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研究生:童夢蘭
研究生(外文):Meng-Lan Tung
論文名稱:ConA–Sepharose層析於果糖苷酶部分純化之應用
論文名稱(外文):Application of ConA – Sepharose Chromatography on Partial Purification of Fructofuranosidase
指導教授:許垤棋
指導教授(外文):Dey-Chyi Sheu
口試委員:許垤棋
口試委員(外文):Dey-Chyi Sheu
口試日期:2015-06-04
學位類別:碩士
校院名稱:大同大學
系所名稱:生物工程學系(所)
學門:工程學門
學類:生醫工程學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2015
畢業學年度:103
語文別:中文
論文頁數:123
中文關鍵詞:親和層析法β-呋喃果糖苷酶凝集素法夫酵母新蔗果三糖刀豆新蔗果四糖
外文關鍵詞:neonystoseAffinity Chronatographyβ-FructofruanosidaseCon A-SepharoseXanthophyllomycesLectinneokestose
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法夫酵母Xanthophyllomyces dendrorhous BCRC 21346,其細胞內的新果糖轉移酵素可將蔗糖轉變為新果寡糖。新果寡糖包括:新蔗果三糖(neokestose)和新蔗果四糖(neonystose)。β-呋喃果糖苷酶(β-fructofruanosidase)是一種果糖苷轉移酶(fructosyl transferase),其 作用是將蔗糖轉變成新果寡糖(neo-fructooligosaccharides)。新果寡糖可促進腸道內比菲德氏菌的增殖,促進人體健康,是一種重要的益生源(prebiotics)。
Concanavalin A(ConA)是一種從Canavalia ensiformis(刀豆,Jack Beans )萃取出來的植物凝集素(Lectin),可與mannose,glucose,dextran等醣類或醣蛋白上的醣類產生親和性吸附作用,所以已廣泛地應用在醣蛋白的純化上。
凝集素的應用主要是依靠與醣蛋白結合的專一性,刀豆球蛋白A是最早發現,也是研究應用最多的凝集素,大部分特性都是已知,所以最適合用來實驗新的測試方法。在這個實驗中,我們希望果糖苷酶的製備上發展一套便利的程序純化,ConA–sepharose親和層析法可以提高新果寡糖純化倍數達百倍以上。
The intracellular neo-fructosyltransferase from the yeast Xanthophyllomyces dendrorhous BCRC 21346 catalyzes the conversion of sucrose into neofructooligosaccharides (neo-FOS).Neo-FOS comprises neokestose and eonystose. β-Fructofruanosidase from culture of Xanthophyllomyces dendrorhous BCRC 21346 can converte sucrose into neofructooligosaccharides (neo-FOS),which is an important prebiotic. Concanavalin A (Con A) is a lectin isolated from Canavalia ensiformis (Jack Bean). It specifically binds to mannose, glucose and glycoproteins containing mannose. Lectin is used as a tool in identification and measurement of glycoproteins. Concanavalin A(Con A) is the first lectin found, therefore it is most studied and best choice for modeling novel protocols. In order to develop a simple and rapid purification process for glucoproteins, Con A-Sepharose was used for the purification of fructofuranosidase from X. dendrorhous, because in asingle process more than hyndreds folds of purification could be achieved.
