臺灣博碩士論文加值系統

本研究是以高效液相層析儀的C8以及C18兩種不同層析管柱分析市售番瀉葉茶包中sennoside A、B 的含量。C8 column所使用的層析條件為GL Sciences C8管柱(5 μm, 4.6 mm × 250 mm) ，移動相為 acetonitrile 和1% acetic acid solution採梯度沖提方式，偵測波長為270 nm。實驗結果發現sennoside A 滯留時間約為47 ~ 48分鐘，而sennoside B 的滯留時間約為53 ~ 54分鐘。其Sennoside A、B 之校正曲線均呈良好線性關係，Sennoside A 之線性迴歸方程式為y = 4655.5x + 2217.6 ，其決定係數(coefficient of determination)，R2為 0.9983; sennoside B為y = 7932.7x + 1248.3，其決定係數為0.9991。C18 column所使用的層析條件為Biosil C18管柱(5 μm, 4.6 mm × 250 mm)，移動相為acetonitrile 和1% acetic acid solution採線性梯度沖提方式，偵測波長為270 nm。實驗結果發現sennoside A之滯留時間約為22 ~ 23分鐘，而sennoside B 的滯留時間約為17 ~ 18分鐘。其Sennoside A、B 之校正曲線均呈良好線性關係，Sennoside A 之線性迴歸方程式為y =5424.9x – 29272，其決定係數，R2 = 0.9988，Sennoside B之線性迴歸方程式為y = 10655x ＋ 10468，其決定係數(Coefficient of determination)為0.9993。另外分析市售10件番瀉葉茶包樣品，以70% menthanol 萃取得知 sennosides 含量為每包2.18 ~ 41.73 mg。我國衛生署規定食品級番瀉葉茶包中sennosides總含量不得超過12 mg，若每包總含量超過12 mg 以上者，應以藥品級管理。由檢測結果顯示，市售不合格率為30%。
以C8及C18 column分析，在10件檢品中有2件所測得的sennosides含量差異較大，其餘的檢品所測得的sennosides含量均差不多。C8較C18 column的滯留時間長約2倍以上，雖然C8 column的滯留時間較長，其層析圖則有較少的干擾峰出現。

Two different high performance liquid chromatographic columns: C8 and C18 were used to analyze the content of sennoside A and B in commercially available senna leaf tea bags. Chromatography conditions used by the C8 column were GL Sciences C8 column (5 μm, 4.6 mm × 250 mm), with the mobile phase of acetonitrile and 1% acetic acid solution in gradient elution mode, while the detection wavelength was set at 270 nm. The results revealed that the retention time of sennoside A was about 47 - 48 min, while that of sennoside B was about 53 - 54 min. The calibration curves for sennoside A and B showed good linearity. The linear regression equation of sennoside A was y = 4655.5x + 2217.6, and its coefficient of determination (R2) was 0.9983; the equation for sennoside B was y = 7932.7x + 1248.3, and its coefficient of determination was 0.9991. Chromatography conditions used by C18 column were Biosil C18 column (5 μm, 4.6 mm × 250 mm), with the mobile phase of acetonitrile and 1% acetic acid solution in linear gradient elution mode, while the detection wavelength was set at 270 nm. The results revealed that the retention time of sennoside A was about 22 - 23 min, while that of sennoside B was about 17 - 18 min. The calibration curves of sennoside A and B showed good linearity. The linear regression equation for sennoside A was y = 5424.9x － 29272, and its coefficient of determination was 0.9988; the equation for sennoside B was y = 10655x + 10468, and its coefficient of determination was 0.9993. Ten samples of commercially available senna leaf tea bags were also analyzed, and an extraction with 70% menthanol showed that the sennosides content of each bag was 2.18 - 41.73 mg. The Department of Health’s provision is that the total content of sennosides in food-grade senna tea leaf bags shall not exceed 12 mg. If the total content in each bag exceeds 12 mg, the product shall be managed as pharmaceutical grade. The test results indicated that the unsatisfactory rafio of commercially available senna tea leaf bags was 30%.
Analysis with C8 and C18 columns revealed that two of the ten tested samples were significantly different in terms of the measured sennosides content, while the others were not much different in this regard. Retention time of C8 column was more than twice that of the C18 column. Despite the long retention time of C8 column, fewer interference peaks appeared in its chromatogram.

