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研究生:何秋燕
研究生(外文):Chiou-Yan He
論文名稱:19F NMR研究三氟乙醯基酮類化合物 之抑制酵素反應機理
論文名稱(外文):19F NMR Study on the Enzyme Inhibition Mechanisms by Trifluoroacetyl Ketones
指導教授:林家立林家立引用關係
指導教授(外文):Gia-lih Lin
口試委員:金德航吳芳禎
口試委員(外文):Der-Hang Chin
口試日期:2007-07-11
學位類別:碩士
校院名稱:國立中興大學
系所名稱:化學系所
學門:自然科學學門
學類:化學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2007
畢業學年度:95
語文別:中文
論文頁數:180
中文關鍵詞:酵素抑制三氟乙醯基
外文關鍵詞:EnzymeTrifluoroacetyl
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本論文主要研究是三氟乙醯基酮類化合物對乙醯膽鹼酯酵素、丁醯膽鹼酯酵素、膽固醇酯酵素、凝血酶和青黴素酶五種酵素的抑制機理。
首先利用停時驗析(Stop-Time Assay)實驗來判斷此類化合物對乙醯膽鹼酯酵素、丁醯膽鹼酯酵素、膽固醇酯酵素、凝血酶和青黴素酶這五種酵素,屬於何種類型的抑制劑。其結果發現三氟乙醯基酮類化合物對此五種酵素皆屬可逆競爭型抑制劑。接著由動力學實驗分析,藉由求得酵素-抑制劑複合體的解離常數(KI),來探討其抑制作用。其結果發現三氟乙醯基酮類化合物對於青黴素酶的抑制性較差,對於乙醯膽鹼酯酵素、丁醯膽鹼酯酵素、膽固醇酯酵素、凝血酶的抑制性還不錯。普遍來說,對乙醯膽鹼酯酵素最有抑制性。
再以19F NMR光譜來追蹤三氟乙醯基酮類化合物對於酵素的可逆抑制反應。其結果發現,部分光譜可以觀察到信號的增加,以及三氟乙醯基酮類化合物本身的信號高度上有相對變化,證實可逆反應的進行。
目錄
摘要--------------------------------------------------------------------------------Ⅰ
目錄--------------------------------------------------------------------------------Ⅱ
表目錄-----------------------------------------------------------------------------Ⅵ
圖目錄---------------------------------------------------------------------------Ⅶ
化合物結構與名稱-------------------------------------------------------------XV

第一章 緒論
一、 前言-----------------------------------------------------------------------1
二、 酵素簡介-----------------------------------------------------------------4
1. 乙醯膽鹼酯酵素與丁醯膽鹼酯酵素-------------------------------4
1-1乙醯膽鹼酯酵素--------------------------------------------------4
1-2丁醯膽鹼酯酵素--------------------------------------------------7
1-3 AChE與BChE的比較------------------------------------------8
2. 膽固醇酯酵素--------------------------------------------------------10
2-1膽固醇酯酵素---------------------------------------------------10
2-2 CEase催化受質的水解反應-------------------------------12
3. 凝血酶-----------------------------------------------------------------13
3-1凝血酶------------------------------------------------------------13
3-2凝血酶抑制作用------------------------------------------------15
3-3凝血酶抑制劑---------------------------------------------------18
4. 青黴素酶--------------------------------------------------------------19
4-1青黴素酶---------------------------------------------------------19
4-2 β-內醯胺酶抑制作用------------------------------------------20
4-3 β-內醯胺酶抑制劑---------------------------------------------22
三、 原理---------------------------------------------------------------------24
1. 停時驗析法(Stop Time Assay)-------------------------------------25
1-1區別可逆或不可逆抑制劑------------------------------------26
1-2判別抑制劑是否結合在活性區------------------------------26
2. 可逆抑制劑-----------------------------------------------------------26
第二章 實驗方法與數據
一、 儀器測定及藥品溶劑------------------------------------------------53
1. 儀器設備--------------------------------------------------------------53
2. 藥品--------------------------------------------------------------------54
二、 所使用可逆競爭型抑制劑------------------------------------------56
三、 停時驗析法(Stop Time Assay)--------------------------------------58
四、 酵素動力學的材料與方法------------------------------------------59
1. 乙醯膽鹼酯酵素部份----------------------------------------------60
1-1各種溶液的配製方法----------------------------------------60
1-2乙醯膽鹼酯酵素催化水解硫代乙醯膽鹼酯之反應-----60
2. 丁醯膽鹼酯酵素部份---------------------------------------------61
2-1各種溶液的配製方法-----------------------------------------61
2-2丁醯膽鹼酯酵素催化水解硫代丁醯膽鹼酯之反應-----62
