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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:潘若芝
研究生(外文):PAN JO CHIH
論文名稱:不同培養方式對樟芝多醣及乙醇抽出物生產之研究
論文名稱(外文):Study of cultural methods on polysaccharide and ethanol extract product of Antrodia cinnamomea (CCRC36716)
指導教授:謝建元謝建元引用關係
指導教授(外文):Chienyan Hsieh
學位類別:碩士
校院名稱:大葉大學
系所名稱:生物產業科技學系碩士班
學門:生命科學學門
學類:生物科技學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2004
畢業學年度:92
語文別:中文
中文關鍵詞:樟芝多醣體三帖類
外文關鍵詞:Antrodia cinnamomeapolysaccharidetriterpene
相關次數:
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樟芝子實體(Antrodia cinnamomea)又稱牛樟芝或樟芝。此真菌只生長在台灣特有的牛樟樹上。被使用作為食物用來治療中毒、腹瀉、腸胃病、高血壓、皮膚病及癌症。
本研究主要探討於液態培養中,不同培養條件下對樟芝菌絲生長、多醣及三帖產生之影響。搖瓶試驗結果發現,以3%C.S.P為較佳氮源,於培養第10天之菌體濃度可達12.52g/L且1%C.S.P可使三帖含量達17mg/g-DW,而添加2%葡萄糖以可使胞內多醣產量達49mg/g-DW;添加樟腦油及牛樟木屑能有效增加三帖種類;添加0.5%葵花油培養第10天可提升胞外多醣濃度達873mg/L。在發酵槽中批次發酵提高氧氣濃度達30%時,亦可使三帖類濃度提升至18mg/g-DW。
The fruiting body of Antrodia cinnamomea is well known in Taiwan by name niu-chang-chih or jang-jy. This fungus is know only in Taiwan and is restricted to cinnamomum kanehirai Hay. The basidiomes have been used for the treatment of food and drug intoxication, diarrhea, abdominal pain, hypertension,skin itching and cancer.
The main purpose of this research was to study the effect of different cultivation conditions on the production of biomass, extracellular polysaccharide and triterpene in submerged culture. In this study 3%C.S.P as the nitrogen source the best cell concentration was found at 12.52g/L and 1% C.S.P as the nitrogen source the best triterpene production was found at 17mg/g-DW. Among the carbon sources 2% glucose had resulted in the highest intracellular polysaccharide concentration (49mg/g) after 10 day’s cultivation. Addition of camphor oil or wood chips of Cinnamomum kanehirae could enhance the production of triterpenes. The addition of sunflower seed oil the exopolysaccharide concentration increases to 873mg/L after 10 day’s cultivation. Increase the concentration of oxygen to 30% in a 5-L jar fermentation, the triterpene concentration was also found increase to 18mg/g-DW.
封面內頁
簽名頁
授權書                       iii
中文摘要                      v
英文摘要                      viii
誌謝                        viii
目錄                        viii
圖目錄                       viii
第一章 前言                    1
第二章 文獻回顧                  2
2.1 樟芝之介紹               2
2.2 食藥用菇之生理活性物質         5
2.3 三帖類化合物              6
2.3.1 樟芝中之三帖類          7
2.4 樟之中之多醣體            9
2.5 液態培養                12
2.5.1 高等蕈類深層培養         12
2.5.1.1 環境因子對深層培養的影響    13
第三章 實驗材料與方法              17
3.1 實驗材料              17
3.1.1 試驗菌種              17
3.1.2 實驗藥品             17
3.1.3 實驗器材              18
3.2 實驗方法                19
3.2.1 平板培養              19
3.2.2 液態菌酛培養            19
3.2.3 基礎平板之試驗           20
3.2.3.1 不同氮源對A. cinnamomea固態培養基
生長直徑之試驗   20
3.2.4 樣品萃取試驗            21
3.2.4.1 不同萃取方法對於樟芝三帖類之影響 21
