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研究生:黃琮瑜
研究生(外文):Huang Tsung Yu
論文名稱:以RSM實驗設計法萃取山芙蓉中機能性成份之研究
論文名稱(外文):Investigation of the functional compounds extraction of Hibiscus taiwanensis by using response surface methodology
指導教授:潘建亮
指導教授(外文):Pan Jian Liang
口試委員:李承祐白育綸潘建亮
口試日期:2014-01-15
學位類別:碩士
校院名稱:高苑科技大學
系所名稱:化工與生化工程研究所
學門:工程學門
學類:化學工程學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2014
畢業學年度:102
語文別:中文
論文頁數:246
中文關鍵詞:山芙蓉RSM應答曲面法超臨界CO2流體系統總多醣螯合亞鐵離子清除DPPH自由基
外文關鍵詞:Hibiscus taiwanensis S. Y. Huresponse surface methodologysupercritical carbon dioxide fluid extractiontotal polysaccharidesferrous ions chelating activityscavenging DPPH free radicals activity
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本研究以一次一變因及RSM實驗設計法批次萃取台灣特有種的阿里山大葉山芙蓉,探討萃取物中的抗氧化物質與機能性功效。
超音波萃取可得一次一變因最佳條件為山芙蓉根莖部粉體添加量1.0 g、共溶劑乙醇添加量80.0 mL、萃取時間5.0 hr、酒精濃度35.0 %、萃取溫度23.0 ℃,三次萃取累積量總多醣為334.76 mgGlucose/g、總多酚為9.7576 mgGallic acid/g;而RSM實驗設計法最佳條件為山芙蓉根莖部粉體添加量1.0 g、共溶劑乙醇添加量110.387 mL、萃取時間10.0 hr、酒精濃度44.426 %、萃取溫度15.0 ℃,八次萃取累積量總多醣為359.9292 mgGlucose/g、總多酚為10.6004 mgGallic acid/g;將山芙蓉根莖部RSM最佳條件於山芙蓉花八次萃取累積量總多醣為697.6059 mgGlucose/g,總多酚為20.7256 mgGallic acid/g。
超臨界CO2流體在RSM實驗設計法可得最佳操作條件:1. 以收集槽體探討山芙蓉根莖部之總多醣操作條件為山芙蓉根莖部粉體添加量1.0 g、萃取壓力4500.0 psi、萃取溫度30.0 ℃、酒精濃度46.20 %、共溶劑乙醇的添加量74.20 mL、靜態萃取時間50.0 min、動態萃取時間20.0 min、洩壓流速8.0 NL/min,八次累積量及總量之總多醣為159.1715 mgGlucose/g、194.9047 mgGlucose/g;2. 以萃取槽體探討山芙蓉根莖部之總多醣操作條件為山芙蓉根莖部粉體添加量1.0 g、萃取壓力2000.0 psi、萃取溫度43.33 ℃、酒精濃度29.06 %、共溶劑乙醇的添加量30.0 mL、靜態萃取時間50.0 min、動態萃取時間50.0 min、洩壓流速4.0 NL/min,八次累積量及總量之總多醣為188.8925 mgGlucose/g、218.0963 mgGlucose/g;3. 以萃取槽體探討山芙蓉根莖部之螯合亞鐵離子螯合能力操作條件為山芙蓉根莖部粉體添加量1.0 g、萃取壓力3058.30 psi、萃取溫度60.0 ℃、酒精濃度37.92 %、共溶劑乙醇的添加量30.0 mL、靜態萃取時間50.0 min、動態萃取時間20.0 min、洩壓流速4.0 NL/min,一次萃取之螯合能力為91.68 %;4. 以萃取槽體探討山芙蓉根莖部之清除DPPH自由基效率操作條件為山芙蓉根莖部粉體添加量1.0 g、萃取壓力2000.0 psi、萃取溫度47.23 ℃、酒精濃度35.69 %、共溶劑乙醇的添加量70.0 mL、靜態萃取時間50.0 min、動態萃取時間50.0 min、洩壓流速4.0 NL/min,一次萃取之清除效率為91.23 %。將山芙蓉根莖部最佳RSM操作條件於山芙蓉花多醣一次萃取的效果相較芙蓉根莖部佳,為收集槽體中之總多醣為126.4635 mgGlucose/g。
利用RSM實驗設計法的模組設計,可縮短研究時間達兩倍之多。本研究提出的超音波模擬方程式  = N=1  A  ( 1 - exp ( - N ( t ) / B ) ) 及超臨界CO2流體模擬方程式  = N=1  A  ( 1 - exp ( - N ( tS + tD ) / B ) ),從實驗結果顯示此方程式可準確地預測。利用超臨界CO2流體萃取技術,能提升山芙蓉萃取物中的活性成份,且山芙蓉萃取物之機能性優勝於牛樟芝及葡萄酒粕,且與標準品 (Gallic、Trolox、BHT、EDTA) 活性相當,是一種對人體具有清除自由基及螯合人體重金屬的保健植物。
In this study, we sought individually the optimum extraction conditions of functional compounds and antioxidant ability from Hibiscus taiwanensis S. Y. Hu (Hibiscus t.S.Y.H.) by supercritical carbon dioxide fluid (SFE-CO2) with ethanol modifier and ultrasonic extraction using one-factor and response surface methodology (RSM).
