臺灣博碩士論文加值系統

近年來，中草藥在醫療上的使用越來越被重視。因此，建立一個有系統性的中草藥指紋圖譜資料庫，是相當迫切和重要。
在本研究中，選擇了不同產地的三種中草藥，在經過藥材萃取的前處理步驟後，萃取物使用高效能液相層析儀（簡稱HPLC）結合Photodiode array(簡稱PDA)偵測器檢測上述之樣品以訂定其化學指紋圖譜。實驗中，我們選取四個主要的偵測波長210、230、254、280nm，並以樣品比例含量較高的共有吸收峰作為主要特徵峰。經由吸收峰面積的差異，來比較產地來源對於主要特徵峰的影響程度。最後，根據數據整理來制定化學指紋雷達圖譜，藉此可以作為判斷此三種藥材的種類與產地之依據。

In recent years, the use in medical treatment of Chinese herbal medicine is being paid attention to. So, setting up the Chinese herbal medicine fingerprint atlas databases, is quite urgent and important.
In this research, we choose three kinds of Chinese herbal medicine which are came from different producing areas. After the extraction steps, the extracts were analyzed by high performance liquid chromatograph（HPLC）and combined with a photodiode array UV absorbance detector.In order to stipulate their chemical fingerprint atlas, we select four wavelength 210、230、254、280nm for detection, according to the chromatograms,we choose the several peaks which are more abundance as the characteristic peaks. According to the characteristic peaks, we can compare the influence degree to the characteristic peaks of producing area. Finally, we make the radar atlas of chemical fingerprint according to the data, which can give the information of the three kinds Chinese herbal medicine of their sources and producing areas.

目錄
壹、緒論…………………………………………………………………1
貳、實驗………………………………………………………………..49
一、藥品與藥材……………………………………………………49
二、儀器…………………………………………………………....58
三、樣品萃取之方法………………………………………………58
四、藥材測定方法…………………………………………………58
五、高效能液體層析儀（HPLC）之操作條件…………………..59
六、系統再現性的測試…………………………………………….60
七、雷達圖之建立………………………………………………….60
參、結果與討論………………………………………………………...61
一、藥材的處理及保存…………………………………………….61
二、藥材成份的萃取………………………..………………………61
三、建立HPLC分析中藥材的分析條件………………………….62
（1）前置管柱的選擇…………………………….……………..62
（2）選擇逆相層析管柱之原因………………………………...62
（3）添加微量磷酸之目的………………………….…………..62
（4）選擇單一梯度沖提方法…………………………….……..63
四、選擇合適的偵測波長作為藥材化學指紋圖譜建立的依據…............................................................................................63
五、系統的再現性與適用性………………………………………..64
六、不同產地對於藥材成份之影響………………………………..64
七、不同產地之藥材樣品重疊率及特徵指峯相似率……………65
八、化學指紋雷達圖譜的製作…………………………………….65
（1）白及化學指紋雷達圖圖譜的建立………………………66
（2）虎掌天南星化學指紋雷達圖圖譜的建立………………66
（3）異葉天南星化學指紋雷達圖圖譜的建立………………67
（4）車前子化學指紋雷達圖圖譜的建立……………………68
肆、結論………………………………………………………………....70
伍、參考資料…………………………………………………………..127

表目錄
表一、中西藥之比較……………………………………………………3
表二、固相萃取法技術的發展史………………………………………23
表三、常見的固相萃取管……………………………………………...27
表四、溶劑於固相萃取中相對極性大小……………………………...28
表五、Sep-Pak Cartridges的典型應用……………………………..30
表六、 Sep-Pak Cartridges的使用特性……………………………..31
表七、正相層析與逆相層析之特性比較………………………………41
表八、常用的液相層析儀偵測器特性表………………………………43
表九、不同產地出產的白及樣品………………………………………50
表十、不同產地出產的虎掌天南星樣品………………………………52
表十一、不同產地出產的異葉天南星樣品……………………………54
表十二、不同產地出產的車前子樣品…………………………………56
表十三、白及(912461)藥材進樣六次之絕對滯留時間（分鐘）之比較
………………………………………………………………..95
表十四、白及(912461)藥材進樣六次之相對滯留時間之比較………96
表十五、白及(912461)藥材進樣六次之絕對滯留面積之比較………97
表十六、白及(912461)藥材進樣六次之相對滯留面積之比較………98
表十七、天南星(911524)藥材進樣六次之絕對滯留時間（分鐘）之比較……………………………………………………………..99
表十八、天南星(911524)藥材進樣六次之相對滯留時間之比較……100
表十九、天南星(911524)藥材進樣六次之絕對滯留面積之比較……101
表二十、天南星(911524)藥材進樣六次之相對滯留面積之比較……102
表二十一、車前子(911562)藥材進樣六次之絕對滯留時間（分鐘）之比較………………………………………………………103
表二十二、車前子(911562)藥材進樣六次之相對滯留時間之比較…104
表二十三、車前子(911562)藥材進樣六次之絕對滯留面積之比較…105
表二十四、車前子(911562)藥材進樣六次之相對滯留面積之比較…106
表二十五、不同產地白及藥材HPLC波峯之絕對滯留時間（分鐘）比較…………………………………………………………107
表二十六、不同產地白及藥材HPLC波峯之相對滯留時間比較…108
表二十七、不同產地白及藥材HPLC波峯之絕對滯留面積比較…109
表二十八、不同產地白及藥材HPLC波峯之相對滯留面積比較…110
表二十九、不同產地虎掌天南星藥材HPLC波峯之絕對滯留時間（分鐘）比較…………………………………………………111
表三十、不同產地虎掌天南星藥材HPLC波峯之相對滯留時間比較
……………………………………………………………112
表三十一、不同產地虎掌天南星藥材HPLC波峯之絕對滯留面積比較
……………………………………………………………113

