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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:吳家驊
研究生(外文):WU JIA YI
論文名稱:蛋白質穩定性的結構基因體分析
論文名稱(外文):BioTuner: The Structural and Genomic Studies of Protein Stability
指導教授:張清堯蕭乃文蕭乃文引用關係
學位類別:碩士
校院名稱:亞洲大學
系所名稱:生物資訊研究所
學門:工程學門
學類:生醫工程學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2005
畢業學年度:94
語文別:中文
論文頁數:52
中文關鍵詞:蛋白質溫度穩定結構基因體
外文關鍵詞:ProteinTemperaturestabilityStructureGenome
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蛋白質穩定的需求不只是在實驗室,在工業上的需求也是相當大,但總是苦惱無法用更快速有效的方式在事前得到目標蛋白質的穩定資訊,導致常見到事倍功半的實驗發生。而近年來的研究可以看出蛋白質穩定的成因並不是透個單一因素可以來做說明,曝露出預測單一蛋白質穩定因素工具的不足,因此我們透過實驗室過去發展的蛋白質溫度穩定預測演算法:Temperature Index,再合併蛋白質半衰期穩定預測的:Instability Index,將其發展成Web介面的線上工具,透過兩個焦點在不同蛋白質穩定因素的工具互相配合下,提供使用者更準確的建議,我們更將序列置換的調控功能置入,發展成為一套完整的線上蛋白質穩定預測工具,可應用在蛋白質工程方面做修改分析。
The demand of stable protein is not only in a laboratory , but also in the industry. Always it is hard to get protein stability information in a faster and more effective way before experiments, which leads to the fact that experiments often bring half of the result with twice or much more effort. Research in recent years shows that a single factor is not the only cause of protein stability. It reveals prediction deficiency with analysis of a powerful tool, therefore, we propose the algorithm that predicts the protein temperature stability developed in the past in the laboratory : Temperature Index, and Instability Index, which predicts the protein stability in protein’s half-life. We program the two algorithms to be an on-line tool, and provide more accurate suggestions to users through the cooperation of two tools focusing on different protein stability factors. Furthermore, we make a Sequence replace function on the tool as well, which can be utilized in the application of amendment analysis in protein engineering.
第一章 諸論
1.1:研究背景與動機................................. 1
1.2:研究目的....................................... 2

第二章 文獻探討
2.1:蛋白質穩定的重要性............................. 3
2.2:蛋白質穩定的研究方向........................... 4

第三章 研究方法與結果
3.1:建立運作的環境................................. 6
3.2:重建Predict Melting Temperature工具............ 7
3.3:驗證Predict Melting Temperature結果............17
3.4:重建Predict Stability..........................18
3.5:確認Temperature Index和Instability Index工.....19
3.6:建立網站服務
3.6.1:建立Protein Stability Tuner工具..............26
3.6.2:建立Discover Demark Rules工具................27
3.6.3:系統配置.....................................28
3.7:網頁操作說明
3.7.1:BioTuner網站地圖.............................29
3.7.2:Protein Stability Tuner網頁說明..............30
3.7.3:Protein Stability Tuner進階使用..............36
3.7.4:Discover Demark Rules工具....................42

第四章 結論與未來研究方向...........................52
1.Zavodszky P, Kardos J, Svingor, Petsko GA: Adjustment of conformational flexibility is a key event in the thermal adaptation of proteins. Proc Natl Acad Sci U S A 95: 7406-11 (1998).

2.Stone MJ: NMR relaxation studies of the role of conformational entropy in protein stability and ligand binding.Acc Chem Res 34(5):379-88( 2001).

3.Huang SW, Hwang JK: Computation of conformational entropy from protein sequences using the machine-learning method--application to the study of the relationship between structural conservation and local structural stability. Proteins 59(4):802-9(2005).

4.Vogt G, Woell S, Argos P: Protein thermal stability, hydrogen bonds, and ion pairs. J Mol Biol 269: 631-43 (1997).

5.Roth CM, Neal BL, Lenhoff AM: Van der Waals interactions involving proteins.Biophys J. 1996 February; 70(2): 977–987.

6. Prevost M, Wodak SJ, Tidor B, Karplus M: Contribution of the hydrophobic effect to protein stability: analysis based on simulations of the Ile-96----Ala mutation in barnase. Proc Natl Acad Sci U S A 88: 10880-4 (1991).

7. Gianese G, Bossa F, Pascarella S: Comparative structural analysis of psychrophilic and meso- and thermophilic enzymes. Proteins 47: 236-49 (2002).

8. Mombelli E, Shehi E, Fusi P, Tortora P: Exploring hyperthermophilic proteins under pressure: theoretical aspects and experimental findings. Biochim Biophys Acta 1595: 392-6 (2002).

9. Spector S, Wang M, Carp SA, Robblee J, Hendsch ZS, Fairman R, Tidor B, Raleigh DP: Rational modification of protein stability by the mutation of charged surface residues. Biochemistry 39: 872-9 (2000).

10. Szilagyi A, Zavodszky P: Structural differences between mesophilic, moderately thermophilic and extremely thermophilic protein subunits: results of a comprehensive survey. Structure Fold Des 8: 493-504 (2000).



11. van den Burg B, Eijsink VG: Selection of mutations for increased protein stability. Curr Opin Biotechnol 13: 333-7 (2002).

12. Haney PJ, Badger JH, Buldak GL, Reich CI, Woese CR, Olsen GJ: Thermal adaptation analyzed by comparison of protein sequences from mesophilic and extremely thermophilic Methanococcus species. Proc Natl Acad Sci U S A 96: 3578-83 (1999).

13. Guruprasad K, Reddy BV, Pandit MW: Correlation between stability of a protein and its dipeptide composition: a novel approach for predicting in vivo stability of a protein from its primary sequence. Protein Eng 4: 155-61 (1990).
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