本文目錄
第一章:緒論 1
1.1 前言 1
1.2 研究目的 2
第二章:文獻回顧 3
2.1 寡糖(oligosaccharides)簡介 3
2.1.1寡糖之定義 3
2.1.2寡糖之來源 4
2.1.3寡糖的特性及對生理腸道的影響 4
2.2 果寡糖(fructooligosaccharides,FOS)簡介 6
2.2.1果寡糖之定義與分子結構 6
2.2.2果寡糖的來源與生產 8
2.2.3果寡糖的生理功能 11
2.3 果糖轉移酶(fructosyltransferase)簡介 12
2.3.1果糖轉移酶的反應機制 14
2.3.2果糖轉移的酵素特性 16
2.3.3β-呋喃果糖苷酶(β-fructofuranosidase)的研究發現 18
2.4 新果寡糖(Neo-fructooligosaccharides,Neo-FOS)簡介 22
2.4.1新果寡糖的製備 24
2.5 親和層析法(affinity chromatography)原理簡介 26
2.5.1親和層析材質的選擇 30
2.5.2親和層析樣品的分離 33
2.5.3親和層析法的應用 35
2.6 醣類的結構 37
2.6.1醣蛋白(glycoprotein)的特性 39
2.6.2醣蛋白的分離純化 40
2.6.3醣蛋白的主要生理功能 40
2.7 凝集素(lectin) 41
2.8 伴刀豆球蛋白(ConA)簡介 45
2.8.1 伴刀豆球蛋白(ConA)的基本性質 46
2.8.2 伴刀豆球蛋白(ConA)的應用 47
第三章:實驗材料與設備儀器 51
3.1 實驗材料 51
3.1.1 菌種 51
3.1.2 藥品 51
3.2 設備儀器 52
第四章:實驗方法 53
4.1 萃取胞內酵素 53
4.1.1 攪拌式珠磨均質機與玻璃珠 54
4.1.2 破菌程序及作用 56
4.2 離心 58
4.2.1 離心機原理 58
4.2.2 離心程序及作用 60
4.3 使用多孔陶瓷管柱過濾 61
4.3.1 菌液胞內酵素活性的測定 61
4.3.2 DNS 活性的測定 66
4.3.3 分光光度計分析酵素的定性定量 68
4.4 用 Hollow Fiber 純化酵素濃縮液 71
4.5 ConA-Sepharose原理 74
4.5.1 利用ConA-Sepharose純化醣蛋白 75
4.6 透析原理 81
4.6.1 透析應用 82
4.7 冷凍乾燥濃縮 85
4.8 SDS-PAGE 電泳測定蛋白質分子量 91
4.8.1 電泳(electrophoresis)原理 91
4.8.2 電泳系統的解析 93
4.8.3 焦集膠体的焦集作用及其作用原理 94
4.8.4 SDS-PAGE 電泳膠片製備 97
第五章:實驗結果與結論 98
5.1 多孔陶瓷過濾純化酵素過濾液與原液活性的比較 98
5.2 Hollow fiber 純化酵素濃縮液與穿透液活性的比較 99
5.3 ConA-Sepharose 純化酵素 100
5.4 純化酵素分子量的測定 101
5.5 結論 102
5.5.1 緩衝溶液對純化酵素的影響 102
5.5.2 濾膜孔徑大小對酵素活性的影響 103
5.5.3 ConA-Sepharose 親和層析法 104
一、中文部分(按年代排列)
岡田淳‧果寡糖的快腸效果‧正義出版社
林藹寧‧生技產品之回收與純化技術‧生物技術開發中心
莊榮輝、蘇仲卿(1987)蛋白質膠體電泳檢定法。
電泳分離技術研討會論文集頁69-77。
曾義雄等人主編。研討會專集 (九)。
國科會生物中心
許清森(1991)利用酵素合成法由蔗糖生成低聚果糖之研究
國立台灣大學, 農業化學研究所博士論文。
周映湘(1994)日本寡糖市場概況,食品與開發,4:50-55。
段國仁(1994)機能性寡醣的開發與應用,生化工程,41(2):11-21。
鄭慧文(1997)新世紀健康食品(二),宏欣文化事業有限公司,台北。
吳明道(1998)淺談對Gal 和GalNAc有特異性的應用凝集素
(Applied lectins)對醣類結合性質的表達和分類
生命科學簡訊.12(1)
蘇遠志(1999)保健用食品之管理及產業現狀(下),生物產業,
10(4):227-232。
莊榮輝 主編 (2000)酵素化學實驗。台灣大學農化系。頁147,205
簡青山(2000)利用麩蛋白包埋菌體來生產果寡糖
國立中正大學,化學工程研究所碩士論文。
王姿惠(2001)益生菌於含果寡糖之培養環境中生長情形之探討
國立中興大學,食品科學研究所碩士論文。
謝佳佩(2002)木寡糖對腸道菌相及結腸癌前病變之影響
私立靜宜大學,食品營養研究所碩士論文。
李一忠(2002)利用兩種固定酵素生產果寡糖於氣舉式反應器中
國立中正大學,化學工程研究所碩士論文。