In one-factor methodology of ultrasonic extraction, the optimum conditions under rhizome powder weight 1.0 g of Hibiscus t.S.Y.H. were addition volume of aqueous ethanol 80.0 mL, extraction time 5.0 hr, aqueous ethanol composition 35.0 % and extraction temperature 23.0℃. Under one-factor optimum conditions of ultrasonic extraction, the extract efficiency of 3 cycle batch extraction of total polysaccharides was 334.76 mgGlucose/g and total polyphenols was 9.7576 mgGallic acid/g.
In response surface methodology of ultrasonic extraction, the optimum conditions of polysaccharides under rhizome powder weight 1.0 g of Hibiscus t.S.Y.H. were addition volume of aqueous ethanol 110.387 mL, extraction time 10.0 hr, aqueous ethanol composition 44.426 %, extraction temperature 15.0℃. Under RSM optimum conditions of ultrasonic extraction, the rhizome powder extraction efficiency of 8 cycle batch extraction of total polysaccharides was 359.9292 mgGlucose/g (total polyphenols was 10.6004 mgGallic acid/g) and the flower powder extraction efficiency of 8 cycle batch extraction of total polysaccharides was 697.6059 mgGlucose/g (total polyphenols was 20.7256 mgGallic acid/g).
In response surface methodology of supercritical carbon dioxide fluid (SFE-CO2) with ethanol modifier, the optimum conditions of polysaccharides of collection vessel under rhizome powder weight 1.0 g of Hibiscus t.S.Y.H. were extraction pressure 4500.0 psi, extraction temperature 30.0℃, aqueous ethanol composition 46.20 %, addition volume of aqueous ethanol 74.20 mL, statics extraction time 50.0 min, dynamic extraction time 20.0 min, and CO2-flow rate 8.0 NL/min. Under the optimum conditions, the extract efficiency of 8 cycle batch extraction of polysaccharides was 159.1715 mgGlucose/g in collection vessel and total polysaccharides was 194.9047 mgGlucose/g (collection with vessel).
In extraction vessel, the optimum conditions of polysaccharides of RSM under rhizome powder weight 1.0 g of Hibiscus t.S.Y.H. were extraction pressure 2000.0 psi, extraction temperature 43.33℃, aqueous ethanol composition 29.06 %, addition volume of aqueous ethanol 30.0 mL, statics extraction time 50.0 min, dynamic extraction time 50 min, and CO2-flow rate 4.0 NL/min. Under the optimum conditions of extraction vessel, the extract efficiency of 8 cycle batch extraction of polysaccharides was 188.8925 mgGlucose/g in collection vessel and total polysaccharides were 218.0963 mgGlucose/g (collection with vessel).
