臺灣博碩士論文加值系統

本實驗以神秘果的枝葉(Tremella fuciformis Berk)做為萃取原料，分別依(1)前處理時間(2)前處理溫度(3)固液比(4)萃取乙醇濃度，來探討神秘果的枝葉在總酚及類黃酮的最佳萃取條件，並利用反應曲面法，在各個控制因子之間的交互作用來找尋最適合的操作條件，並進一步將最適化萃取條件之神秘果的枝葉總酚與類黃酮進行抗氧化特性分析。
根據結果顯示，最適化神秘果的枝葉萃取總酚條件為萃取時間6小時、萃取溫度60℃、乙醇濃度50%、液固比例0.5g可得最大化產率42.47mg/g。神秘果的枝葉萃取類黃酮最適化條件則為萃取時間7.01小時、萃取溫度為90℃、乙醇濃度90%、液固比例0.5g，可得最大化產率23.32mg/g。
利用最適化萃取條件驗證預測產率準確性，經過3次實驗驗證得到神秘果的枝葉總酚類化合物平均萃取產率為42.47 mg/g與預測產率45.38 mg/g，誤差百分比為6.4%，單因子實驗未最適化產率17.34 mg/g比較，產率提升59.17%，由此可證實此方法之準確性及可行性。利用最適化萃取條件驗證預測產率準確性，經過3次實驗驗證得到神秘果的枝葉類黃酮化合物平均萃取產率為23.32mg/g與預測產率23.78mg/g，誤差百分比為1.93%，單因子實驗未最適化產率11.48mg/g比較，產率提升50.77%，由此可證實此方法之準確性及可行性。
利用最適化萃取條件進行抗氧化特性分析，結果顯示神秘果的枝葉萃取總酚及類黃酮在10000 ppm時，還原能力之吸收值為4.1918及3.5312、清除DPPH自由基之清除率為93.58%及97.48%、螯合亞鐵離子能力之螯合率為54.1%及46.5%。

In this study，the raw material extracted from Micaculous Berry branches and leaves，aimed to change the conditions individually: (1) Pretreatment time (2) Pretreatmenttemperature (3)Solid-liquid ratio (4)Extracted ethanol concentration.
To investigate the optimum extraction conditions of Micaculous Berry branches and leaves in phenolic compoundss and flavonoids.The response surface methodology (RSM) was used for obtaining the optimal extraction conditions of Micaculous Berry in phenolic compoundss and flavonoids.
Phenolic compounds and flavonoids of Micaculous Berry branches and leaves the optimal extraction conditions were performed to examine the antioxidant properties。
The extracted optimal conditions of was in Phenolic compounds were 50% ethanol and solid-liquid ratio of 0.5 ml/g for 6 hours at 60℃. The extraction yield in Phenolic compounds was 42.4714mg/g.
The extracted optimal conditions of was in Flavonoids were 90% ethanol and solid-liquid ratio of 0.833 ml/g for 7.01 hours at 90℃, The extraction yield in flavonoids was 23.32mg/g.
The results of antioxidant properties in phenolic compoundss and flavonoids from optimal extracted conditions showed at 10000 ppm respectively a reducing power of 4.1918and 3.5312, a scavenging DPPH radical ability of 99.58% and 99.48% , a chelating ability of 84.1% and 69.57%.