3. 膽固醇酯酵素-------------------------------------------------------63
3-1各種溶液的配製方法----------------------------------------63
3-2膽固醇酯酵素催化水解丁酸硝基苯酯之反應-----------63
4. 凝血酶----------------------------------------------------------------64
5. 青黴素酶-------------------------------------------------------------65
五、 可逆抑制反應---------------------------------------------------------66
1. 初速度的測定圖----------------------------------------------------67
2. 解離常數KI值的計算---------------------------------------------67
3. 繪製Lineweaver-Burk圖形--------------------------------------67
六、 可逆抑制反應之動力學參數測定---------------------------------68
1. 乙醯膽鹼酯酵素----------------------------------------------------69
2. 丁醯膽鹼酯酵素----------------------------------------------------88
3. 膽固醇酯酵素-----------------------------------------------------107
4. 凝血酶--------------------------------------------------------------126
5. 青黴素酶-----------------------------------------------------------145
第三章 結果與討論
一、 停時驗析法(Stop Time Assay)------------------------------------164
二、 可逆抑制反應動力學的實驗結果--------------------------------167
1. 乙醯膽鹼酯酵素部份-----------------------------------------167
2. 丁醯膽鹼酯酵素部份--------------------------------------------168
3. 膽固醇酯酵素部份----------------------------------------------169
4. 凝血酶部份-------------------------------------------------------170
5. 青黴素酶部份--------------------------------------------------171
三、 19F NMR圖譜結果--------------------------------------------------172
1. 乙醯膽鹼酯酵素部份-----------------------------------------172
2. 丁醯膽鹼酯酵素部份--------------------------------------------173
3. 膽固醇酯酵素部份----------------------------------------------174
4. 凝血酶部份-------------------------------------------------------175
5. 青黴素酶部份--------------------------------------------------176
結論與展望-------------------------------------------------------------------177
參考文獻----------------------------------------------------------------------178
1.曾國輝編譯。大學生物化學。藝軒圖書出版社。1996。
2.Lubert, S.,曾國輝。酵素的介紹。大學生物化學。1966,103-156。
3.賴毓璿,國立中興大學化學研究所碩士論文,2005.
4.Quinn, D. M. Chem. Rev. 1987, 87, 955-979.
5.G. L. Patrick, An Introduction to Medicinal Chemistry, 1995.
6.簡明圖解藥理學/Richard A. Harvey, Pamela C. Champe原著; 許桂森•林明忠•蕭哲志編譯 台北市:藝軒, 2002
7.黃渼婷,國立中興大學化學研究所碩士論文,2002.
8.Summers, W. K.; Majovski, L. V.; Marsh, G. M.; Tachiki, K.; Kling, A. N. Engl. J. Med. 1986, 315, 1241-1245.
9.阿茲海默診療室/Michael Castleman, Dolores Gallagher –Thompson, Matthew Naythons著; 易之新譯 台北市:天下遠見, 2001, 201-203.
10.Farlow, M.; Gracon, S. I.; Hershey, L. A.; Lewis , K. W.; Sadowski, C. H.; Dolan-Ureno, J. A. J. Am. Med. Assoc. 1992, 268, 2523-2529.
11.Sussman, J. L.; Harel, M.; Frolow, F.; Oefner, C.; Goldman, A.; Toker, L.; Silman, I. Science 1991, 253, 872-879.
12.Mendel, B. and Rudney, H. Biochem. J. 1943, 37, 59-63.
13.Stedman, E.,and Easson, L. K. Biochem. J. 1932, 26, 2056-2066.
14.Grob, D.; Lilienthal, J. L.; Harvey, A. M.; Jones, B. F. Bull. Johns Hopkins Hosp. 1947, 81, 217-244.
15.Kalow, W. and Gunn, D. R. J. Pharmacol. Exp. Ther.1957, 120,203-214.
16.Whitaker, M. (1986) in Monographs in Human Genetics (Beckman, L., Ed.) pp 7-15 and 45-63, Karger, Basel, Switzerland.
17.Weihua Xie, Cibby Varkey Altamirano, Cynthia F. Bartels, Robert J. Speirs, John R. Cashman, and Oksana Lockridge Molecular Pharmacology, 1999, 55, 83-91.
18.Lockridge, O.; Bartels, C. F.; Vaughan, T. A.; Wong, C. W.; Norton, S. E.; Johnson, L. L. J. Biol. Chem. 1987, 262, 549-553.