3.2.5 搖瓶液態發酵試驗        21
3.2.5.1 不同濃度氮源       21
3.2.5.2 不同濃度碳源     22
3.2.5.3 不同碳源混合    22
3.2.5.4 時間變化          23
3.2.5.5 添加樟腦油         24
3.2.5.6 添加牛樟木屑        24
3.2.5.7 添加不同油脂        25
3.2.6 探討不同溶氧          26
3.3 分析方法                 27
3.3.1 菌體乾重測定            27
3.3.2 pH測定               27
3.3.3 胞外多醣分析            27
3.3.3.1 酚硫酸法         27
3.3.3.1.1 標準曲線製作步驟    27
3.3.3.1.2 胞外多醣濃度測定    28
3.3.4 胞內多醣分析          28
3.3.4.1 胞內多醣濃度測定     28
3.3.5 三帖分析             29
3.3.5.1 菇類菌絲體粉末製備    29
3.3.5.2 樣品萃取         29
3.3.5.3三帖含量測定       30
3.3.5.4三帖類化學結構之鑑定  30
第四章 結果與討論                  32
4.1 基礎平板之試驗           32
4.1.1 不同氮源對A. cinnamomea固態培養基生長
直徑之影響        32
4.2 樣品萃取試驗             34
4.2.1 不同萃取方法對於A. cinnamomea三帖類之
影響            34
4.3 液態搖瓶發酵             36
4.3.1 不同濃度氮源對樟芝菌絲體及其生理活性物
質生成之影響        36
4.3.2 不同濃度碳源對樟芝菌絲體及其生理活性物
質生成之影響        44
4.3.3 不同碳源混合對樟芝菌絲體及其生理活性物
質生成之影響        52
4.3.4 時間變化對樟芝菌絲體及其生理活性物質生
成之影響          55
4.3.5 添加樟腦油對樟芝菌絲體及其生理活性物質
生成之影響         63
4.3.6 添加木屑對樟芝菌絲體及其生理活性物質生
成之影響         67
4.3.7 不同油脂類對樟芝菌絲體及其生理活性物質
生成之影響        69
4.3.8 探討不同溶氧對A. cinnamomea於發酵槽中
批次發酵之影響      76
4.3.9 三帖類化學結構之鑑定     83
第五章 結論           96
參考文獻           97
附錄一 營養源A成分表         102
附錄二 營養源B成分表         103
附錄三 多醣體濃度檢量線        104
附錄四 標準品Ginsenoside-RC濃度檢量線  105
附錄五 口試問題              106
圖目錄
圖2.1 樟芝子實體萃取物中發現新的三帖類化合物   10
圖2.2 樟芝子實體萃取物中發現新的三帖類化合物   11
圖4.1 樟芝菌絲體在不同氮源之固態培養皿上之生長曲線 33
圖4.2 不同方式萃取A. cinnamomea之HPLC層析圖  35
圖4.3 不同氮源對樟芝三帖成分生成之影響   42
圖4.4 不同氮源對樟芝三帖含量生成之影響   43
圖4.5 不同碳源對樟芝三帖成分生成之影響   49
圖4.6 不同濃度之碳源對樟芝三帖含量生成之影響 50
圖4.7 不同碳源混合對樟芝三帖總量生成之影響 54
圖4.8 以不同濃度氮源探討時間變化對樟芝菌絲體生成之影響
   56
圖4.9 以不同濃度氮源探討時間變化對樟芝菌多醣生成之影響
   57圖4.10 以0.5% C.S.P為氮源探討時間變化對樟芝菌三帖生成
之影響  59
圖4.11 以1.0% C.S.P為氮源探討時間變化對樟芝菌三帖生成
之影響  60
圖4.12 以1.5% C.S.P為氮源探討時間變化對樟芝菌三帖生成
之影響  61
圖4.13 不同濃度氮源之樟芝三帖含量生長曲線 62
圖4.14 添加物對樟芝菌三帖生成之影響 65
圖4.15 添加物對樟芝三帖含量生成之影響 66
圖4.16 添加不同油脂對樟芝菌三帖生成之影響 74
圖4.17 不同濃度之油脂對樟芝三帖總量生成之影響 75
圖4.18 以批次發酵探討不同溶氧對樟芝菌體生長之影響 77
圖4.19 以批次發酵探討不同溶氧對樟芝菌產生多醣之影響 78
圖4.20 以批次發酵探討21% O2對樟芝菌三帖生成之影響 80
圖4.21 以批次發酵探討30% O2對樟芝菌三帖生成之影響 81
圖4.22 以批次發酵探討不同溶氧對樟芝三帖含量之影響 82
圖4.23 子實體及菌絲體經HPLC分析之圖譜 84
圖4.24 子實體peak 1(滯留時間66min)之質譜 85
圖4.25 子實體peak2(滯留時間68min)之質譜 86
圖4.26 子實體peak3(滯留時間70min)之質譜 87
圖4.27 子實體peak4(滯留時間76min)之質譜 88
圖4.28 子實體peak 5(滯留時間80min)之質譜 89
圖4.29 菌絲體 component A之質譜 90
圖4.30 菌絲體 component B之質譜 91
圖4.31 菌絲體 component C之質譜 92
圖4.32 子實體peak 1之核磁共振光譜 93
圖4.33 子實體peak 2之核磁共振光譜 94
圖4.34 子實體peak 3之核磁共振光譜 95
表目錄
表4.1 不同氮源培養10天對A. cinnamomea菌體生成之影響 37
表4.2 不同氮源培養14天對A. cinnamomea菌體生成之影響 38
表4.3 不同氮源對樟芝菌發酵液呈色及pH之影響 39
表4.4 不同碳源培養10天對A. cinnamomea菌體生成之影響 45
表4.5 不同碳源培養14天對A. cinnamomea菌體生成之影響 46
表4.6 不同碳源混合培養10及14天對A. cinnamomea菌體生成
之影響  53
表4.7 添加樟腦油培養10及14天對A. cinnamomea菌體生成之
影響  64
表4.8 添加牛樟木屑培養10及14天對A. cinnamomea菌體生成
之影響  68
表4.9 不同油脂培養10天對A. cinnamomea菌體生成之影響 70
表4.10 不同油脂培養14天對A. cinnamomea菌體生成之影響 71
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