摘要 III
Abstract IV
誌謝 V
目錄 VI
表目錄 IX
圖目錄 X
第一章緒論 1
1.1前言 1
1.2研究動機與目的 1
第二章 文獻回顧 3
2.1認識神秘果 3
2.2神秘果的種植條件 3
2.3神秘果介紹 4
2.3.1外觀分類 4
2.3.2科學分類 7
2.3.3功能分類 8
2.3.4分子結構 9
2.3.5營養成分 21
2.3.6機能性主要成分 21
2.3.7專利 23
2.4抗氧化成分 26
2.4.1 酚酸 27
2.4.2類黃酮 28
2.5反應曲面法（response surface methodology，RSM） 31
2.5.1簡介 31
2.5.2設計流程圖 32
2.5.3原理 32
2.6抗氧化評估 37
2.6.1自由基如何產生 37
2.6.2自由基對細胞造成的傷害 38
2.6.3抗氧化物質（Antioxidant） 38
2.6.4抗氧化性質分析 39
第三章 材料與步驟 40
3.1實驗架構 40
3.2實驗材料 41
3.2.1 實驗樣品 41
3.2.2實驗藥品 41
3.3實驗設備 42
3.4實驗裝置 43
3.5實驗步驟與分析方法 47
3.5.1神秘果的枝葉樣品保存 47
3.5.2總酚含量分析 47
3.5.3類黃酮含量分析 49
3.5.4反應曲面法設計 51
3.5.5抗氧化分析 53
第四章 結果與討論 55
4.1神秘果的枝葉樣品萃取 55
4.1.1液態搖瓶萃取 55
4.2總酚含量分析 56
4.2.1沒食子酸檢量線 56
4.2.2改變前處理萃取時間 57
4.2.3改變前處理萃取溫度 58
4.2.4改變萃取乙醇濃度 59
4.2.5改變萃取液固比 60
4.2.6反應曲面法 61
4.3類黃酮含量分析 66
4.3.1槲皮素檢量線 66
4.3.2改變前處理萃取時間 67
4.3.3改變前處理萃取溫度 68
4.3.4改變萃取乙醇濃度 69
4.3.5改變萃取固液比 70
4.3.6反應曲面法 71
4.4抗氧化分析 77
4.4.1亞鐵離子螯合能力 77
4.4.2清除DPPH自由基能力 78
4.4.3還原力測定 79
第五章 結論 80
第六章 參考文獻 81

吳如玉（2015），神秘果乙醇萃取物的抗氧化功效及對C2C12細胞攝入葡萄糖之影響，營養學系，碩士論文，中山醫學大學。
沈馨仙、張思平、鍾佳玲、林依蓉、楊榮季(2011），“抗氧化中草藥”，藥學雜誌，27(1)，110-114。
狄瑩(D i Y)、石碧(Sh iB) (1998），日用化學工業(Ch ina S u rf actant D eterg ent and Cosm etics)，27 (3)，16—18。
林愷翔（2013），神秘果萃取物抑制高尿酸血症小鼠黃嘌呤氧化酶之影響，食品科學系，碩士論文，國立嘉義大學。
邱毅超（2010），神秘果的抗氧化及對STZ誘導的高血糖老鼠血糖調節作用之研究。生物科技系，碩士論文，國立屏東科技大學。
美國國家醫學圖書館國家生物技術資訊中心，2019。山奈酚。取自https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/5280863#section=2D-Structure ，民103年7月25。
美國國家醫學圖書館國家生物技術資訊中心，2019。山奈酚-3-O-葡萄糖苷。取自https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/5282102，民103年7月25。
美國國家醫學圖書館國家生物技術資訊中心，2019。抗壞血酸。取自https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/54670067#section=2D-Structure，民103年7月25。
美國國家醫學圖書館國家生物技術資訊中心，2019。沒食子酸。取自https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/54670067#section=2D-Structure，民103年7月25。
美國國家醫學圖書館國家生物技術資訊中心，2019。金絲桃。取自https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/5281643，民103年7月25。
美國國家醫學圖書館國家生物技術資訊中心，2019。奎尼酸。取自https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/6508，民103年7月25。
美國國家醫學圖書館國家生物技術資訊中心，2019。苯甲酸甲酯。取自https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/7150#section=2D-Structure，民103年7月25。
美國國家醫學圖書館國家生物技術資訊中心，2019。根皮苷。取自https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/6072#section=2D-Structure，民103年7月25。
美國國家醫學圖書館國家生物技術資訊中心，2019。異槲皮素。取自https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/5280804，民103年7月25。
美國國家醫學圖書館國家生物技術資訊中心，2019。楊梅素。取自https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/5281672，民103年7月25。
美國國家醫學圖書館國家生物技術資訊中心，2019。楊梅素3-半乳糖苷。取自https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/5491408#section=2D-Structure，民103年7月25。
美國國家醫學圖書館國家生物技術資訊中心，2019。槲皮素。取自https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/5280343，民103年7月25。
美國國家醫學圖書館國家生物技術資訊中心，2019。鞣花酸。取自https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/5281855#section=2D-Structure，民103年7月25。