郭俐亨(2003) 探討性荷爾蒙在Concanavalin A誘發小鼠肝炎的調節角色
國立成功大學,微生物暨免疫學研究所碩士論文。
蘇碧鳳(2004)磺酸化果寡糖及其抑制血管增生之研究
國立東華大學,生物技術研究所碩士論文。 莊淑雯(2005)寡木醣與營養教育對肥胖者血脂及腸道菌叢之影響
私立靜宜大學,食品營養研究所碩士論文。
張雅涵(2006)寡木醣對第2型糖尿病患者血脂肪影響之研究
私立靜宜大學,食品營養研究所碩士論文。
巫秋燕(2006)新型寡果糖之製備-轉糖酵素反應條件、產物成分及微生物活性
靜宜大學,食品營養研究所碩士論文。 吳芊槿(2007)以凝集化學法探討純化於刀豆中的刀豆球蛋白A
(Concanavalin A)與來源不同的醣蛋白結合能力
私立正修科技大學,化工與材料工程研究所碩士論文。
陳冠宇(2007)結合切向流過濾與ConA親和性管柱層析法純化昆蟲
桿狀病毒載體
國立清華大學,分子與細胞生物研究所碩士論文。
朱玟瑜(2007)磁性酵母菌(MagneticP.pastoris)純化刀豆粉粗萃液中之刀豆球蛋白A
國立臺灣科技大學,化學工程系碩士論文。
吳國珍(2008)利用日本麴菌的固態發酵生產果醣轉移酶
私立大同大學,生物工程學研究所碩士論文。
黃伯欣(2008)利用日本麴菌進行液態發酵和固態發酵生產果糖轉移酶
私立大同大學,生物工程學研究所碩士論文。
張舒,康曉楠,劉銀坤 (2008) 肝癌對糖蛋白聚糖結構的變化
世界華人消化雜誌,16,4071。
張志鵬(2008) 刀豆素A誘導細胞自噬在肝癌治療與急性肝炎的作用
國立成功大學,基礎醫學研究所博士論文。
吳政達(2011)以固定化日本麴菌和畢赤酵母顆粒生產高純度果寡糖
私立大同大學,生物工程學研究所碩士論文。
朱砡賢(2011)高劑量果糖轉移酶對蔗糖的催化反應
私立大同大學,生物工程學研究所碩士論文。
張志豪(2012)表面修飾伴刀豆球蛋白之奈米粒子的合成與應用
國立成功大學,化學工程學系碩博士班。
鄭妙芬(2013)法夫酵母的果糖轉移酶的部分純化之研究
私立大同大學,生物工程學研究所碩士論文。
林祐慈(2014)新果寡糖製備與定量
私立大同大學,生物工程學研究所碩士論文。
二、英文部分
Sangeetha P.T., Ramesh M.N., and Prapulla S.G.(2005 ) Recent trenda in
the microbial production,analysis and application of fructooligosaccharides. Trends Food Sci.Technol.16:442-457
QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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1. 黃立賢 (1996) 。「青少年休閒輔導—模式與取向」。測驗與輔導 2833-2836(1996)。
2. 張守真(2007),〈哈瑪星:擁有很多「第一」的現代化新市街〉,《高市文獻》,第20卷(2)。
3. 曾玉昆(1993),〈淺談鼓山區的產業發展〉,《高市文獻》,第5卷(3)、(4)。
4. 蘇遠志(1999)保健用食品之管理及產業現狀(下),生物產業,
5. 段國仁(1994)機能性寡醣的開發與應用,生化工程,41(2):11-21。
6. 趙祐志(2009),〈地緣網絡與在台日人企業的經營(1895-1945)—以近江商事等十二個鄉土閥企業為例〉,《真理大學 國際文化研究》,第五卷(1)。
7. 吳榮發(2004),〈國家神域的建構:以高雄的神社與忠烈祠為例〉,《高市文獻》,第17卷(1)。
8. 林丁國(2009),〈日治時期台灣社會領導階層的休閒活動-以《台灣人士鑑》為討論中心〉,《運動文化研究》,10期。
9. 郭聰智(2002),〈台灣地區撞球運動發展之探討〉,《大專體育》,61期。
10. 林呈蓉(1997),〈近代初期日本的移殖民論與移殖民活動〉,《國立臺灣大學文史哲學報》,47期。
11. 許淑娟(2005),〈日治時代「新興高雄」的市街地發展〉,《高市文獻》第18卷(4)。
12. 王御風(2004),〈日治初期打狗(高雄)產業之發展(1895-1913)〉,《高市文獻》,第17卷(4)。
13. 林東泰(1993)。台北都會地區青少年休閒認知與態度之研究。社會教育學刊第22期,17-46頁。
14. 林東泰(1992)。休閒覺知自由與工作滿足之研究。社會教育學刊,第21期,59-114頁。
15. 宋明順(1992)。休閒與工作-大眾休閒時代的衝擊。社會教育學刊 21 1-20。
 
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