跳到主要內容

臺灣博碩士論文加值系統

(44.221.70.232) 您好!臺灣時間:2024/05/29 11:38
字體大小: 字級放大   字級縮小   預設字形  
回查詢結果 :::

詳目顯示

我願授權國圖
: 
twitterline
研究生:劉孔煜
研究生(外文):Kung-Yu Liu
論文名稱:白花蛇舌草(Hedyotisdiffusawilld.)細胞懸浮培養生產齊墩果酸、熊果酸之研究
論文名稱(外文):Production of oleanolic acid and ursolic acid by cell suspension culture of Hedyotis diffusa silld.
指導教授:何錦玟
指導教授(外文):Chin-Wen Ho
學位類別:碩士
校院名稱:大同大學
系所名稱:生物工程學系(所)
學門:工程學門
學類:生醫工程學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2009
畢業學年度:97
語文別:中文
論文頁數:55
中文關鍵詞:細胞懸浮培養白花蛇舌草熊果酸齊墩果酸
外文關鍵詞:Cell suspension cultureHedyotis diffusaursolic acidoleanolic acid
相關次數:
  • 被引用被引用:0
  • 點閱點閱:213
  • 評分評分:
  • 下載下載:0
  • 收藏至我的研究室書目清單書目收藏:1
以田間白花蛇舌草(Hedyotis diffusa willd.)莖段為培植體建立無菌培養系統,利用再生植株之莖頂為培植體,可誘導出白色鬆軟癒合組織,白色癒合組織繼代至含0.002 mgl-1 thidiazuron培養基中,可產生綠色緊實之胚性癒合組織,將胚性癒合組織繼代至不含生長調節劑之MS培養基可再生大量小植株。以白色癒合組織建立細胞懸浮培養,每個月繼代一次進行細胞增殖,白色的懸浮細胞逐漸轉成綠色懸浮細胞。分析不同來源之癒合組織及細胞,以懸浮培養之綠色細胞中齊墩果酸與熊果酸含量較高。細胞不同接種量進行生長曲線測試,結果以2 g/ 10 ml medium之接種量培養12天,細胞鮮重可增加2.2倍為最佳。為促進細胞中齊墩果酸與熊果酸之產量,以此接種量搭配不同培養因子、誘引劑及前驅物處理,培養週期為12天,培養基中提高蔗糖濃度至50 gl-1時,細胞中齊墩果酸與熊果酸含量增加為1017±167 μg/g DW,或者添加低濃度50 mgl-1果膠累積也可達1356±83 μg/g DW,所有處理以添加12 mgl-1 methyl jasmonate累積量最高,齊墩果酸及熊果酸含量1591±206 μg/g DW,為不加誘引劑累積量的3倍。
The stem of Hedyotis diffusa willd was used as explant to establish the in vitro culture system. For callus induction, shoot tips from regenerated plantlet were cultured on modified MS medium and the white friable callus proliferated from shoot tips. The green embryogenic callus formed when white callus were subcultured on MS medium supplemented with 0.002 mgl-1 thidiazuron. Plantlets regenerated when embryogenic callus was subcultured on MS medium without plant growth regulator. For cell suspention culture system, the white callus was cultured in modified MS medium and subcultured every month. The content of oleanolic and ursolic acid of four kinds of callus (white callus、green callus、white suspention cell and green suspention cell) were examined by high performance liquid chromatography. The green cell has the highest content of oleanolic and ursolic acid (538±77 μg/g DW) and the growth index of green cell line ( inoculum : 2 g/10 ml ) was 2.2 times within 12 days. In order to enhance the accumulation of oleanolic and ursolic acid in cell, cell was cultured in MS medium with different culture factor and precursor elicitor. The highest content of oleanolic and ursolic acid ( 1591±206 μg/g DW) in cell was shown when cell cultured in MS medium added with 12 mgl-1 methyl jasmonate after 12 days. The production of oleanolic and ursolic acid in cell was also promoted when medium added 50 gl-1 sucrose ( 1017±167 μg/g DW) or 50 mgl-1 pectin supplemented(1356 ±83 μg/g DW).
