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研究生:蔡佩君
研究生(外文):Tsai Pei Chun
論文名稱:Leachianone A在RAW264.7細胞對LPS/IFN-r誘導一氧化氮產生的抑制作用
論文名稱(外文):Inhibitory effect of leachianone A on LPS/IFN-r induced NO production in RAW264.7 macrophage
指導教授:邱文慧;魏百祿
指導教授(外文):Chiou wen Fei; Wei Bai Luh
學位類別:碩士
校院名稱:國立臺東大學
系所名稱:生命科學系碩士班
學門:生命科學學門
學類:生物學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2007
畢業學年度:95
語文別:中文
論文頁數:71
中文關鍵詞:鼷鼠巨噬細胞株(RAW264.7);一氧化氮(NO);IkB;NF-kB;leachianone A;STAT1;MAP kinase
外文關鍵詞:RAW264.7NOIkBNF-kBleachianone ASTAT1
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Leachianone A是由苦參(豆科多年生植物Sophora flavescens Ait. 的乾燥根)萃取出的黃酮類成份(flavonoids),具有抗潰瘍、抗心律不整、抗氣喘、退燒、抗菌與抗發炎的效果。已知一氧化氮(NO)參與發炎的病理角色,因此本論文研究leachianone A對LPS/IFN-r刺激RAW264.7所產生的NO的影響,且探討作用機轉。
實驗在培養的鼷鼠巨噬細胞株(RAW264.7)進行, 並同時以lipopolysaccharide (LPS, 1 ug/ml)與interferon-r (IFN-r, 50 U/ml) (LPS/IFN-r)同時刺激誘導大量NO生合成。結果顯示leachianone A (3、10、20、30uM)呈現濃度相關性地抑制NO的生成, MTT試驗顯示leachianone A只在30uM才有細胞毒性。以西方點墨法進一步分析蛋白質表現,發現leachianone A不但顯著抑制誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)的生成, 同時也會減低iNOS protein穩定性; 而且leachianone A也呈現濃度相關性的抑制對iNOS mRNA的表現。
經由蛋白質酵素抑制劑作用後,結果顯示JNK、ERK1/2參與調節iNOS mRNA轉錄作用、蛋白質的合成與NO的生成。實驗設計探討leachianone A是否透過干擾IkB的裂解與NF-kB的核轉移、MAP kinase的磷酸化、JAK-STAT1磷酸化或c-Jun磷酸化而抑制NO的生成。結果顯示leachianone A對c-Jun磷酸化有抑制作用,但是對於ERK、JNK和STAT1的磷酸化並無明顯作用。且leachianone A對LPS/IFN-r刺激引起之IkB的裂解與NF-kB的核轉移也無影響。
Leachianone A is a flavanone isolated from the root of Sophora flavescens, a Chinese herbal medicine well known to have antiulcerative, antiarrhythmic, antiasthmatic, antipyretic, antibacterial, and anti-inflammatory effects. In this study we investigated the effects of leachianone A on nitric oxide (NO) production in RAW264.7 macrophages co-stimulated by lipopolysaccharide (LPS) plus interferon-r
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