臺灣博碩士論文加值系統

中藥鈎藤常用於治療高血壓、頭痛、暈眩及癲癇等等，主要指標成分羥吲哚生物鹼包括鈎藤鹼和異帽葉鹼。本篇研究目的為建立一個新的分析方法並結合極致效能液相層析儀串聯質譜儀，用於快速萃取、定性以及定量鈎藤成分中的主要指標成分。分析方法使用的管柱為ACQUITY UPLC CSH Phenyl - Hexyl Column (2.1 X 100 mm, 1.7 µm, Waters)，維持恆溫在40°C，移動相為0.1% (v/v)的醋酸(溶媒為水)及0.1% (v/v)的醋酸(溶媒為乙腈)，流速設定為200 μL/min，注射體積量10 μL。此分析方法具有良好線性關係 (R2≧0.9993)，高準確度 (90-110%)及高精密度(R.S.D. < 2.5 %)。本分析方法建立及確效後，分析市售十三種科學中藥鈎藤，利用階層式分群法(Hierarchical Clustering Analysis, HCA)將十三種科學中藥依照鈎藤鹼及異帽葉鹼的含量分為兩個群組，此方法可應用在科學中藥的品質評估及管制。

Uncaria rhynchophylla (UR) is commonly used to treat hypertension, headache, dizziness and epilepsy. The essential component of UR is rhynchophylline and isomitraphylline. In present study, we establish an ultra-performance liquid chromatography- mass spectrometry method to quantify the component in UR. The separation of analytes was using a ACQUITY UPLC CSH Phenyl - Hexyl Column (2.1 X 100 mm, 1.7 µm, Waters) at 40°C. The mobile phase consists of A: 0.1% acetic acid in water and B: 0.1% acetic acid in acetonitrile. In the quantitative analysis, the method was validated by linearity, linearity range, limit of detection, limit of quantification, inter-day precision, and intra-day precision. All the validation result was excellent. The HCA classify 13 samples on the basis of characteristics of the two chemical markers in all the UR samples. The result indicated that the developed method could successfully quantify the 13 samples of the two components in Uncaria rhynchophylla and could be applied to detect and evaluate the quality of traditional Chinese medicines.

目錄 III
圖目錄 V
表目錄 VII
摘要 VIII
ABSTRACT IX
第一章 緒論 1
第一節 鈎藤介紹 1
一、藥用植物鈎藤 1
二、鈎藤的化學成分 2
第二節 鈎藤的中醫用法 3
第三節 台灣科學中藥之品質管理規定及異常物質限量標準 4
一、薄層層析（TLC）鑑別檢查 5
二、科學中藥指標成分含量檢查 5
第四節 鈎藤的鑑別 6
第五節 分析方法回顧 7
第六節 階層式分群法（HIERARCHICAL CLUSTERING ANALYSIS） 11
第七節 研究目的 12
第二章 材料與方法 13
第一節 實驗材料、儀器設備及軟體 13
第二節 鈎藤中鈎藤鹼及異帽葉鹼之定量 15
第三節 鈎藤檢品之分析方法開發 17
一、標準品溶液製備 17
第四節 數據的呈現及比較 21
第三章 實驗結果 22
第一節 鈎藤檢品之溶媒(乙醇)比例 22
第二節 分析系統之方法確效 23
第三節 極致效能液相層析儀串聯質譜儀分析結果 28
第四節 鈎藤鹼及異帽葉鹼之定量 45
第五節 階層式分群法(HIERARCHICAL CLUSTERING ANALYSIS)分類十三種科學中藥鈎藤 47
第五章 結論 50
第六章 參考文獻 51

 
圖目錄
圖1 Oxindole alkaloids之化學結構。鈎藤鹼(A)及異帽葉鹼(B)。 2
圖 2 鈎藤(Uncaria rhynchophylla)樣品在不同比例的乙醇萃取量。結果顯示為平均值± 標準差(N=3)。 22
圖 3 標準品鈎藤鹼(A)及異帽葉鹼(B)之檢量線 24
圖 4 圖譜(A)鈎藤鹼標準品(Precursor:product ions=385:353) 29
圖 5 代表性之鈎藤鹼質譜圖(UR-01) 31
圖 6 代表性之異帽葉鹼質譜圖(UR-01) 31
圖7 UR-01之鈎藤鹼圖譜。鈎藤鹼滯留時間為9.97分鐘。 32
圖8 UR-02之鈎藤鹼圖譜。鈎藤鹼滯留時間為9.96分鐘。 33
圖9 UR-03之鈎藤鹼圖譜。鈎藤鹼滯留時間為9.98分鐘。 34
圖10 UR-04之鈎藤鹼圖譜。鈎藤鹼滯留時間為9.98分鐘。 35
圖11 UR-05之鈎藤鹼圖譜。鈎藤鹼滯留時間為9.97分鐘。 36
圖12 UR-06之鈎藤鹼圖譜。鈎藤鹼滯留時間為9.96分鐘。 37
圖13 UR-08之鈎藤鹼圖譜。鈎藤鹼滯留時間為9.96分鐘。 39
圖14 UR-09之鈎藤鹼圖譜。鈎藤鹼滯留時間為9.97分鐘。 40
圖15 UR-10之鈎藤鹼圖譜。鈎藤鹼滯留時間為9.97分鐘。 41
圖16 (A)UR-11之鈎藤鹼圖譜，鈎藤鹼滯留時間為9.97分鐘; 42
圖17 (A)UR-12之鈎藤鹼圖譜，鈎藤鹼滯留時間為9.97分鐘; 43
圖18 UR-13之鈎藤鹼圖譜，鈎藤鹼滯留時間為9.97分鐘 44
圖19 十三種科學中藥鈎藤( Uncaria rhynchophylla) 48




表目錄
表1 分析方法文獻回顧統整 9
表2 移動相梯度沖提比例 19
表3 In positive mode, rhynchophylline and isomitraphylline labeled precursor、product ion transitions monitored、collision energies and retention times (RT), and tube lens 19
表4 The results of LODs, LOQs, regression equations, correlation coefficients, and linearity ranges of Rhynchophylline and Isomitraphylline. 25
表5 Intra-day and inter-day precision and accuracy of Rhynchophylline 26
表6 Intra-day and inter-day precision and accuracy of Isomitraphylline 27
表7 The content of rhynchophylline and isomitraphylline in the Uncaria rhynchophylla sample 46

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