目錄
中文摘要 I
ABSTRACT III
目錄 V
圖目錄 VII
表目錄 VIII
附圖目錄 VIII
附表目錄 IX
壹、前言 1
貳、文獻整理 2
一、番瀉葉 2
(一)狹葉番瀉葉 2
(二)尖葉番瀉葉 2
二、 番瀉葉之藥理作用 3
(一)瀉下作用 3
(二)抗菌作用 3
(三)止血作用 4
(四)肌肉鬆弛作用 4
三、 番瀉葉主成分之生理作用與化學性質 4
(一)生理作用 4
(二)化學性質 5
四、 番瀉葉之毒性 6
五、 Sennoside A及Sennoside B之分析方法 7
参、材料與方法 9
一、材料 9
(一)番瀉葉茶包樣品 9
(二)標準品 9
(三)藥品 9
(四)HPLC層析管柱 9
(五)儀器 9
二、方法 10
(一)標準溶液配製 10
(二)番瀉茶包萃取 11
(三)Sennoside A及sennoside B之測定 12
肆、結果與討論 14
一、 C8 column 14
(一)分析方法建立 14
(二)不同萃取法所得之結果 14
二、 C18 column 15
(一)分析方法建立 15
(二)不同萃取法所得之結果 16
三、 C8 column及C18 column分析結果之比較 17
(一)檢量線 17
(二)甲醇萃取 17
(三)熱水萃取 17
伍、結論 19
陸、參考文獻 20

圖目錄
圖一、以C8 column 分析70%甲醇之高效能液相層析圖。 24
圖二、以C8 column 分析sennoside A及sennoside B標準品之高效能液相層析圖。 25
圖三、以C8 column分析Sennoside A之檢量線。 26
圖四、以C8 column分析Sennoside B之檢量線。 27
圖五、以C8 column分析不同萃取方法萃取番瀉葉茶包中sennosides含量。 28
圖六、以C18 column分析70%甲醇之高效能液相層析圖。 29
圖七、以C18 column分析sennoside A及Sennoside B標準品之高效能液相層析圖。 30
圖八、以C18 column分析sennosnde A之檢量線。 31
圖九、以C18 column分析sennosnde B之檢量線。 32
圖十、以C18 column分析不同萃取方法萃取番瀉葉茶包中sennosides含量。 33
圖十一、以C8 column分析甲醇萃取番瀉葉茶包樣品4之層析圖。 34
圖十二、以C18 column分析甲醇萃取番瀉葉茶包樣品4之層析圖。 35
圖十三、以不同的column分析甲醇萃取番瀉葉茶包中sennosides含量。 36
圖十四、以C8 column分析熱水萃取番瀉葉茶包樣品4之層析圖。 37
圖十五、以C18 column分析熱水萃取番瀉葉茶包樣品4之層析圖。 38
圖十六、以不同的column分析熱水萃取番瀉葉茶包中sennosides含量 39

表目錄
表一、番瀉葉茶包樣品上之標示 40

圖目錄
附圖一、蒽環；所有蒽崑類瀉藥的基本結構。蒽崑類瀉藥的組成分。 41
附圖二、蒽醌類瀉藥的三種組成。 42
附圖三、番瀉樹的成分及其代謝。 43
附圖四、番瀉苷A及番瀉苷B代謝成為大黃酸蒽酮。 44
附圖五、番瀉苷A及番瀉苷B的化學結構式。 45

附表目錄
附表一、C8 column梯度沖提時間表 46
附表二、以C8 column分析甲醇萃取之市售番瀉葉茶包中sennosides含量 47
附表三、以C8 column分析熱水萃取之市售番瀉葉茶包中sennosides含量 48
附表四、 以C18 column分析甲醇萃取之市售番瀉葉茶包中sennosides含量 49
附表五、 以C18 column分析熱水萃取之市售番瀉葉茶包中sennosides含量 50

