臺灣博碩士論文加值系統

本研究旨在利用高效能液相層析法 HPLC 對生長於不同高度下之虎杖Polygonum cuspidatum：平地虎杖、高地虎杖和平地馴化之高地虎杖先行培育並進行活性物質虎杖苷（polydatin）的分析比較，以找出最適合主力栽培的虎杖品種。本實驗將三種虎杖樣品 0.5g 加 80%乙醇（C2H5OH）20 mL，超音波萃取 40分鐘。離心 3000 rpm， 5 分鐘。取上清液，進行減壓濃縮 (溫度 30℃) 至 10 mL以下，再以 80% 乙醇（C2H5OH）定量至 10 mL，以 0.22 PVDF 濾膜過濾後，再找出最適的稀釋倍數（10 倍）進行分析，並計算濃度面積。研究發現，高地虎杖含量最高（平均 2.77mg/g），（2772929±295.17µg/g）平地馴化之高地虎杖次之（平均 2.18mg/g）（2184577±680.04µg/g）， 平地虎杖最低（平均 1.30mg/g）（1298720±889.81µg/g）。此外本實驗成功馴化高地虎杖的扦插存活率竟高達94.44%±5.56%、 ANOVA 分析不同虎杖在三種介質下平均扦插存活率 p值.0162< .05 具顯著性。關鍵是使用 121℃、1.2kg/cm2、 30 分鐘滅菌之後靜至滅菌釜中 1 小時，取出之後放置通風室內 1 週以上，以防高溫滅菌後產生有害毒素，使用前再用不锈鋼 20 網目篩去雜質，介質需在 pH 6.5~7 間，介質溫度測試確定為室溫並無發酵中、無異味等現象的黑壤土為主要因素。本研究的意義是第一次有人馴化高地虎杖，並把三種虎杖(高地虎杖、平地馴化之高地虎杖、平地虎杖)的虎杖苷含量拿來做比較，對於虎杖的選擇提供有價值的參考依據。高地虎杖實際上對於山林的水土保持助益良多，本研究在平地能成功馴化高地虎杖可能是獨一無二的，如果能再平地拓繁成功，對於保護高山原生高地虎杖生態環境免遭過度的開發有莫大的貢獻。

This research aims to use High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) to
conduct comparative analysis of the active ingredient , polydatin ,from cultivated Polygonum cuspidatum planted on different altitude area ： lowland Polygonum cuspidatum, highland Polygonum cuspidatum, and lowland domesticated highland Polygonum cuspidatum. The goal is to find the most suitable variety for main cultivation. In this experiment, add 0.5g of each sample to 20 mL of 80%
ethanol(C2H5OH) and ultrasonically extracted for 40 minutes, centrifuged at 3000 rpm for 5 minutes. The supernatant was taken, vacuum-concentrated (temperature 30°C) to below 10 mL, then quantified to 10 mL with 80% ethanol(C2H5OH). Find the most suitable dilution factor (10x) for analysis and calculate the concentration area. It was found that highland Polygonum cuspidatum had the highest polydatin content(average 2.77mg/g), (2772929±295.17 µg/g), followed by domesticated Polygonum cuspidatum(average2.18mg/g) (2184577±680.04 µg/g), with lowland Polygonum cuspidatum (average1.30mg/g) (1298720±889.81 µg/g) having the lowest content. Furthermore, this experiment successfully domesticated Polygonum cuspidatum with a cutting survival rate as high as 94.44%±5.56%, ANOVA analysis showed significant differences with p-value of .0162 < .05 in the average cutting survival rates of different Polygonum cuspidatum under three substrates. The key was using 121°C, 1.2 kg/cm2 pressure, after sterilizing for 30 minutes, letting it sit undisturbed in the autoclave for 1 hour, then placed in a ventilated room for over a week to prevent harmful toxins from forming after high-temperature sterilization, before use, impurities were removed using a stainless steel 20 mesh sieve, substrate tested should be between pH 6.5~7, and substrate
temperature tested is confirmed to be room temperature, with no signs of fermentation or odor, mainly composed of black soil. The significance of this research is the first successful domestication of highland Polygonum cuspidatum and comparing the polydatin content of the three types of Polygonum cuspidatum , providing valuable reference for the selection of Polygonum cuspidatum. Highland Polygonum cuspidatum is very useful for soil conservation in mountain forests. This research, being able to successfully domesticate Polygonum cuspidatum in flat areas, is possibly unique. If further propagation is successful, it would make a significant contribution to protecting the natural habitat of highland
Polygonum cuspidatum.

目錄

Abstract i
摘要 iii
圖目錄 vi
表目錄 viii
第一章 前言 1
第一節 研究背景 4
第二節 研究動機 6
壹、藉助實驗分析找出虎杖苷含量較高的品種 6
貳、平地馴化高地虎杖扦插成功能效降低虎杖相關成本 7
參、平地馴化高地虎杖扦插成功對環境生態保護有助益 8
第二章 文獻回顧 10
第一節 虎杖種類 10
壹、平地虎杖出現的最早記載和用藥記錄 10
貳、高地虎杖、平地虎杖外型簡易識別法 16
第二節 虎杖苷（polydatin）藥理作用 17
第三節 虎杖苷（polydatin）萃取方法 22
第三章 研究材料與方法 27
第一節虎杖培育、虎杖苷(polydatin)檢測等流程圖 28
第二節 實驗材料和培育地點 29
第三節 扦插方法實驗設計 30
壹、扦插介質、器具滅菌處理 30
貳、培育相關之實驗器材、實驗設備 31
參、粉化方法 31
第四節 虎杖栽培重點整理 32
壹、扦插培育方法 32
貳、 高地虎杖之種植 36
參、平地虎杖、平地馴化之高地虎杖之種植 37
肆、HPLC相關設備 37
第四章 資料分析 40
第一節 運用高效能液相層析法HPLC分析三種 40
虎杖苷(polydatin)的差異 40
壹、檢量線與層析圖 40
貳、三種虎杖之虎杖苷(polydatin)HPLC結果分析 42
第二節 虎杖莖條、根芽扦插之平均存活率區間與ANOVA統計分析 44
壹、三種虎杖莖條、根芽在不同介質扦插存活率與成果 44
貳、運用ANOVA多變量統計分析 50
第五章 結果與討論 53
第一節 虎杖苷(polydatin)HPLC差異綜合討論 53
第二節 扦插綜合討論 55
第三節 檢討與改進 57
第六章 參考文獻 59

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