19.Lockridge, O.; Eckerson, H. W.; and La Du, B. N. J. Biol. Chem. 1979, 254, 8324-8330
20.Semeriva, M.; Chapus, C.; Bovier-Lapierre, C.; and Desnuelle, P. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1974, 58, 808-813.
21.Goldberg, M. I. and Fruton, J. S. Biochemistry 1970, 9, 3371-3377.
22.Rosenberry, T. L. Adv. Enzymol. Relat. Areas Mol. Biol. 1975, 403, 103-281.
23.Froede, H. C.; Wilson, I. B. J. Biol. Chem. 1984, 259,11010-11013.
24.Lombardo, D. Biochim. Biophys. Acta 1981, 700, 67-74.
25.Sutton, L. D.; Stout, J. S.; Hosie, L.; Spencer, P. S.; Quinn, D. M. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1986, 134, 386-392.
26.Stout, J. S.; Sutton, L. D.; Quinn, D. M. Biochim. Biophys. Acta 1985, 837, 6-12.
27.Stout, J. S.; Sutton, L. D.; Quinn, D. M. J. Am. Chem. Soc. 1990, 112, 8398-8403.
28.Sutton, L. D.; Forelich, S.; Hendrickson, H. S.; Quinn, D. M. Biochemistry 1991, 30, 5888-5893.
29.Brodt-Eppley J.; White P.; Jenkins S.; Hui D. Y. Biochim. Biophys. Acta 1995, 1272, 69-72.
30.G. Lin et al. Bioorg. Med. Chem. 2000, 8, 2601-2607.
31.Mlinsek, G. , Novic, M., Hodoscek, M., Solmajer, T. Prediction of enzyme binding: human thrombin inhibition study by quantum chemical and artificial intelligence methods based on X-ray structures. J. Chem. Inf. Comput. Sci. 2001, 41, 1286-1294.
32.張文重。絲氨酸蛋白分解酵素。蛋白質分解酵素。1976, 22-44。
33.Sanderson, P. E. J. Small, Noncovalent serine protease inhibitors. Med. Res. Rev. 1999, 19, 179-197.
34.Anna, L. , Johan, G. , Thomas, O. , Eivor, O. , Staffan, F. , Bo, N. , Svante, W. Statistical molecular design, parallel synthesis, and biological evaluation of a library of thrombin inhibitors. J. Med. Chem. 2001, 44, 3424-3439.
35.Markwardt, F. Historical perspective of the development of thrombin inhibitors. Pathophysiol Haemost Thromb 2002, 32, 15-22.
36.Stratton, C.W. The Role of β-Lactamases. Antimicrobics and Infectious Diseases Newsletter 1996, 15, 17-18.
37.lietz, E. J. , Heather, T. , Debra K. , Mark J. Hokenson , Anthony L. Fink Lysine-73 Is Involved in the acylation and deacylation of β-Lactamase. Biochemistry 2000, 39, 4971-4981.
38.Hayes, J.D. , Wolf, C.R. Molecular mechanisms of drug resistance. Biochem J. 1990,272,281-95.
39.Pitout, J.D.D. , Sanders, C.C. , Sanders, E.S. Antimicrobial resistance with focus on β-lactam resistance in Gram-negative bacilli. Am J Med. 1997, 103, 51-9.
40.Livermore, D.M. Determinations of the activity of β-lactamase inhibitor combinations. J Antimicrob Chemother. 1993, 31(suppl A), 9-21.
41.Schmidt, J. ;Pollack, C.V. Antibiotic use in the emergency department. J. Emerg Med. 1996, 14, 483-496.
42.Bush, K. , Jacoby, G.A. , Medeiros, A.A. A functional classification scheme for β-lactamase and its correlation with molecular structure. Antimicrob Agents Chemother. 1995, 39, 1211-33.
43.Medeiros, A.A. Evolution and dissemination of β-lactamase accelerated by generation of β-lactamase antibiotics. Clin Infect Dis. 1997, 24, 19- 45.
44.Patton, J. S.; Warner, J. G.; Benson, A. A. Biochim. Biophys. Acta 1977, 486, 322-330.
45.Abeles, R. H.; Maycock, A. L. Acc. Chem Res. 1976, 313-319.
46.Momsen, W. E.; Brockman, H. L. Biochim. Biophys. Acta 1977, 486, 103-113.
47.張田彬,國立中興大學化學研究所碩士論文,2005.
48.林軍任,國立中興大學化學研究所碩士論文,2005.
49.孫亦廷,國立中興大學化學研究所碩士論文,2006.
50.王筠喬,國立中興大學化學研究所碩士論文,2006.
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