中華本草編委會(國家中醫藥管理局)。1999。中華本草(4)。上海科學技術出版社。大陸國家中醫藥管理局。上海。
江蘇新醫學院。2005。中藥大辭典(下冊)。上海科學技術出版社。上海。2409。
米麗、李敬超、張夏華、吳廣通。2009。番瀉葉的化學成分和藥理作用研究進展。西南軍醫。11(4):727-728。
中醫藥資訊網。2010。行政院衛生署公告。http://www.ccmp.gov.tw
李佳玲。2004。市售番瀉葉茶包中sennoside A、B含量及浸出溫度、時間的影響。國立臺灣海洋大學食品科學系碩士論文。台北。
何偉、張朝波、嚴軍、柳燕。2008。HPLC法測定番瀉葉中番瀉苷A、番瀉苷B的含量。海峽藥學。20(9):48-51。
吳丹、鄭學寶。2010。番瀉葉的化學成分及臨床應用。
林雅姿、黃成禹、溫國慶。1998。市售減脂茶中sennoside A、B 含量測定。藥物食品分析。6 (1) : 433-438。
林觀樣、潘曉軍、蔡進章。2006。不同浸泡方法對番瀉葉中番瀉苷A浸出率的影響比較。Herald of Medicine。8(25):816-817。
周軍。2002。番瀉葉與偽品耳葉番瀉葉的鑑別。新疆中醫藥。20 (6) : 50。
郎秀狀、丁望。2005。番瀉葉的研究概況。實用醫技雜誌。12(5B)期:1294-1295。
高曄，朱艶華，賀微。2006。番瀉葉的藥用研究進展。中華中醫藥學刊。24(11):2145-2146。
袁鍾、圖姬、彭澤邦。1999。中醫辭海(下冊)。中國醫藥科技出版社。北京。159-160。
曹蔚、李教社、李小強、楊銀京。2003。番瀉葉的化學成分及體內代謝研究進展。時珍國醫國藥。14(10):642-643。
張彤、張霞昳。2007。番瀉葉的臨床應用。中國中醫藥現代遠程教育期刊。5(4):30-31。
劉順良、周月彩、李建新、孫桂云。2002。番瀉葉的化學成分毒性及用藥安全性研究。時珍國醫國藥。13(11):693-694。
楊書良，吳亞，楊波，徐静。2009。HPLC 法測定番瀉葉滴丸中番瀉苷B的含量。哈爾濱商業大學學報(自然科學版)。25(1):11-12。
鄭虎占、董澤宏、佘靖。1998。中藥現代研究與應用(5)。學苑出版社。北京。4407-4419。
鍾晨。2009。HPLC法測定大黃微波提取物中大黃酸和番瀉苷A的含量。廣東藥學院學報。25(5):483-485。
衛生署。2009。行政院衛生署公告。http://food.doh.gov.tw
蘇秀婷。2000。以HPLC法定量番瀉葉製劑中主成分番瀉甘A與B之研究。國立臺灣大學藥學研究所碩士論文。台北。
Bala, S., Uniyal, G. C., Dubey, T. and Singh, S. P. 2001. An improved method for the analysis of sennosides in Cassia angustifolia by HPLC. Phytochemical Analysis. 12 : 277-280.
Franz, G. 1993. The senna drug and its chemistry. Pharmacological. 47 :2-6.
Gorkom, B. A., Vries, E. G., Karrenbeld, A. and Kleibeuker, J. H. 1999. Review article: anthranoid Laxatives and their potential carcinogenic effects. Aliment Pharmacology & Therapeutics. 13:443-452.
Hallmann, F. 2000. Toxicity of commonly used laxatives. Medical Science Monitor. vol. 6, no. 3, pp. 618–628.

Koyama, J., Morita, I. and Kobayashi, N. 2007. Simultaneous determination of anthraquinones in rhubarb by high-performance liquid chromatography and capillary electrophoresis. Journal of Cchromatography A. 1145(1-2): 183-189.
Lin, C. C., Wu, C. I., Lin, T. C. and Sheu, S. J. 2006. Determination of 19 rhubarb constituents by high-performance liquid chromatography-ultraviolet-mass spectrometry. Journal of separation science. 29(17): 2584-2593.
Morales, M. A., Hernandez, D., Bustamante, S., Bachiller, I. and Rojas, A. 2009. Is Senna Laxative Use Associated to Cathartic Colon, Genotoxicity, or Carcinogenicity? Journal of Toxicology. 2009(287247):1-8.
Mascolo, N., Capasso, R. and Capasso, F. 1998. Senna. A safe and effective drug. Phytotherapy Research. 12 : 143-145.
Morinaga, O., Uto, T. and Sakamoto, S. Tanaka H. Shoyama Y. 2009. Enzyme-linked immunosorbent assay for total sennosides using anti-sennside A and anti-sennoside B monoclonal antibodies. Fitoterapia. 80, (1), 28-31.
Nusko, G., Schneider, B., Muller, G. Kusche, J. and Hahn, E. G. 1993.
Rectrospective study on laxative use and melanosis coli as risk factors
for colorectal neoplasma. Pharmacology. 47 (11) : 234-241.
Ritsema, G. H. and Eilers, G. 1994. Potassium supplements prevent serious hypokalaemia in colon cleansing. Clinical Radiology. 49 (12) : 874-876.
Srivastava, A., Pandey, R., Verma, R. K. and Gupta, M. M. 2006. Liquid chromatographic determination of sennosides in Cassia angustifolia leaves. Journal of AOAC International. 89(4): 937-941.
Sun, S. W. and Su, H. T. 2002. Validated HPLC method for determination of sennoside A and B in senna tablets. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 29 : 881-894.
Sun, Y., Li, X. and Yu, X. 2004. Determination of sennosides and degraded products in the process of sennoside metabolism by HPLC. Chinese journal of chromatography. 22(1): 48-50.
Takahashi, M., Miyazawa, M., Sakurai, K., Watabe, K. and Kojima, T. 2009. Study on processed senna found in health teas.. Journal of the Food Hygienic Society of Japan (Shokuhin Eiseigaku Zasshi). Vol.50, NO.6 pp.297-303.
Wu, Q. P., Wang, Z. J., Tang, L. Y., Fu, M. H., He, Y., Fang, J. and Gong, Q. F. 2008. Determination of five primary chemical constituents in Cassia angustifolia by HPLC. China journal of Chinese materia medica. 33(4): 363-365.
Yamasaki, K., Kawaguchi, M., Tagami, T., Sawabe, Y. and Takatori, S. 2010. Simple and rapid analysis of sennoside A and sennoside B contained in crude drugs and crude drug products by solid-phase extraction and high-performance liquid chromatography. Journal of natural medicines. 64(2): 126-132