟲防治效果評估。花蓮區農業改良場研究彙報 15:11-17。
38.謝廷芳、黃晉興、謝麗娟、胡敏夫、柯文雄。2005。植物萃取液對植物病原真菌之抑菌效果。植病會刊 14:59-66。
39.謝慶芳。1999。天然藥劑與病害控制。興大農業30:14-17 。
40.羅萬春、慕立義、李雲壽。1997。植物源生物鹼的殺蟲作用。農藥36:11-15。
41.鐘文全。1993。台灣十字花科蔬菜黑斑病菌的生物特性研究。國立中興大學植物病理學系碩士論文。128頁。
42.Agrios, G. N. 1997. Plant pathology 4th ed. Academic Press. San Diego, California, USA. 635pp.
43.Alexopoulos, C. J., Mims, C. W., and Blackwell, M. 1996. Introductory mycology 4th ed. John Wiley & Sons, Inc. New York, USA. 868pp.
44.Amadioha, A. C. 2000. Controlling rice blast in vitro and in vivo with extracts of Azadirachta indica. Crop Prot. 19: 287-290.
45.Bowers, J. H., and Mitchell, D. J. 1991. Relationship between inowllum level of Phytophthora capsici and mortality of pepper. Phytopathology 81: 178-184.
46.Bowers, J. H., Sonoda, R. M., and Mitchell, D. J. 1990. Pathogen coefficient analysis of the Phytophthora blight of pepper caused by Phytophthora capsici. Phytopathology 50: 1439-1446.
47.Cheah, L. H., and Cox, J. K. 1995. Screening of plant extracts for control of powdery mildew in squash. Pages 340-342 in: Proceedings of the 48th New Zealand Plant Protection Conference. 8-10 August, 1995. Hastings, New Zealand.
48.Chiu, S. F., Huang, B. Q., and Hu, M. Y. 1986. The oviposition deterring effects of some meliaceous extracts against the rice gall midge(Orseolia oryzae Wood-Mason). Acta Entomological Sinica 29(2): 221-224.
49.Daayf, F., Schmitt, A., and Bélanger, R. R. 1995. The effects of plant extracts of Reynoutria sachalinensis on powdery mildew development and leaf physiology og long English cucumber. Plant Dis. 79:577-580.
50.Daayf, F., Schmitt, A., and Bélanger, R. R. 1997. Evidence of phytoalexins in cucumber leaves infected with powdery mildew following treatment with leaf extracts of Reynoutria sachalinensis. Plant Physiol. 113:719-727.
51.Devaraj, K. C., and Srilatha, G. M. 1993. Antifeedant and repellent properties of certain plant extract against the rice moth, Corcyra cephalonica St. Botanical pesticides in integrated pest management. 159-165.
52.Ho, H. H. 1981. Synoptic keys to the species of Phytophthora. Mycologia 73:705-714.
53.Ho, H. H. 1990. Taiwan Phytophthora. Bot. Bull. Academia sinica 31:89-106.
54.Huang, J. W., and Chung, W. C. 2001. Management of vegetable crop disease with formulated plant extracts. p.139-152. In:Tzeng, S. T., and J. W. Huang(eds.)Proceedings of International Symposium on Biological Control of Plant Disease for the New Century-Mode of Action And Application Technology. Department of Plant Pathology, National Chung Hsing University Press, Taichung.
55.Hwang, B. K., and Kim, C. H. 1995. Phytophthora blight of pepper and it control in Korea. Plant Dis. 79:221-227.
56.Hwang, S. C., Ko, W. H., and Aragaki, M. 1975. A simplified method for sporangial production by Phytophthora cinnamoni. Mycologia 67:1233-1234.
57.Kirshnaiah, N. V., and Kalode, M. B. 1990. Efficacy of selected botanicals against rice insect pests under green house and field conditions. Indain J. Plant Port. 18: 197-205.
58.Ko, W. H. 1978. Heterothallic Phytophthora: evidence for hormonal regulation of sexual reproduction. J. Gen. Microbiol. 107:15-18.
