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研究生:孫嘉穗
研究生(外文):Chia-Sui Sun
論文名稱:發酵條件對液化澱粉芽孢桿菌抗紫外線之研究
論文名稱(外文):Study of fermentation conditions for UV resistance of Bacillus amyloliquefaciens
指導教授:謝建元謝建元引用關係
指導教授(外文):Chien-Yan Hsieh
學位類別:碩士
校院名稱:國立高雄師範大學
系所名稱:生物科技系
學門:生命科學學門
學類:生物科技學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2014
畢業學年度:102
語文別:中文
論文頁數:81
中文關鍵詞:液化澱粉芽孢桿菌紫外線保護劑二次代謝產物紫外線
外文關鍵詞:Bacillus amyloliquefaciensUV protectantsecondary metabolitesultraviollet
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紫外線和儲存環境容易破壞液化澱粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)的生物拮抗活性,導致田間使用量增加、造成成本上升。因此本研究針對實驗室的三株菌株 B. amyloliquefaciens (A1、BF and CY) ,探討紫外線培養條件、照射處理時間和UV保護劑的添加,進行抗紫外線能力的菌株篩選。爾後選出B. amyloliquefaciens F-1 (BF) 利用UVA的培養與UVB的處理下,在繼代培養中使菌株的遺傳特質發生變異,討論添加紫外線保護劑後不同配方的存活率變化。經UVB處理後,存活率部分在第一至四組處理配方中,存活百分比最高的繼代數與G0 (未經過紫外線處理的原始菌數)比較下,存活率分別為第一組83 %、第二組82 %、第三組87 %、第四組82 % 以上。最後分析各組的二次代謝產物含量部分(surfactin和iturin A),皆是第一組處理配方最高( 1649.56 mg/L、166.05 mg/L)。
Bacillus amyloliquefaciens of ultraviolet light and easily destroyed its biological pesticide active storage environment, resulting in increase the use the field, resulting in rising costs. Therefore, the research performed for the three B. amyloliquefaciens (A1、BF and CY), discussion ultraviolet culture conditions, adding time and UV irradiation protective agent, and which UV protectant capabilities. Thereafter selected B. amyloliquefaciens F-1 (BF) using the UVA exposure and UVB treatment, in generation of genetic traits strains mutate a survival rate of change and discuss different formulations after adding UV protection agents. After the strain after UVB treatment, the survival rate in the first to fourth Section the group process formulations, following the highest percentage of generation of survival rate and G0 (UVB un-exposure the original cell) comparison, survival rates were 83% for the first group, the second group of 82%, the third group of 87% and the fourth group of 82%. Finally, part of the analysis of secondary metabolite content of each group (surfactin and iturin A), which are the first group to handle recipe highest (1649.56 mg / L, 166.05 mg / L).
壹、 前言 1
貳、文獻回顧 3
2.1液化澱粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)概況 3
2.2 生長曲線 4
2.3孢子萌發過程 (Germination) 4
2.4紫外線的分類 (UV) 5
2.5 UV保護因子 8
2.5.1化學性紫外線保護劑 8
2.5.2生物性紫外線保護劑 8
2.6 黑色素的應用 9
2.6.1黑色素與抗紫外線的關係 9
2.7光修復(Photorecovery) 10
2.8田口方法(Taguchi Methods) 12
2.9清除,-diphenyl--picryhydrazyl (DPPH) 13
2.10二次代謝產物 14
參、材料與方法 16
3.1實驗藥品 16
3.2實驗器材 17
3.3實驗菌種來源 18
3.4菌種純化、保存 18
3.5田口直交表 19
3.5.1培養基配置與實驗項目 20
3.6菌落形成單位(CFU, Colony-Forming Units) 20
3.7抗紫外線活性測試 21
3.7.1培養過程UVA 持續照射 21
3.7.2三株菌照射UVB一小時 21
3.7.3三株菌之不同培養基 22
3.7.4三株菌之不同UVB照射時間 22
3. 8 BF與光照射之繼代培養 23
3. 9細菌經紫外線處理後的存活率方法與計算 23
3.10清除,-diphenyl--picryhydrazyl (DPPH) 24
3.11 HPLC分析二次代謝產物 25
肆、結果 27
4.1液化澱粉芽孢桿菌之三株菌篩選 27
4.1.1照射UVB一小時之三株菌結果 27
4.1.2三株菌不同培養基照射UVB一小時之結果 28
4.1.3三株菌與不同UVB照射時間之結果 30
4.2 BF與光修復之繼代培養 31
4.3 BF之DPPH(自由基清除率)之結果 32
4.4 BF之二次代謝產物結果 33
伍、討論 34
5.1液化澱粉芽孢桿菌之三株菌篩選 34
5.1.1三株菌照射UVB一小時之討論 34
5.1.2三株菌不同培養基照射UVB一小時之討論 34
5.1.3 三株菌與不同UVB照射時間之討論 35
5.2 BF與光修復之繼代培養 37
5.3 BF之DPPH(自由基清除率)討論 39
5.4 BF之二次代謝產物討論 39
陸、結論 41
柒、參考文獻 45
捌、圖表 51
玖、附錄 74
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