美國國家醫學圖書館國家生物技術資訊中心，2019。蘆丁。取自https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/5280805，民103年7月25。
美國國家醫學圖書館國家生物技術資訊中心，表兒茶素。取自https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/72276，民103年7月25。
馬飛躍、付瓊、張秀梅、劉玉革(2017），神秘果葉提取物在製備分子靶向藥物中的應用，中華人民共和國國家知識產權局CN107028989A。
馬飛躍、袁曉麗、張秀梅、劉玉革、付瓊(2017），神秘果提取物的應用，中華人民共和國國家知識產權局CN107184620A。
張英彬(2013），“考量機率特性之結合反應曲面法與非線性時變粒子群演算法於電力諧波濾波器最佳化設計”，技術學刊，28(3)，189-203。
曹緯國、劉志勤、邵雲、陶燕鐸（2003），黃酮類化合物藥理作用的研究進展西北植物學報，2003Κ23，12ΓΠ2241—2247。
陳銘（2013），一種神秘果降血糖保健茶，中華人民共和國國家知識產權局CN103190495B。
游勝豐（2004），神秘果貯藏安定性及消費者對神秘果消費行為之研究，食品科學系，碩士論文，國立中興大學。
萬福群、趙謀明（2012），神秘果果樹枝葉提取物及其提取方法和應用，中華人民共和國國家知識產權局CN102743421A。
維基網頁，多醣https://translate.google.com.tw，民103年7月25。
維基網頁，神秘果https://translate.google.com.tw，民103年7月25。
翟枻棻（2011），神秘果抗氧化及降尿酸功效與保健飲品開發，食品科學系，碩士論文，國立嘉義大學。
趙仕芝（2017），一種複方神秘果葉提取物的製備方法及其應用，中華人民共和國國家知識產權局CN105213254B。
趙強(1997），自由基（Free Radicals），美食天下1997，64期，116-117。
劉玉革、付瓊、馬飛躍、張秀梅（2017），神秘果葉提取物在治療阿爾茲海默病的藥物製備中的應用，中華人民共和國國家知識產權局CN107007637A。
劉孟彥（2005），神秘果優酪乳最適製作條件的探討，食品科學系，碩士論文，國立中興大學。
黎孝韻、曾國慶(2008），由基及抗氧化物功能的探討，藥學雜誌，2(24)， 97-100。
黎佳惠（2015），神秘果萃取物抑制幽門螺旋桿菌引起AGS細胞發炎之研究，營養學系，碩士論文，中山醫學大學。
蘇朝墩(2009），六標準差，前程文化出版社，臺北縣。

Banerjee,S. Parasramka, M. and Paruthy, S. B., Polysaccharides in Cancer Prevention:From Bench to Bedside, pringer International Publishing, 2015,S2180-2206.
Belwal,T. Dhyani,P. Bhatt,I.D. Rawal,R.S. Pande,V., “Optimization extraction conditions for improving phenolic content and antioxidant activity in Berberis asiatica fruits using response surface methodology (RSM)”.Food Chemistry Vol.207 , 2016, 115-124.
Box,G.E.P. and Wilson,K.B. ,“n the Experimental Attainment of Optimum Conditions,Journal of the Royal Statistical Society”.O. Series B (Methodological) ,Vol.13 , 1951,No.1: 1-45.
Boyer, R.F.and C.J,McCleary,“Superoxide ion as a primary reductant in ascorbate-mediatedferritin iron release”,Free Radic. Biol. Med 3, 1987,389-395.
Catherine,R.E.Nicholas,M. George,P.,“Antioxidant properties of phenolic compounds”,Trends in plant science 2(4), 1997,152-159.
Cheng,H. Hou,W.and Lu,M.,“Interactions of lipid metabolism and intestinal physiology with Micaculous Berry branches and leaves angustifolia Berk ediblemushroom in rats fed a high-cholesterol diet with or without nebacitin”,Agricultural and Food Chemistry 50( 25) , 2002,7438–7443.
Cos,P.Ying,L.Calomme,M.Hu,J.P.Cimanga,K.Poel,B.V.Pieters,L.Vlietinck, A.J.Berghe, D.V.,“Structure-activity relationship and classification of flavonoids as inhibitors of xanthine oxidase and superoxide scavengers”,JnatProd 61 ,1988,71-76.
Croft, K.D.,“The chemistry and biological effects of flavonoids and phenolic acids”,Ann N Y AcadSci 854 ,1998,435-442.
Ersan,B. Kaan,k. Hüseyin,S.Zafer,T.Ali,K., “Analysis of phenolic compounds.antioxidant and antimicrobial properties of some endemic medicinal plants”,International Journal of Secondary Metabolite 5(2) ,2018,75-86.