59.Ko, W. H. 1980. Hormonal regulation of sexual reproduction in Phytophthora. J. Gen. Microbiol. 116:459-463.
60.Ko, W. H., Wang, S. Y., Hsieh, T. F., and Ann, P. J. 2003. Effects of sunflower oil on tomato powdery mildew caused by Oidium neolycopersici. J. Phytopathol. 151: 144-148.
61.Konstantinidou-Doltsinis, S., and Schmitt, A. 1998. Impact of treatment with plant extracts from Reynoutria sachalinensis (F. Schmidt) Nakai on intensity of powdery mildew severity and yield in cucumber under high disease pressure. Crop Prot. 17:649-656.
62.Leonian, L. H. 1922. Stem and fruit blight of peppers caused by Phytophthora capsici sp. nov. Phytopathology 12:401-408.
63.Liu, H. C., Chen, S. E., Wang, G. C., Lin, C., and Chen, Y. A. 1983. A study of the biological activity of some purified plant oil on some rice insects. Fujian Agricultural Science and Technology 6: 24-27.
64.Muto, M., Huang, J. W., and Takahashi, H. 2004. Effect of water-soluble extracts of radish seed meal on control of lettuce brown leaf spot(Acremonium lactucae Lin et al.).Plant Pathol. Bull. 13:275-282.
65.Muto, M., Takahashi, H., Ishihara, K., Yuasa, H., and Huang, J. W. 2005. Antimicrobial activity of medicinal plants used by indigenous people in Taiwan. Plant Pathol. Bull. 14:13-24.
66.Newhook, F. J., Waterhouse, G. M., and Stamp, D. J. 1978. Tabular key to the species of Phytophthora De Bary. Mycol. Pap. 143, Comm. Mycol. Ins. Kew, Surrey, England.
67.Northover, J., and Schneider, K. E. 1993. Activity of plant oils on diseases caused by Podosphaera leucotricha, Venturia inaequalis, and Albugo occidentalis. Plant Dis. 77:152-157.
68.Paik, S. B., Kyung, S. H., Kim, J. J., and Oh, Y. S. 1996. Effect of a bioactive substance extracted from Rheum undulatum on control of cucumber powdery mildew. Korean J. Plant Pathol. 12: 85-90.
69.Pasini, C., Aquila, F. D., Curir, P., and Gullino, M. L. 1997. Effectiveness of antifungal compounds against rose powdery mildew (Sphaerotheca pannosa var. rosae) in glasshouse. Crop Prot. 16:251-256.
70.Pretorius, J. C., Craven, P., and Watt, V. D. E. 2002. In vivo control of Mycosphaerella pinodes on pea leaves by a crude bulb extract of Eucomis autumnalis. Ann. Appl. Biol. 141: 125-131.
71.Satour, M. M., and Butler, E. E. 1967. A root and crown rot of tomato cause by Phytophthora capsici and P. parasitica. Phytopathology 57:510-515.
72.Stankova, J. 1975. Varietal variability of winter rape in its susceptibility to dark leaf spot and the factors influencing the development of the disease. Rev. Plant Pathol. 54:370.
73.Ushiki, J., Hayakawa, Y., and Tadano, T. 1996. Medicinal plants for suppressing soil-borne plant diseases. I. Screening for medicinal plants with antimicrobial activity in roots. Soil Sci. Plant Nutr. 42:423-426.
74.Vaughn, S. F., and Spencer, G. F. 1994. Antifungal activity of nature compound against Thiabendazole-resistant Fusarium sambucinum strains. J. Agric. Food Chem. 42:200-203.
75.Yang, S. S., Kim, C. H., Cho, E. K., and Lee, E. J. 1994. Distribution and characteristics of suppressive soil to Phytophthora blight of red-pepper in Korea. Res. Rep. RDA(C.P.)33:18-22.
76.Young, J. A., Hoi, S. L., Hong, S. O., Heung, T. K., and Leea, Y. H. 2005. Antifungal activity and mode of action of Galla rhois-derived phenolics against phytopathogenic fungi. Pestic Biochem Phys 81: 105-112.
QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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