致謝 I
中文摘要 II
ABSTRACT III
目錄 V
表目錄 IX
圖目錄 X
縮寫字 XI
一、前人研究 1
1.1白花蛇舌草植株特性 1
1.2白花蛇舌草的藥理活性及成份研究 3
1.3熊果酸、齊墩果酸的簡介與功效 6
1.4 白花蛇舌草組織培養的相關研究 7
1.5利用誘引劑促進細胞生產熊果酸、齊墩果酸之研究 9
1.6研究目的 9
二、材料與方法 11
2.1植物材料 11
2.2無菌培養建立 11
2.3培養基組成 12
2.4培養環境 14
2.5癒合組織之誘導與植株再生 14
2.6萃取方式對萃取物中齊墩果酸、熊果酸含量分析的影響 14
2.7田間材料與in vitro細胞萃取液中的齊墩果酸、熊果酸含量比較 15
2.8不同接種量之細胞懸浮培養生長曲線 15
2.9培養因子對細胞生長及齊墩果酸、熊果酸生產之影響 16
2.9.1培養基pH值對細胞生長及齊墩果酸、熊果酸生產之影響 16
2.9.2培養基蔗糖濃度對細胞生長及齊墩果酸、熊果酸生產影響 16
2.10添加誘引劑、前驅物對細胞生長及齊墩果酸、熊果酸生產之影響 18
2.11齊墩果酸、熊果酸的HPLC分析 21
2.12齊墩果酸與熊果酸的標準品 21
2.13統計分析 22
三、結果 23
3.1癒合組織之誘導與植株再生 23
3.2萃取方式對萃取物中齊墩果酸、熊果酸含量的影響 28
3.3田間材料與in vitro 細胞萃取液中的齊墩果酸與熊果酸含量比較 30
3.4不同接種量之細胞懸浮培養生長曲線 32
3.5培養因子對懸浮培養之細胞生長及齊墩果酸、熊果酸生產之影響 38
3.5.1培養基pH值對細胞生長及齊墩果酸、熊果酸生產之影響 38
3.5.2培養基蔗糖濃度對細胞生長及齊墩果酸、熊果酸生產之影響 40
3.6 不同誘引劑、前驅物對細胞生長及齊墩果酸、熊果酸生產之影響 42
四、討論 44
4.1癒合組織之誘導與植株再生 44
4.2萃取方式對萃取物中齊墩果酸、熊果酸含量的影響 45
4.3田間材料與in vitro細胞累積的齊墩果酸、熊果酸含量比較 45
4.4細胞懸浮培養之生長曲線 46
4.5不同培養因子對於懸浮培養之細胞中齊墩果酸、熊果酸累積含量比較 47
4.6不同種類與濃度之誘引劑與前驅物對於懸浮培養細胞中齊墩果酸、熊果酸累積含量比較 48
五、結論 50
六、參考文獻 52
于瑞蓮、巢建國、許金國. 2006. 白花蛇舌草細胞懸浮培養的建立與條件優化. 海峽藥學18 : 132-134
王春濤、袁曉環、王曉東. 2008.白花蛇舌草體外誘導人肝癌HepG2細胞凋亡的初步研究. 牡丹江醫院學報29 : 4-5
王贊滔、黃艷麗、王文靜. 2006. 白花蛇舌草作用於人胃癌BGC2823後端粒�〞漫w量表達. 臨床輸血與檢驗8 : 116-117
尹平孫. 2008. 白花蛇舌草後市價格仍將看漲.中國現代中藥10 : 49
李春湖、黃彤、黃兆祥. 2005a. 白花蛇舌草人工栽培試驗初報. 江西農業學報17 : 79-80
李國平、黃群策、秦廣雍. 2005b. 白花蛇舌草葉片離體培養及試管無性系的建立. 廣西植物25 : 455-458
李賀敏、李潮海、王松江. 2008. 施肥對白花蛇舌草產量和品質的影響.河南農業大學學報42 : 18-21
李濤、余旭亞、韓本勇. 2008. 白花蛇舌草抑菌作用研究. 時珍國醫國藥19 : 1335-1336
林永佶. 2006. 白花蛇舌草組織培養及齊墩果酸和熊果酸含量之探討. 國立嘉義大學農學研究所碩士論文.