In extraction vessel, the optimum conditions of ferrous ions chelating activity of RSM under rhizome powder weight 1.0 g of Hibiscus t.S.Y.H. were extraction pressure 3058.30 psi, extraction temperature 60.0℃, aqueous ethanol composition 37.92 %, addition volume of aqueous ethanol 30.0 mL, statics extraction time 50.0 min, dynamic extraction time 20 min, and CO2-flow rate 4.0 NL/min. Under the optimum conditions of extraction vessel, ferrous ions chelating activity of one batch extraction was 91.68 %.
In extraction vessel, the optimum conditions of scavenging DPPH free radicals activity of RSM under rhizome powder weight 1.0 g of Hibiscus t.S.Y.H. were extraction pressure 2000.0 psi, extraction temperature 47.23℃, aqueous ethanol composition 35.69 %, addition volume of aqueous ethanol 70.0 mL, statics extraction time 50.0 min, dynamic extraction time 50 min, and CO2-flow rate 4.0 NL/min. Under the optimum conditions of extraction vessel, scavenging DPPH free radicals activity of one batch extraction was 91.23 %. The polysaccharides extraction effect of flower powder was higher than rhizome powder at same RSM optimum conditions during one batch that was 126.4635 mgGlucose/g in collection vessel.
The research time of one-factor design is around two times than RSM design about the optimum extraction conditions of functional compounds and antioxidant ability from Hibiscus t.S.Y.H. by supercritical carbon dioxide fluid (SFE-CO2) with ethanol modifier and ultrasonic extraction. This study raises two simulation equations to fit the extract efficiency of polysaccharides, one is  = N=1  A  ( 1 - exp ( - N ( t ) / B ) ) of ultrasonic extraction and another is  = N=1  A  ( 1 - exp ( - N ( tS + tD ) / B ) ) of supercritical carbon dioxide fluid (SFE-CO2) with ethanol modifier extraction. Using supercritical carbon dioxide fluid to extract the antioxidants of Hibiscus t.S.Y.H., it could promote the