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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:林慧宜
研究生(外文):Huey-Yi Lin
論文名稱:5-Aza-2’-deoxycytidine對人類神經膠質瘤細胞中之分化及侵襲性所造成的影響
論文名稱(外文):Effects of 5-Aza-2’-deoxycytidine on cell differentiation and invasiveness of human glioma cells
指導教授:李宏謨李宏謨引用關係
指導教授(外文):Horng-Mo Lee, Ph. D.
學位類別:碩士
校院名稱:臺北醫學大學
系所名稱:醫學檢驗生物技術學研究所
學門:工程學門
學類:生醫工程學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2007
畢業學年度:95
論文頁數:47
中文關鍵詞:人類神經膠質瘤
外文關鍵詞:5-Aza-2’-deoxycytidine
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5’-Aza-2-deoxycytidine (5’-AzadC)是一種抗癌藥物(商品名),現今已被用來治療骨髓再生不良症候群和急性骨髓性白血病,然而它對於人類神經膠質瘤抗侵襲性的療效及機轉仍不太清楚。本研究探討在人類神經膠質瘤細胞中5’-AzadC是否調節細胞侵襲性及其可能機轉。我們發現惡性人類神經膠質瘤細胞會持續的表現matrix metalloproteninases-2 (MMP-2),而且MMP-2的活性和腫瘤細胞的惡性度有密切的關係。在低劑量長時間的處理下我們發現5’-AzadC會降低MMP-2的表現而不會引起細胞的死亡,在相同的情況下我們發現5’-AzadC會增加在U87MG細胞中glial fibrillary acidic protein (GFAP)的表現。GFAP的表現和MMP-2的表現呈相反的關係,5’-AzadC會引起細胞再分化的現象,接著會降低細胞的侵襲性。利用in vitro invasion assay我們證實了分化中的U87MG cells 有較低的侵襲性。另外我們發現5’-AzadC會增加TIMP-2的表現,顯示5’-AzadC不只會減少MMP-2的表現,而且也會抑制MMP-2的活化。綜合以上結果,5’-AzadC可抑制MMP-2的活化、並降低其侵襲性;因此5’-AzadC可能可以用來控制神經膠質瘤的侵襲性,並用於人類神經膠質瘤之治療。
5-Aza-2’-deoxycytidine (5-AzadC) is an anti-cancer drug, currently used in the tumor therapy. However, the underneath mechanisms of the anti-invasiveness effect on human glioma are still unknown. In the present study, we investigated the possibility of whether 5-AzadC can be used to control the invasiveness of human glioma, and the mechanisms by which 5-AzadC regulate cell invasiveness in human glioma cells. We found that malignant human glioma cells constitutively expressed matrix metalloproteinase-2 (MMP-2), and the MMP-2 activities were correlated well with their malignancies. We demonstrated that 5-AzadC suppressed MMP-2 activity in U87MG astrocytoma cells and other primary astrocytoma cell lines. 5-AzadC decreased MMP-2 expression without causing cell death. At the same conditions, we found that 5-AzadC increased glial fibrillary acidic protein (GFAP) expression in U87MG cell suggesting that 5-AzadC induces cell redifferentiation, which was associated with decreased cell invasiveness. Using in vitro invasion assay, we demonstrated that differentiated U87MG cells exhibited lower invasiveness. In addition, we found that 5-AzadC increased TIMP-2 expression, suggesting that 5-AzadC not only reduced MMP-2 expression but also inhibited MMP-2 activation. Taken together, these findings support a safer strategy targeting glioma invasiveness in context of glioma therapy.
目錄

壹、緒論 1
第一節、研究背景 1
1.癌瘤細胞的特性 1
2.腫瘤的生成 2
3神經膠質瘤生成 4
4.神經膠質瘤細胞遷移和侵襲 5
第二節、 藥物介紹 9
貳、研究材料與方法 11
一 研究材料 11
二、研究方法 12
(一)神經膠質瘤細胞的培養 12
(二)Polyacrylamide gel electrophoresis和西方墨點法 12
(三)Gelatin zymography 12
(四)Total RNA收集和Reverse Transcriptase- polymerase chain Reaction(RT-PCR) 13
(五)In vitro 細胞侵襲性實驗 14
(六)細胞存活率分析方法(MTT assay) 14
參、結果 15
肆、結論與討論 18
伍、參考文獻 22
實驗結果圖表 36
Abaza MS, Shaban F, Narayan RK and Atassi MZ, Human glioma associated intermediate filament proteins : over-expression , co-localization and cross-reactivity. Anticancer Res. 1998 18(2B):1333-1340.

Asklund T. Gap junction-mediated bystander effect in primary cultures of human malignant gliomas with recombinant expression of the HSV tk gene. Exp Cell Res. 2003 284:185-195.

Berens ME, Rief MD, Loo MA, Giese A: The role of extracellular matrix in human astrocytoma migration and proliferation studied in a microliter scale assay. Clin Exp Metastasis .1994 12: 405–415.

Boudreau NJ, Jones PL: Extracellular matrix and integrin signalling: the shape of things to come. Biochem J.1999 339:481–488.

Bouterfa HL, Sattelmeyer V, Czub S, Vordermark D, Roosen K, Tonn JC: Inhibition of Ras farnesylation by lovastatin leads to downregulation of proliferation and migration in primary cultured human glioblastoma cells. Anticancer Res.2000 20: 2761–2771.
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