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研究生:陳瑞南
研究生(外文):Jui-nan Chen
論文名稱:前驅物及誘引劑對白花檵木(Loropetalum chinense (R.Br.)Oliv.)癒傷組織培養和二次代謝產物累積的影響
論文名稱(外文):Effect of precursor and elicitors on callus culture and secondary metabolites accumulation in Loropetalum chinense (R.Br.) Oliv.
指導教授:何錦玟
指導教授(外文):Chin-wen Ho
口試委員:何錦玟
口試委員(外文):Chin-wen Ho
口試日期:2020-01-20
學位類別:碩士
校院名稱:大同大學
系所名稱:化學工程與生物科技學系(所)
學門:工程學門
學類:化學工程學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2020
畢業學年度:108
語文別:中文
論文頁數:50
中文關鍵詞:前驅物誘引劑白花檵木
外文關鍵詞:elicitorsLoropetalum chinense (R.Br.) Olivprecursor
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白花檵木(Loropetalum chinense (R.Br.)Oliv.)癒傷組織,以MS基礎鹽類培養基(Murashige and Skoog)添加2 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2, 4D)進行癒傷組織培養,培養4周,再繼代培養於含不同濃度的前驅物L-phenylalanine、誘引劑yeast extract或methyl jasmonate的MS基礎培養基,進行癒傷組織的增殖。在不同濃度的前驅物及誘引劑培養4周之後,以總酚含量而言,所有實驗中以MS 添加 2 mg/L 2 , 4-D 及 3 mg/L methyl jasmonate,其得到的總酚含量為最高的117.20 ± 1.30 eq. gallic acid mg/g DW,略低於田間白花檵木芽的總酚含量128.14 ± 1.88 eq. gallic acid mg/g DW,在總黃酮方面,以不添加任何前驅物及誘引劑的對照組,得到的最高總黃酮含量為24.27 ± 0.42 eq. quercetin mg/g DW。以高效液相層析法(HPLC)進行指標性產物的測定,萃取物均可以檢測出沒食子酸及柚皮苷的成份。
Callus of Loropetalum chinense (R.Br.) Oliv. was cultured on MS (Murashige and Skoog) basic salts medium with 2 mg / L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2, 4D) for 4 weeks, and then subcultured on MS-based medium containing different concentrations of precursor (L-phenylalanine), yeast extract or methyl jasmonate for callus proliferation. The highest total phenol content of callus extract was 117.20 ± 1.30 eq. gallic acid mg / g D.W. when callus cultured on MS medium added with 2 mg / L 2, 4-D and 3 mg / L methyl jasmonate after 4 weeks which was slightly lower than the total phenol content of field buds (128.14 ± 1.88 eq. gallic acid mg / g D.W. ). The highest total flavonoids of callus extract was 24.27 ± 0.42 eq. quercetin mg / g D.W. when callus cultured on MS medium without precursor and elicitors. The high-performance liquid chromatography (HPLC) was used to determine the index products. Gallic acid and naringin can be detected in all callus extracts.
摘要 Ⅰ
ABSTRACT Ⅱ
目錄 Ⅲ
表目錄 Ⅵ
圖目錄 Ⅷ
縮寫字 Ⅸ
一、前言 1
二、前人研究 3
2.1檵木的化學成份研究 3
2.2檵木的生物活性 5
2.3前驅物的作用 6
2.4誘引劑的作用 7
三、材料與方法 9
3.1 實驗架構 9
3.2 植物材料 10
3.3 培養基配製 11
3.4 培養環境 13
3.5 前驅物及誘引劑對癒傷組織培養之影響 13
3.5.1 L-phenylalanine (L-苯丙氨酸)對癒傷組織培養之影響 13
3.5.2 yeast extract (酵母提取物)對癒傷組織培養之影響 13
3.5.3 methyl jasmonate (茉莉酸甲酯)對癒傷組織培養之影響 16
3.6繼代時間的長短對癒傷組織累積二次代謝物的影響 17
3.7 總酚和總黃酮及指標性成份的分析 17
3.7.1 樣品萃取前處理方式 17
3.7.2 樣品萃取方式 17
3.7.3 樣品總酚含量檢測 18
3.7.4 樣品總黃酮含量檢測 18
3.7.5 樣品高效液相層析法HPLC分析 19
四、結果 21
4.1前驅物及誘引劑對癒傷組織培養及增殖的影響 21
4.1.1 L-phenylalanine對不同癒傷組織培養及增殖的影響 21
4.1.1.1 L-phenylalanine對癒傷組織增殖的影響 23
4.1.1.2 總酚及總黃酮含量檢測 24
4.1.1.3 指標性產物分析 25
4.1.2 yeast extract對不同癒傷組織培養及增殖的影響 28
4.1.2.1 yeast extract對癒傷組織增殖的影響 30
4.1.2.2總酚及總黃酮含量檢測 31
4.1.2.3指標性產物分析 31
4.1.3 methyl jasmonate對不同癒傷組織培養及增殖的影響 34
4.1.3.1 methyl jasmonate對癒傷組織增殖的影響 35
4.1.3.2總酚及總黃酮含量檢測 36
4.1.3.3指標性產物分析 38
4.2 繼代時間的長短對癒傷組織累積二次代謝物的分析 40
4.2.1 總酚及總黃酮含量檢測 40
4.2.1指標性產物分析 40
五、討論 42
5.1前驅物及誘引劑對癒傷組織增殖率的影響 42
5.2 前驅物及誘引劑對總酚、總黃酮的影響 42
5.3 前驅物及誘引劑對指標性成份的影響 43
六、結論 44
七、參考文獻 46
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