表三十二、不同產地虎掌天南星藥材HPLC波峯之相對滯留面積比較
……………………………………………………………114
表三十三、不同產地異葉天南星藥材HPLC波峯之絕對滯留時間（分 鐘）比較………………………………………………..115
表三十四、不同產地異葉天南星藥材HPLC波峯之相對滯留時間比較
……………………………………………………………116
表三十五、不同產地異葉天南星藥材HPLC波峯之絕對滯留面積比較
.…………………………………………………………..117
表三十六、不同產地異葉天南星藥材HPLC波峯之相對滯留面積比較
.…………………………………………………………..118
表三十七、不同產地車前子藥材HPLC波峯之絕對滯留時間（分鐘）比較………………………………………………………119
表三十八、不同產地車前子藥材HPLC波峯之相對滯留時間比較
…………………………………………………………..120
表三十九、不同產地車前子藥材HPLC波峯之絕對滯留面積比較
…………………………………………………………..121
表四十、不同產地車前子藥材HPLC波峯之相對滯留面積比較
…………………………………………………………..122
表四十一、六批不同產地之白及藥材樣品相似率及特徵指峯相似率
…………………………………………………………..123
表四十二、六批不同產地之虎掌天南星藥材樣品相似率及特徵指峯相似率………………………………………………………124
表四十三、六批不同產地之異葉天南星藥材樣品相似率及特徵指峯相似率………………………………………………………125
表四十四、五批不同產地之車前子藥材樣品相似率及特徵指峯相似率
……………………………………………………………126

圖目錄
圖一、白及………………………………………………………………6
圖二、虎掌天南星………………………………………………………9
圖三、東北天南星……………………………………………………...10
圖四、異葉天南星………………………………………………………10
圖五、車前草……………………………………………………………13
圖六、索氏萃取裝置…………………………………………………...21
圖七、固相萃取程序圖………………………………………………...25
圖八、Sep-Pak C18 Cartridges 之典型溶劑指南………………………28
圖九、典型溶劑/Sep-Pak Cartridges 的組合………………………….29
圖十、Sep-Pak Cartridges的構造……………………………………...32
圖十一、利用Sep-Pak Cartridges濃縮水中有機物的三個簡單步驟
………………………………………………………………..33
圖十二、液相層析法的應用…………………………………………..36
圖十三、高效液相層析裝置系統……………………………………..37
圖十四、PDA光學途徑…………………………………………………44
圖十五、PDA偵測器所得到之三度空間資料…………………………45
圖十六、在指定波長後所得的二度空間圖即為層析圖譜，當指定時間後所得的二度空間圖即為光譜……………………………..45
圖十七、不同產地出產的白及樣品外觀………………………………51
圖十八、不同產地出產的虎掌天南星樣品外觀………………………53
圖十九、不同產地出產的異葉天南星樣品外觀………………………55
圖二十、不同產地出產的車前子樣品外觀……………………………57
圖二十一、白及（912461）的UV/VIS吸收全光譜圖………………72
圖二十二、天南星（912470）的UV/VIS吸收全光譜圖……………73
圖二十三、車前子（911562）的UV/VIS吸收全光譜圖……………74
圖二十四、白及（912461）經HPLC結合PDA偵測器所得之3D圖譜…………………………………………………………..75
圖二十五、天南星（912470）經HPLC結合PDA偵測器所得之3D圖譜………………………………………………………..76
圖二十六、車前子（911562）經HPLC結合PDA偵測器所得之3D圖譜………………………………………………………..77
圖二十七、白及（912461）四個不同偵測波長的圖譜比較………..78
圖二十八、天南星（912470）四個不同偵測波長的圖譜比較………79
圖二十九、車前子（911562）四個不同偵測波長的圖譜比較……….80
圖三十、白及（912461）最適分析條件層析圖（2D）………………..81
圖三十一、天南星（912470）最適分析條件層析圖（2D）…………..82
圖三十二、車前子（911562）最適分析條件層析圖（2D）…………..83
圖三十三、白及（912461）HPLC╱UV層析圖之再現性…………….84
圖三十四、天南星（911524）HPLC╱UV層析圖之再現性…………85
圖三十五、車前子（911562）HPLC╱UV層析圖之再現性………..86
圖三十六、不同產地白及藥材HPLC╱UV層析圖之比較…………...87
圖三十七、不同產地虎掌天南星藥材HPLC╱UV層析圖之比較…...88
圖三十八、不同產地異葉天南星藥材HPLC╱UV層析圖之比較…...89
圖三十九、不同產地車前子藥材HPLC╱UV層析圖之比較….........90
圖四十、白及藥材HPLC╱UV層析圖化學指紋雷達圖圖譜….........91
圖四十一、虎掌天南星藥材HPLC╱UV層析圖化學指紋雷達圖圖譜
……………………………………………………………..92
圖四十二、異葉天南星藥材HPLC╱UV層析圖化學指紋雷達圖圖譜
……………………………………………………………..93
圖四十三、車前子藥材HPLC╱UV層析圖化學指紋雷達圖圖譜
……………………………………………………………..94

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