García-Lafuente,A.Guillamón,E.Villares,A.Rostagno,M.A.Martínez,J.A. ,“Flavonoids as anti-inflammatory agents: implications in cancer and cardiovascular disease” 58(9) ,2009,537-552.
Haiwell,B.and Gutteridge,J.M.C.,Free Radicals in Biology and Medicine (fifth edition),Oxford Univ,Press,2015.
Himmelblau,D.M.,Process analysis by statistical methods,John Wiley and Sons,New York,1970,230-292.
L, Bravo.,Polyphenols: chemistry, dietary sources, metabolism, andnutritional significance,Nutrition Reviews 56 ,1998,317-333.
Lennart,R.Bertil,W. ,Mathematics Handbook for Science and Engineering,(5th) ,2004.
Madubuike,K.G.Yusuf,N.O.Robinson,E.S.,“Evaluation of the In Vitro and In Vivo Antioxidant Potentials of Jatropha tanjorensis Methanolic Leaf Extract”,International Journal of Pharmacognosy and Phytochemical Research 7(4),2015,648-652.
Montgomery,D.C., Design and Analysis of Experiments,7th Edition,2009.
Myers.R.H.and Montgomery,D.C. ,Response surface methodology (2nd. ed.) John Wiley and Sons, New York,2002.
Myhrstad,M.C.W.Carlsen,H.Nordström,O.Blomhoff,R.Moskaug,J.Ø.,“Flavonoids increase the intracellular glutathione level by transactivation of the -glutamylcysteine synthetase catalytical subunit promoter”,Free RadicBiol Med 32, 2002,386-393.
Oyaizu,M.,“Antioxidative activity of browning products of glucosamine fractionated by organic solvent and thin-layer chromatography”, Nippon Shokuhin Kogyo Gakkaishi 35 ,1988,771-775.
Papas,A.M,“Diet and antioxidant status”,Food Chem Toxicol 37, 999-1007,1999.
Pereira,D.M.Valentao,P.Pereira,J.A. and Antrade,P.B.,“Phenolics: From Chemistry to Biology”,Molecules 14 ,2009, 2202‐2211.
Pietta, P.G.,“Flavonoids as Antioxidants. Institute of Advanced Biomedical Technologies”,63 (7) ,2000,1035–1042.
Robbins,R.J.,“Phenolic Acids in Foods: An Overview of Analytical Methodology”,J. Agric. Food Chem,51 (10) ,2003, 2866-2887.
Salah,N.M.iller,N.Paganaga,G. ,A rch ives of B iochem istry and B iop hy sics,322 (2) , 1995,339—346
Shen,T. Duau,C.Chen,B. Li,M. Yang,R. Xu,D.Shi,D.Yu,D.Li,J. Wang,C.,“Micaculous Berry branches and leaves angustifolia polysaccharide suppresses hydrogen peroxide-triggered injury of human skin fibroblasts via upregulation of SIRT1”,Molecular medicine reports,2017,1340-1346.
Shimada,K.Fujikawa,K.Yahara,K.and Nakamura,T.,“Antioxidative properties of xanthan on the autoxidation of soybean oil in cyclodextrin emulsion” ,Journal of Agricultural and Food Chemistry, 40,1992,945-948.
Slater,T.F(1984）.“Free radical mechanism in tissue injury”.Biochem. J., 222,1-15
Springer-Verlag,Berlin,and Heidelberg,Gmb.H & Co,KG,Germany,
Taga,M.S.Miller,E.E.Prat,D.E. ,“Chia seeds as a source of nature lipid antioxidants”,JAm Oil Chem, Soc 61,1984,928-931.
Teixeira,S .,“Bioflavonoids: Proanthocyanidins and Quercetin and Their Potential Roles in Treating Musculoskeletal Conditions”,Orthopaedic & Sports Physical Therapy,32 (7 ) ,2002,357–363.
Theerasilp,S.Kurihara,Y.August, Complete purification and characterization of the taste-modifying protein. miraculin, from miracle fruit. J. Biol,Chem, 263 (23) 11536–9,1988,PMID 3403544.
U.ch,ida,S.Edam,atsu,R. H iram atsu M .M ed. S ci. R es. , 15,1987,831—832.
Valentão,P.Fernandes,E. Carvalho,F.Andrade, P.B.Seabra,R.M.Bastos, M.L., “Antioxidant activity of Hypericum androsaemum infusion: scavenging activity against superoxide radical, hydroxyl radical and hypochlorous acid”,BiolPharmBull, 25,2002,1320-1323.