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研究生:葉冠辰
研究生(外文):YEH, KUAN-CHEAN
論文名稱:馬告精油抗氧化與抗菌活性之檢測與機能性評估
論文名稱(外文):Determination and Functional Evaluation of Antioxidant and Antimicrobial Activities of Essential Oil from Litsea Cubeba
指導教授:詹鴻得詹鴻得引用關係
指導教授(外文):JANG, HUNG-DER
口試委員:詹鴻得徐詮亮張谷昇
口試委員(外文):JANG, HUNG-DERHSU, CHUAN-LIANGCHANG, KU-SHANG
口試日期:2017-06-13
學位類別:碩士
校院名稱:元培醫事科技大學
系所名稱:食品科學系碩士班
學門:農業科學學門
學類:食品科學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2017
畢業學年度:105
語文別:中文
論文頁數:78
中文關鍵詞:馬告精油抗氧化抗菌黃麴菌
外文關鍵詞:Litsea cubebaessential oilantioxidant capacityantibacterial activityAspergillus flavus var. flavus
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本研究以新鮮的馬告果實經溶劑萃取法,萃取出其馬告果實精油,利用甲醇、乙醇及正己烷溶劑萃取精油,並分別檢測萃取液的DPPH自由基清除能力、總多酚含量及類黃酮含量,分析和評估其抗氧化能力,並且以紙錠擴散試驗及稀釋試驗探討其抗菌活性。精油在不同溫度下保存三個月,進行抗氧化能力和抗菌活性之安定性試驗,並將精油添加至花生中,評估萃取液對食品中黃麴菌之抗菌效果。結果發現馬告精油甲醇、乙醇及正己烷萃取液之DPPH自由基清除能力IC50值分別為7.22±0.00、6.70±0.00及6.55±0.01 mg/ml,總多酚和類黃酮含量分別為0.32±0.03和0.33±0.01、0.06±0.01和0.22±0.09及0.31±0.02和0.18±0.06 mg/ml。以紙錠擴散試驗檢測馬告精油萃取液對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和腸炎沙門氏桿菌之最大抑菌圈直徑分別為13.5、13.0及13.0 mm,而對黃麴菌、黑麴菌和赭麴菌之最大抑菌圈直徑分別為19.0、31.0和14.0 mm,結果顯示馬告精油萃取液對不同種類的試驗細菌和真菌皆有顯著的抑制效果。而以稀釋試驗法檢測馬告精油萃取液之最低抑制濃度(MIC),對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和腸炎沙門氏桿菌之最小MIC值分別為2.05、1.58及2.05 mg/ml,對黃麴菌、黑麴菌和赭麴菌之最小MIC值分別為2.05、4.1及2.05 mg/ml。將馬告果實精油分別儲存於0℃、4℃及25℃三個月,探討其抗氧化及抗菌活性之安定性;結果顯示DPPH自由基清除能力、總多酚含量及類黃酮含量保存於0℃下具有較佳的安定性,而以紙錠擴散試驗及稀釋試驗結果顯示精油在4℃下保存有較佳的抗菌活性。將馬告精油添加於花生中之抑菌試驗,顯示馬告精油顯著抑制食品中之黃麴菌的生長,具有開發為天然的抑菌劑之潛力。
The objectives of this research were to analyze and evaluate antioxidant capacity and antimicrobial activity of the essential oil of Litsea cubeba. The essential oil of Litsea cubeba was extracted with methanol, ethanol or n-hexane. In order to evaluate the antioxidant capacity, total phenolic and flavonoid contents, and DPPH free radical-scavenging activity of the three extracts were determined and compared. The antimicrobial activity of the extracts was investigated by using paper-disk diffusion test and dilution test. This work was also to investigate the stability of antioxidant capacity and antimicrobial activity of Litsea cubeba essential oil stored at various temperatures for three months. The inhibitory effects of Litsea cubeba essential oil extract on the growth of Aspergillus flavus var. flavus in peanuts were also investigated. This results showed the methanol, ethanol and n-hexane extracts of Litsea cubeba essential oil exhibited strong antioxidant potential with IC50 value of 7.22±0.00, 6.70±0.00 and 6.55±0.01 mg/ml, respectively, in DPPH free-radical scavenging method. The contents of total phenolic and flavonoid in the extracts were 0.32±0.03 and 0.33±0.01, 0.06±0.01 and 0.22±0.09, and 0.31±0.02 and 0.18±0.06 mg/ml, accordingly. A paper-disk diffusion method was used for testing the inhibitory effect of Litsea cubeba essential oil extracts, and the highest inhibition zones towards Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Salmonella enterica are 13.5, 13.0 and 13.0 mm, respectively. The extracts of the essential oils inhibited Aspergillus flavus var. flavus, Aspergillus niger and Aspergillus westerdijkiae with the highest inhibition zone of 19.0, 31.0 and 14.0 mm, respectively. The results indicated that the extracts of Litsea cubeba essential oil showed significant inhibitory effects against the various types of test bacteria and fungi. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the extracts of Litsea cubeba essential oil was determined using the dilution test. The extracts of the essential oil had the lowest MIC values of 2.05, 1.58 and 2.05 mg/ml, when tested against E. coli, Staph. aureus and Sal. enterica, respectively. In addition, the extracts had the lowest MIC values of 2.05, 4.1 and 2.05 mg/ml against A. flavus var. flavus, A. niger and A. westerdijkiaeare, respectively. The stability test was carried out to examine whether the antioxidant or antimicrobial activity of Litsea cubeba essential oil could be maintained after 3 months of storage at 0℃, 4℃ or 25℃. The DPPH free radical scavenging activity, total phenolic contents and flavonoid contents were the highest when the essential oil was stored at 0℃. The antimicrobial activity of essential oils stored at 4℃ was more stable than those were stored at 0℃ or 25℃. The addition of Litsea cubeba essential oil in peanuts showed an inhibitory effect on the growth of Aspergillus flavus var. flavus. The significant inhibitory effect against A. flavus suggests that the Litsea cubeba essential oil could be used in the development of food preservatives which was obtained from natural sources.