孟瑋、劉志強、邱世翠、韓兆東、張海霞. 2005.中藥白花蛇舌草對小鼠免疫功能影響的初步研究. 現代中西醫結合雜誌14 : 163-164
莫文先. 2008. 白花蛇舌草及其混淆品的鑑別. 基層醫學論壇12 : 444-445
周志勇、袁丁. 2008. 齊墩果酸的藥理作用與研究進展.中國醫院藥學雜誌28 : 2031-2033
席佳、唐海誼、鄭穎. 2009.齊墩果酸口服製劑及其體內藥動學研究進展.中國新藥雜誌18 : 507-515
張燁. 2006.白花蛇舌草對腫瘤細胞信號傳導通路的抑制.食品與生物技術學報25 : 50-53
張海洋、徐秀芳.2006.抗癌植物白花蛇舌草生物學特性及栽培技術. 2006(6)112-113
巢建國、談獻和、張瑜、劉海萍. 2005.白花蛇舌草組織培養研究.南京中醫藥大學學報21 : 369-370
斯建勇、陳迪華、潘瑞爾、趙曉宏. 2006.白花蛇舌草的化學成份研究.天然產物研究與開發18 : 942-944.
劉丹竹、王迪峰、宋蕾蕾、趙德千、周曉琳、趙龍鉉. 2008.齊墩果酸和熊果酸C-28位官能團的結構修飾和表徵.大連大學學報29 : 35-40
劉丹、孟艷秋、趙娟. 2007.齊墩果酸與熊果酸結構修飾物的藥理活性和構效關係研究進展.1 : 14-20
謝艷、林經云、任其華. 2006.白花蛇舌草中齊墩果酸和熊果酸的HPLC測定.中國醫藥工業雜誌37 : 559-561
關洪森、張守勤、侯麗麗、駱曉沛、梁清. 2008. 提取工藝對白花蛇舌草提取液穩定性和抗氧化活性的影響. 吉林大學學報38 : 214-218
Chia, T. F. , C. S. Hew and Y. K. Lee. 1988. Cell suspention culture of Hedyotis spp. .Bot. Gaz. . 149 : 376-381.
Duncan, D. B. , 1955, Multiple range and multiple F-test. Biometrics. 11: 1-42.
Feria-Romero, I. , E. Lazo, T. Ponce-Noyola, C. M. Cerda-Garcia-Rojas and A. C. Ramos-Valdivia. 2005. Induced accumulation of oleanolic acid and ursolic acid in cell suspension culture of Uncaria tomentosa. Biotechnol. Lett. 27: 839-843.
Flores-Sanchez, I. J. , J. Ortega-Lopez, M. d. C. Montes-Horcasitas, and A. C. Ramos-Valdivia. 2002. Biosynthesis of sterols and triterpenes in cell suspension culture of Uncaria tomentosa. Plant Cell Physiol. 43 : 1502-1509
Liu. , J. . 1995. Pharmacology of oleanolic acid and ursolic acid. J. Ethnopharmacol. 49 : 57-68.
Murashige, T. and F. Skoog. 1962. Arevised medium for rapid growth and bioassays with Tabacco tissue culture. Physiol. Plant. 15 : 437-497
Tan, H. T. W. and R. T. Corlett. 1987. Seed germination in Hedyotis Species(Rubiaceae). Biotropica. 19 : 286-288
Wang, J. W. , Z. H. Xia, J. H. Chu and R.X.Tan. 2004. Simultaneous production of anthocyanin and triterpenoids in suspension cultures of Perilla frutescens. Enzyme and Microb. Technol. 34 : 651-656.
QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
第一頁 上一頁 下一頁 最後一頁 top
無相關期刊