extraction efficiency and the antioxidant activity. The antioxidant activities were higher than Antrodia cinnamomea and grape wine lees and approximately equal to Gallic, Trolox, BHT and EDTA. The extracts of Hibiscus t.S.Y.H. own high activity on scavenging DPPH free radicals and metal chelating, Hibiscus t.S.Y.H. that is a good choice about health care plants.
中文摘要 I
英文摘要 II
致謝 IV
目錄 V
表目錄 IX
圖目錄 XV
第一章、文獻回顧 1
1.1台灣山芙蓉型態介紹與藥理活性之評估 1
1.1.1台灣山芙蓉植物介紹 1
1.1.2台灣山芙蓉的化學成分與藥理活性 2
1.1.3台灣山芙蓉酚酸類物質化學結構式 4
1.2抗氧化物質與活性功效的介紹 6
1.2.1酚類化合物之活性介紹 6
1.2.2酚類化合物對人體的藥理活性 7
1.2.3多醣類物質之活性介紹 8
1.2.4多醣體對人體的藥理活性與分類 9
1.3超臨界流體介紹 10
1.3.1超臨界流體的歷史發展 11
1.3.2超臨界流體特性介紹 11
1.3.3超臨界二氧化碳特性與應用介紹 13
1.3.4超臨界流體在各領域上的應用 14
第二章、研究動機與目的 18
2.1研究動機 18
2.2研究目的 20
第三章、實驗與分析方法 23
3.1儀器與藥品 23
3.1.1儀器 23
3.1.2藥品 25
3.2實驗流程 28
3.3台灣山芙蓉來源 29
3.4超音波震盪萃取操作模式與萃取流程 29
3.4.1操作模式 29
3.4.2萃取流程 29
3.5超臨界流體萃取操作模式與萃取流程. 30
3.5.1操作模式 30
3.5.2超臨界流體CO2萃取設備系統標準操作步驟 30
3.5.3萃取流程 31
3.6抗氧化活性物質測定 32
3.6.1總多酚量之檢測流程 32
3.6.1.1檢量線製作 32
3.6.1.2樣品測定 32
3.6.2總類黃酮量之檢測流程 33
3.6.2.1 Flavonols類黃酮分析方法檢量線製作 34
3.6.2.2樣品測定 34
3.6.2.3 Flavanones類黃酮分析方法檢量線製作 35
3.6.2.4樣品測定 35
3.6.3總醣分析:硫酸苯酚呈色法 (phenol-sulfuric acid assay) 36
3.6.3.1檢量線製作 36
3.6.3.2樣品測定 36
3.6.4葫蘿蔔素量測定法之檢測流程 37
3.6.4.1樣品測定 37
3.6.5葉綠素含量測定法之檢測流程 37
3.6.5.1樣品測定 37
3.7機能性分析 38
3.7.1 FRAP (Ferric reducing antioxidant potential) 測定法 38
3.7.1.1檢量線製作 38
3.7.1.2樣品測定 38
3.7.2還原力 (Reducing power) 測定法之檢測流程 39
3.7.2.1檢量線製作 40
3.7.2.2樣品測定 40
3.7.3清除DPPH自由基測定法 (Free radical scavenging activity DPPH 41
method) 之檢測流程 41
3.7.3.1樣品測定 41
3.7.4螯合亞鐵離子能力測定 (Metal chelating activity) 之檢測流程 41
3.7.4.1樣品測定 41
3.8實驗設計法相關介紹 42
3.9反應曲面法相關介紹 42
3.9.1二階因子實驗設計 42
3.9.2陡升途徑法 44
3.9.3中心組合設計 45
第四章、結果與討論 46
4.1山芙蓉根莖部於超音波一次一變因批次萃取 46
4.1.1改變山芙蓉根莖部粉體添加量及添加不同共溶劑對萃取效率之影響 46
4.1.2改變共溶劑添加量對山芙蓉根莖部萃取效率之影響 55
4.1.3改變萃取時間對山芙蓉根莖部萃取效率之影響 58
4.1.4改變酒精濃度對山芙蓉根莖部萃取效率之影響 61
4.1.5改變萃取溫度對山芙蓉根莖部萃取效率之影響 64
4.1.6超音波最佳條件多次萃取對山芙蓉根莖部萃取效率之影響 67
