臺灣博碩士論文加值系統

天然黃酮類化合物是植物體內的中間產物或代謝物，包括黃酮
(flavone) 、異黃酮(isoflavone) 、黃烷酮(flavanone) 、異黃烷酮
(isoflavanone)、查爾酮(chalcone)等，廣泛存在於藥用植物、水果和蔬
菜中，已有文獻指出，這類化合物具有多種生理及藥理活性，例如：
抗菌、抗發炎及抑制腫瘤細胞的生長等。在之前的文獻中指出
chalcone 具有抗癌與抗血管新生的活性，其抗癌機轉主要是結合
β-tubulin，與秋水仙素和CA-4 結合位置相同，導致tubulin 的聚合作
用消失。本篇研究是針對chalcone A 環上的C-2’,3’,4’,5’,6’位置或B
環上C-3,4 位置，以甲氧基、羥基、鹵素及雜環作為取代。由MTT
試驗中，我們發現TM 系列對於人類膀胱癌、肝癌、大腸癌、子宮頸
癌具有潛在的毒性。以TM-3 (0.055 μM)、TM-8 (0.061 μM)、TM-9
(0.15 μM)、TM-S (0.70 μM)及TM-O (1.80 μM)對於膀胱癌細胞株
BFTC905 和TM-3 (68 nM)及TM-8 (0.4 μM)對於大腸癌細胞SW480
有較強的毒性，並進行細胞週期的分析。發現TM-3、TM-8、TM-9、
TM-S 及TM-O 皆會造成G2/M phase arrest。因此繼續探討是否會抑
制微管(tubulin)聚合，結果發現TM-3、TM-9 及TM-S 具有明顯抑制
tubulin 的聚合，而TM-8 及TM-O 並無明顯抑制tubulin 聚合，所以
推測TM-8 及TM-O 會造成G2/M phase arrest，並不是抑制tubulin 聚
VIII
合所導致的，研判應是其他機轉所造成。在本篇研究結果中，我們篩
選出對人類膀胱癌細胞株毒殺效果最好的藥物TM-3 及TM-8，和新
的化合物TM-S，做為未來的研究方向，確定其作用機制，可做為新
的抗癌藥劑。

Chalcones (1, 3-diphenyl-2-propenone) are cancer preventive food
components found in a human diet rich in fruits and vegetables. Besides,
chalcones are known to exhibit antimitotic properties caused by inhibition
of tubulin polymerization by binding to the colchicine-binding site. Its
structure is similar to colchicine and combretastatin A-4 (CA-4). It has
extensive cytotoxic activity in many human cancer cell lines, including
prostate carcinoma, colon carcinoma, and lung carcinoma. Chalcones are
well-known to exhibit antimitotic properties caused by inhibition of
tubulin polymerization. In this study, we synthesized a series of chalcone
analogues by modifying the A-ring and B-ring. The series of chalcone
analogues are replaced C-2,3,4,5,6 of A-ring or C-3’,4’of B-ring with
methoxyl, hydroxyl, halide or heterocyclic. We evaluated the cytotoxicity
of these compounds in human cancer cell lines, such as bladder cancer
cell line BFTC905、liver cancer cell line HepG2、colon adenocarcinoma
cell line SW480、cervical epitheloid carcinoma cell line HeLa. In the
present report, TM-3, TM-8, TM-9, TM-S and TM-O have potent
anti-tumor activity in cultured bladder cancer cell line BFTC905 (IC50 =
0.055, 0.061, 0.15, 0.70, 1.80 μM respectively). Beside, TM-3 and TM-8
have potent anti-tumor activity in cultured colon adenocarcinoma cell line
SW480 (IC50 = 0.068, 0.4 μM, respectively). Therefor, we investigated
X
effect that TM-3, TM-8, TM-9, TM-S and TM-O obviously increase
G2/M. According to result, we study tubulin polymerization. In our study,
TM-8 and TM-O have not potent suppress tubulin polymerization. In
conclusion, we choose TM-3 and TM-8 have better cytotoxic activity in
BFTC905 cells and new compound TM-S, which TM-3, TM-8 and
TM-S may be developed as an effective new anti-tumor agent in the
future.

目 錄 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .I
表目錄 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .III
圖目錄. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . V
中文摘要. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . VII
英文摘要. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . IX
第一章、 前言. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1
第一節、 膀胱癌. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3
第二節、 大腸癌 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5
第三節、 子宮頸癌 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7
第四節、 肝癌 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8
第五節、 Combretastatin A-4 與chalcone 關係. . . . . . . . . . . . . 10
第六節、 細胞凋亡. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .10
第七節、 細胞週期. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .12
第八節、 細胞骨架蛋白. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .15
第二章、 研究動機與目的. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18
第三章、 材料與方法. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
第一節、 實驗試劑與試藥. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
II
第二節、 實驗儀器. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23
第三節、 Chalcone 衍生物之合成方法. . . . . . . . . . . . . . . . . . .24
第四節、 生物活性試驗. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29
第四章、 化合物之合成方法. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37
第一節、 Chalcone 衍生物之合成方法. . . . . . . . . . . . . . . . . . .37
第二節、 以雜環取代的類似Chalcone 衍生物的合成方法. . 53
第三節、 Chalcone 衍生物之氫化反應. . . . . . . . . . . . . . . . . . .54
第五章、 結果與討論. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .56
第一節、 抑制癌細胞生長的研究- MTT 試驗. . . . . . . . . . . . .56
第二節、 細胞週期分析. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .61
第三節、 In vitro 微管蛋白聚合試驗. . . . . . . . . . . . . . . . . . . .64
第四節、 In vivo 微管蛋白聚合試驗. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 66
第六章、 結 論. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .67
參考文獻. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .69
圖表目錄. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .73
附 錄. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 103

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