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摘要細胞內的DNA 在一般生理狀況下, 不斷的受到內在及外在的氧化作
用, 而往往使得其鹼基被氧化。8-oxo-dG 是 dG 被氧化後最主要的衍生
物, 亦為生物體內最常見的氧化性鹼基之一。近年來8-oxo-dG 以被廣泛
的研究, 8-oxo-dG 甚至被當成一些慢性疾病或者是老化程度的指標。本
實驗研究的重點, 即針對8-oxo-dG, 製備相同序列的 DNA 5'- GTG CCT
GTT TTC AGG CAC -3' 及 5'-GTG CCT GTT TTC AG*G CAC -3', 二者的差
別只有其中第十五個位置上的 G 被取代為 8-oxo-G, 並分別以其具有差
異性的鹼基對命名為 CG18 及 C*G18, 並將以上 DNA 序列溶於適當的緩
衝溶液後, 分別以紫外線光譜 (UV spectram), 圓二色光譜 (CD
spectram) 及溶點試驗來分析 8-oxo-dG 對 DNA 結構及穩定性的影響,
最後更利用溶點曲線 (Melting curve) 導出熱焓 ((H)、自由能 ((G) 及
亂度 ((S) 等熱力學參數, 更進一步的探討不同序列 DNA 的穩定性及熱
力學特性。在紫外線圖譜 (UV spectrum) 的實驗指出, 當 CG18 及C*G18
溶於純水溶液時, 二者的紫外線圖譜差量較少, 然而將其溶於緩衝溶液,
使二級結構形成後, 則有明顯的差異, 可見到 C*G18 的紫外線圖譜 (UV
spectrum) 向長波長的方向位移(Shift)。在圓二色光譜 (CD spectrum)
的分析中也有相似的情況,於波長 250nm 附近的負波峰位置, 二者有非常
大的差異。在熔點曲線試驗及熱力學參數的比較中亦發現二者的穩定性有
極大的差異存在。CG18 及C*G18 的熔點(Tm) 在本實驗的相關條件下差異
性高達 20℃。經由本實驗的數據, 可推斷出一個結論: 8-oxo-dG 對本實
驗所使用的 DNA 序列, 不論是結構或是穩定性均有很大的影響。然而
Plum 等人的實驗結果卻和本實驗結果有出入, 在其圓二色光譜的分析中
指出, CG 和 C*G 配對的 DNA 序列在結構上差異性很小, 熱力學參數上
差異亦不大 ((Tm=3-4℃, (H=3-5 kcal/mol)。若將本實驗的結果和Plum
等人於1995 年所發表的文獻相比較則可得知 8-oxo-dG 對 DNA 性質的影
響, 將視DNA 的序列而定。
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