4.2 山芙蓉根莖部於RSM實驗設計法之超音波批次萃取 71
4.2.1以四項操作參數探討超音波萃取山芙蓉根莖部最適化的影響因子 71
4.2.2以陡升途徑法探討超音波萃取山芙蓉根莖部最佳操作條件 77
4.2.3以中心組合實驗設計探討超音波萃取山芙蓉根莖部最佳萃取條件 79
4.2.4超音波最佳條件多次萃取探討山芙蓉根莖部之模擬回歸預測曲線 84
4.3 山芙蓉根莖部於RSM實驗設計法之超臨界CO2流體批次萃取 89
4.3.1以七項操作參數探討超臨界CO2流體萃取山芙蓉根莖部最適化的影響因子 89
4.3.1.1六十四組操作條件對山芙蓉根莖部於收集槽體中各項活性之影響 90
4.3.1.2六十四組操作條件對山芙蓉根莖部於萃取槽體中各項活性之影響 91
4.3.1.3不同槽體對山芙蓉根莖部抗氧化活性物質與機能性功效之影響 92
4.3.2以陡升途徑法探討超臨界CO2流體萃取山芙蓉根莖部最佳操作條件 158
4.3.2.1以收集槽體探討山芙蓉根莖部於總多醣最佳萃取效率 158
4.3.2.2以萃取槽體探討山芙蓉根莖部於總多醣最佳萃取效率 158
4.3.2.3以萃取槽體探討山芙蓉根莖部於螯合亞鐵離子最佳螯合能力 159
4.3.2.4以萃取槽體探討山芙蓉根莖部於清除DPPH自由基最佳清除效率 159
4.3.3以中心組合實驗設計法探討超臨界CO2流體萃取山芙蓉根莖部最佳萃取條件 164
4.3.3.1以收集槽體探討山芙蓉根莖部於總多醣反應曲面圖及等高線圖 164
4.3.3.2以萃取槽體探討山芙蓉根莖部於總多醣反應曲面圖及等高線圖 169
4.3.3.3以萃取槽體探討山芙蓉根莖部於螯合亞鐵離子之反應曲面圖及等高線圖 174
4.3.3.4以萃取槽體探討山芙蓉根莖部於清除DPPH自由基之反應曲面圖及等高線圖 179
4.3.4超臨界CO2流體最佳條件多次萃取探討山芙蓉根莖部之模擬回歸預測曲線 184
4.3.4.1以收集槽體探討山芙蓉根莖部於總多醣之模擬回歸預測曲線 184
4.3.4.2以萃取槽體探討山芙蓉根莖部於總多醣之模擬回歸預測曲線 191
4.3.4.3以萃取槽體探討山芙蓉根莖部於螯合亞鐵離子最佳螯合能力 197
4.3.4.4以萃取槽體探討山芙蓉根莖部於清除DPPH自由基最佳清除效率 203
4.4不同萃取方式探討山芙蓉花對抗氧化活性物質與機能效功效之影響 209
4.4.1山芙蓉花於超音波批次萃取 209
4.4.2山芙蓉花於超臨界CO2流體批次萃取 215
4.5定量不同濃度探討山芙蓉於不同萃取方式對機能性之影響 218
4.5.1超音波萃取山芙蓉在定量不同濃度對機能性之影響 218
4.5.2超臨界CO2流體萃取山芙蓉在定量不同濃度對機能性之影響 221
4.5.3山芙蓉最佳機能性能力對牛樟芝、葡萄酒粕及相關標準品比較 227
第五章、結論與建議 232
5.1超音波萃取 232
5.2超臨界CO2流體萃取 235
5.3山芙蓉與牛樟芝、葡萄酒粕及相關標準品之機能性比較 240
5.4結論 240
5.5未來展望 240
參考文獻 241
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【42】楊淑涵,「分離自淡水之新屬和新種細菌的鑑定與應用」,碩士論文,國立高雄海洋科技大學海洋生物技術系暨研究所,高雄,2012年。
【43】曾煥中,「以超臨界流體萃取/液相層析質譜法進行龍眼核成分分析」,碩士論文,嘉南藥理科技大學生物技術系,台南,2008年。
【44】錢啟禎,「以統計實驗計劃法建立超臨界流體清洗晶圓的最適化方法」,碩士論文,輔英科技大學環境工程與科學系碩士班,高雄,2011年。
【45】徐子卉「以超臨界二氧化碳萃取青蔥抗氧化成分之探討」,碩士論文,經國管理暨健康學院健康產業管理研究所,基隆,2012年。
【46】江懿宸「金屬型態對超臨界流體去除土壤重金屬汙染物之效率影響」,碩士論文,朝陽科技大學環境工程與管理系,台中,2007年。
【47】Orabi K.Y., Abaza M.S., Sayed K.A.E., Elnagar A.Y., Al-Attiyah R., Guleri R.P., “Selective growth inhibition of human malignant melanoma cells by syringic acid-derived proteasome inhibitors”, Cancer Cell International, 13(82), pp.1-15, 2013.