口試委員審定書 I
誌謝 II
中文摘要 III
英文摘要 IV
目錄 VI
圖目錄 IX
表目錄 XI
緒論 1
第一章 文獻回顧 2
1.1 馬告之簡介 2
1.1.1 馬告的生長習性與植株特色 2
1.1.2 馬告的用途 2
1.2 精油之簡介 3
1.2.1 一般特性 3
1.2.2 精油之萃取方式 3
1.2.3 精油之化學成分 5
1.2.4 精油之應用 5
1.2.5 精油的抗氧化活性 5
1.2.5.1 抗氧化劑作用機制 5
1.2.5.2 抗氧化活性相關研究 6
1.2.6 精油的抗菌活性 6
1.2.6.1 精油抗菌活性成分 6
1.2.6.2 精油抗菌機制 6
1.3 馬告精油之特性與機能性 7
1.3.1 特性與用途 7
1.3.2 抗氧化與抗菌活性研究 7
1.4 黃麴菌(Aspergillus flavus var. flavus)與食品中毒 9
第二章 馬告精油之抗氧化活性研究 12
2.1 前言 12
2.2 材料 12
2.2.1 馬告 12
2.2.2 藥品 13
2.2.3 溶劑 13
2.2.4 儀器設備 13
2.3 方法 13
2.3.1 馬告精油之製備 13
2.3.1.1 馬告甲醇萃取精油之製備 13
2.3.1.2 馬告乙醇萃取精油之製備 14
2.3.1.3 馬告正己烷萃取精油之製備 14
2.3.2 馬告精油抗氧化性質分析 14
2.3.2.1 DPPH自由基清除能力試驗 14
2.3.3 馬告精油抗氧化成分分析 14
2.3.3.1 總多酚化合物含量測定 14
2.3.3.2 類黃酮含量測定 14
2.3.4 馬告精油抗氧化之安定性試驗 15
2.4 統計分析(重複分析次數、差異分析、統計分析方法) 15
2.5 結果與討論 15
2.5.1 馬告精油之DPPH 自由基清除能力探討 15
2.5.2 馬告精油之總多酚含量探討 17
2.5.3 馬告精油之類黃酮含量探討 20
2.5.4 馬告精油之DPPH自由基清除能力與總多酚及類黃酮含量之相關性 23
2.5.5 馬告精油抗氧化之安定性探討 25
第三章 馬告精油之抗菌活性研究 29
3.1 前言 29
3.2 材料 29
3.2.1 馬告 29
3.2.2 花生 29
3.2.3 菌種來源 29
3.2.4 溶劑 30
3.2.5 培養基 30
3.2.6 儀器設備 30
3.3 方法 30
3.3.1 馬告精油之製備 31
3.3.1.1 馬告甲醇萃取精油之製備 31
3.3.1.2 馬告乙醇萃取精油之製備 31
3.3.1.3 馬告正己烷萃取精油之製備 31
3.3.2 細菌培養 31
3.3.2.1 新購入的凍乾粉末狀菌株之活化與保存 31
3.3.2.2 菌種活化方法 31
3.3.3 馬告精油之抗菌性試驗 31
3.3.3.1 紙錠擴散試驗(Paper-disk diffusion method) 31
3.3.3.2 稀釋試驗(Dilution method) 31
3.3.4 馬告精油抗菌之安定性試驗 34
3.3.5 馬告精油添加至食品之抗菌試驗 34
3.4 結果與討論 34
3.4.1 馬告精油之抗菌性探討 34
3.4.1.1 紙錠擴散 34
3.4.1.2 稀釋試驗 38
3.4.2 馬告精油抗菌效果安定性的探討 44
3.4.3 馬告精油對花生中黃麴菌生長之抑制效果 64
第四章 結論 71
參考文獻 72

一、中文部分
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