臺灣博碩士論文加值系統

十字花科蔬菜（Cruciferous vegetables），包括山葵（Wasabi）、芥子（Mustard seeds）、甘藍菜（Cabbage）和綠花椰菜（Broccoli）等，在世界各地用於調味和料理裝飾物，以及其帶來的健康益處。這些蔬菜是受歡迎的全球美食，且他們的潛在藥性受到珍視。
研究指出山葵和綠花椰菜或甘藍菜攝取量的增加和某些癌症風險的降低之間有一些關聯，更有證據表明了新鮮山葵萃取物，和十字花科蔬菜富含吲哚-3-甲醇（indole-3-carbinol），可提升細胞內DNA之修復，並阻斷癌細胞的生長。
本文研究結果顯示，山葵水相萃取液可抑制骨肉瘤癌細胞脫附，成分之純化研究抑制骨肉瘤癌細胞脫附。

　　Cruciferous vegetables, including wasabi, mustard seeds, cabbage, and broccoli, are used for seasoning and culinary decoration in various parts of the world, as well as for their health benefits. These vegetables are popular global cuisine, and their potential medicinal properties are highly valued.Studies have shown some association between increased intake of wasabi and broccoli or cabbage and a reduced risk of certain cancers. There is also evidence that fresh wasabi extract and cruciferous vegetables rich in indole-3-carbinol can enhance DNA repair in cells and inhibit the growth of cancer cells.The results of this study indicate that the aqueous extract of wasabi can inhibit the detachment of osteosarcoma cancer cells, and purified components have been found to inhibit the detachment of osteosarcoma cancer cells.

目錄
謝誌 I
中文論文題要 II
英文論文題要 III
目錄 IV
圖目錄 VIII
表目錄 VIIII
第一章 緒論 1
1.1 骨肉瘤 1
1.2 山葵 1
1.3 研究動機 2
1.4 高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography）原理 3
第二章 實驗儀器與藥品配製 4
2.1 實驗儀器 4
2.2 實驗藥品及材料 5
2.2.1 藥品配製 5
2.2.2 山葵水相萃取法 6
2.3 細胞解凍（Thawing） 7
2.4 更換培養液 7
2.5 細胞分盤（Cell Seeding） 8
2.6 冷凍保存細胞（Cryopreservation） 8
第三章 實驗步驟與結果 9
3.1 山葵水相萃取液對U-2 OS脫附之抑制效果 9
3.1.1 配製不同濃度梯度之山葵萃取物 9
3.2 山葵萃取物樣品以HPLC（C-18管柱）等度沖提分離之成分對U-2 OS脫附的抑制效果 10
3.1.2 作用8小時及24小時後山葵萃取物之不同濃度對U-2 OS的影響 10
3.2.1 HPLC之山葵萃取物樣品濃度配置 15
3.2.2 配製HPLC流動相濃度及流速設定與收集方式 15
3.2.3 山葵萃取物樣品經過HPLC等度沖提之吸收光度 16
3.2.4 五次收集的山葵萃取物分離之粉末溶於PBS後對U-2 OS脫附之抑制效果 17
3.2.5 十次收集的山葵萃取物分離之粉末溶於DMEM後對U-2 OS脫附之抑制效果 20
3.3 山葵萃取物樣品用梯度沖提對U-2 OS脫附之抑制效果 23
3.3.1 設定HPLC跑液、流速及收集方式 23
3.3.2 山葵萃取物樣品經過HPLC梯度沖提之吸收光度 24
3.3.3 十次收集的山葵萃取物梯度分離之粉末溶於DMEM後對U-2 OS脫附之抑制效果 25
3.4 山葵水相萃取之蛋白質加熱變性和以Trypsin-EDTA作用後U-2 OS活性測試 29
3.4.1 培養8小時後之山葵萃取物內蛋白質加熱變性和以Trypsin-EDTA作用後對U-2 OS的影響 30
3.5 Sepbox Report分離山葵水相萃取粉末之步驟 31
3.5.1 以Sepbox Report分離後之U-2 OS脫附抑制效果 32
第四章 結論 34
第五章 參考文獻 35
附件 36












 
圖目錄
圖 1 加入的濃度及對照組示意圖 10
圖 2 放山葵前的細胞狀態 10
圖 3 (a) 作用8小時後 (b) 作用24小時後用Trypsin-EDTA切完的照片 11
圖 4 (a) 作用8小時後 (b) 作用24小時後用Trypsin-EDTA切完的照片 11
圖 5 (a) 作用8小時後 (b) 作用24小時後用Trypsin-EDTA切完的照片 12
圖 6 (a) 作用8小時後 (b) 作用24小時後用Trypsin-EDTA切完的照片 12
圖 7 (a) 作用8小時後 (b) 作用24小時後用Trypsin-EDTA切完的照片 13
圖 8 (a) 作用8小時後 (b) 作用24小時後用Trypsin-EDTA切完的照片 13
圖 9 (a) 作用8小時後 (b) 作用24小時後用Trypsin-EDTA切完的照片 14
圖 10 山葵萃取物樣品經過HPLC等度沖提之吸收光度 16
圖 11 五次收集的山葵萃取物分離之粉末溶於 PBS 後對U-2 OS脫附之抑制效果 19
圖 12 十倍濃縮的山葵萃取物分離之粉末溶於 DMEM 後對U-2 OS脫附之抑制效果 22
圖 13 山葵萃取物樣品跑HPLC梯度沖提之吸收光度 24
圖 14 十倍濃縮的山葵萃取物梯度分離之粉末溶於DMEM後對U-2 OS遷移之抑制效果 28
圖 15 細胞培養8小時後用Trypsin-EDTA切完的照片 30
圖 16 細胞培養8小時後用Trypsin-EDTA 切完的照片 32
表目錄
表 1 HPLC之pump設定條件 23
表 2 蛋白質失活作法 29

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