【48】張智韋「反壓控制超臨界流體微細發泡射出成形之氣泡成長數值模擬」,碩士論文,國立台灣科技大學機械工程系,台北,2013年。
【49】孫立明「利用超臨界流體去除鋼鐵業集塵灰中多環芳香烴“芘”之研究」,碩士論文,朝陽科技大學環境工程與管理系,台中,2008年。
【50】陳冠憲「以索式與超臨界二氧化碳萃取蕃茄紅素及其穩定性之研究」,碩士論文,國立成功大學化學系,台南,2000年。
【51】劉家宏「利用超臨界二氧化碳萃取與純化茶葉中之兒茶素」,碩士論文,長庚大學化工與材料工程研究所,桃園,2003年。
【52】陳宜萱、吳裕仁、潘孝萱、陳正吉、蔡豐仁、 鄭智交,「綠竹葉萃取液之抗氧化活性分析及其美容應用之評估」,美容科技學刊,第7卷,第1期,第19-36頁,2010年。
【53】曾文楷、陳宜嫻、官常慶,「菊花萃取物於抗氧化、抑制黑色素生成及抗致突變的研究」,臺灣農業化學與食品科學,第47卷,第1期,第47-54頁,2009年
【54】吳珮瑄、蔡佩宜、侯嘉隆、潘一紅,「抗老化中草藥活性組合應用於膚質改善之研究」,美容科技學刊,第5卷,第2期,第17-24頁,2008年。
【55】蔡呈芳,「皮膚抗老化處理的現況」,臺灣醫學,第12卷,第5期,第564-576頁,2008年。
【56】黃梓柔,陳志杰,方嘉佑「天然抗氧化物之經皮輸藥系統研究:以白藜蘆醇及大豆異黃酮為例」,長庚科技學刊,第11期,第1-10頁,2009年。
【57】Chai T.T., Esvini P., Ong H.C., Wong F.C., “Phenolic contents and antioxidant properties of Stenochlaena palustris, an edible medicinal fern”, Botanical Studies, 53, pp.439-446, 2012.
【58】Srinivasan N., Subramanivn V., Perumal S., “Differential Effects of Processing Methods Total Phenolic Content, Antioxidant and Activities of Three Species of Solanum”, Journal of Food and Drug Analysis, 20(4), pp.844-854, 2012.
【59】張謙裕,「樟芝菌絲體量產技術開發及相關功能性之探討」,博士論文,國立臺灣大學生命科學院微生物與生化學研究所,台北,2007年。
【60】黃壬瑰,「水中葉綠素a—螢光光度檢測法」,環檢通訊雜誌,第49期,2004年。
【61】溫添進,林世民,「應答曲面法應用於化工研究」,化工,第38卷,第5期,第57-80頁,1991年。
【62】范勝欽,「以實驗設計法及表面張力效應探討填充床吸收塔之影響因子及界面現象分析」,碩士論文,中原大學化學工程系,桃園,2002年。
【63】陳明儀,「以田口實驗設計法與灰關聯分析應用於生物膜反應器之建構與分析」,博士論文,國立成功大學化學工程研究所,台南,2003年。
【64】Himmelblau D.M., “Process analysis by statistical methods”, John Wiley and sons, Inc., New York, pp.230-292, 1970.
【65】郭崑福,「利用實驗設計法開發一抗組織胺藥物之最佳化處方」,碩士論文,嘉南藥理科技大學藥物科技研究所,台南,2009年。
【66】Box G.E., Wilson K., “On the experimental attainment of optimum conditions”, Journal of The Royal Statistical Society Series B Methodological, 13, pp.1-45, 1951.
【67】Hunter W.G., Hunter J.S., “Statistics for experimenters”, Interscience, New York, pp.453, 1978.
【68】Montgomery D., “Experiments to compare several treatments: The analysis of variance”, Design and Analysis of Experiments, pp.43-80, 1984.
【69】羅泳勝,「以反應曲面實驗設計法探討本土厭氧產氫菌Clostridium butyricum CGS2之最佳醱酵產氫條件」,碩士論文,國立成功大學化學工程學系,台南,2005年。
【70】謝志新,「以實驗設計法做半導體廠鍋爐熱水供應系統節費之研究」,碩士論文,亞洲大學資訊工程系,台中,2010年。
【71】林桓正,「以二階子模型結合實驗設計法進行多晶片模組可靠度之最佳化分析」,博士論文,國立成功大學工程科學系,台南,2007年。
【72】林宗佑,「應用實驗設計法於難溶藥物處方之研究」,碩士論文,嘉南藥理科技大學藥物科技研究所,台南,2009年。
【73】張聰民、卓小嵐「胎盤素化妝品抗老化功效的評估研究」,元培學報,第18期,第33-44頁,2011年。
【74】呂明諺「以超臨界二氧化碳流體萃取紅酒粕中機能性分析之研究」,碩士論文,高苑科技大學化工與生化工程研究所,高雄,2011年。
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1. 【52】 陳宜萱、吳裕仁、潘孝萱、陳正吉、蔡豐仁、 鄭智交,「綠竹葉萃取液之抗氧化活性分析及其美容應用之評估」,美容科技學刊,第7卷,第1期,第19-36頁,2010年。
2. 【34】 梁健成、王銘富、朱桓儀、余信諭、黃克峰「化妝品成分的植物來源與應用」,美容科技學刊,第4卷,第2期,第13-18頁,2007年。
3. 【33】 邱坤偉、洪桂彬、陳華偉、陳怡華、賴昆謙「宜蘭金棗萃取物之清除自由基研究」,美容科技學刊,第9卷,第1期,第131-139頁,2012年。
4. 【32】 洪啟峰「植物類黃酮不可缺的抗老化成份」,健康世界,第276期,第10-11頁,2008年。
5. 【31】 張筱珮、陳玉華「抗老化之機能性化妝品市場趨勢及應用」,化工,第55卷,第3期,第55-62頁,2008年。
6. 【30】 簡廷易、林佳文、王靜瓊,「薑汁製備方式與薑成熟度對其薑醇含量及抗氧化活性之影響評估」,民生論叢,第7期,第37-47頁,2012年。
7. 【11】 陳敏婷、黃文濤、秦作威、施科念,「兩種酚酸類化合物抗氧化能力與作用於類造骨細胞的生理效應」,加馬,第43期,第37-43頁,2012年。
8. 【10】 白惇婷,林威凱,李宛璇,許瑋昕,賴世明,「由農業副產品分離純化阿魏酸相關的生物活性物質」,化工,第58卷,第1期,第50-70頁,2011年。
9. 【9】 高而仕,「超臨界二氧化碳萃取洛神花多酚成分及其抗氧化活性之研究」,美容科技學刊,第8卷,第3期,第106-127頁,2011年。
10. 【53】 曾文楷、陳宜嫻、官常慶,「菊花萃取物於抗氧化、抑制黑色素生成及抗致突變的研究」,臺灣農業化學與食品科學,第47卷,第1期,第47-54頁,2009年
11. 【54】 吳珮瑄、蔡佩宜、侯嘉隆、潘一紅,「抗老化中草藥活性組合應用於膚質改善之研究」,美容科技學刊,第5卷,第2期,第17-24頁,2008年。
12. 【55】 蔡呈芳,「皮膚抗老化處理的現況」,臺灣醫學,第12卷,第5期,第564-576頁,2008年。
13. 【56】 黃梓柔,陳志杰,方嘉佑「天然抗氧化物之經皮輸藥系統研究:以白藜蘆醇及大豆異黃酮為例」,長庚科技學刊,第11期,第1-10頁,2009年。
14. 【73】 張聰民、卓小嵐「胎盤素化妝品抗老化功效的評估研究」,元培學報,第18期,第33-44頁,2011年。
15. 王毓敏、林繼正、陳月嬌(2008)。EMBA班學習動機、價值觀、學習障礙與學習行為之探討。國立虎尾科技大學學報,27(1),89-108。