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研究生:蔣雅慧
研究生(外文):Ya-Hui Chien
論文名稱:添加物對樟芝菌絲與抗氧化活性生成之影響
論文名稱(外文):The Effects of Additives on the Mycelium Production and the Formation of Antioxidant Activity of Antrodia camphorata
指導教授:楊芳鏘楊芳鏘引用關係
指導教授(外文):Fan-Chiang Yang
學位類別:碩士
校院名稱:東海大學
系所名稱:化學工程學系
學門:工程學門
學類:化學工程學類
論文出版年:2005
畢業學年度:93
語文別:中文
論文頁數:62
中文關鍵詞:抗氧化掃除DPPH自由基活性總多酚類化合物
外文關鍵詞:antioxidantDPPH radical scavenging activitypolyphenols
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本研究主要目的,為探討以三角瓶液態培養,了解不同添加物及培養條件對於樟芝(Antrodia camphorata BCRC35396 )菌絲生長、抗氧化效果、DPPH自由基掃除活性及總多酚含量之影響。
實驗結果顯示:於250ml三角瓶中,以100ml培養液含玉米澱粉4.78%、YM Broth 3.19%在pH=5.54、25℃下,以轉速100rpm於恆溫培養箱培養14天,其中添加10%之乳化劑(tween85)菌體乾重達2.39g/100ml,是未添加的2倍左右,添加0.1% polypropylene glycol掃除DPPH自由基活性達39.93%,較未添加提高10%;添加5%葡萄籽油總多酚量可達27.9mg/g extract,是未添加添加的1.5倍,0.1%polypropylene glycol總多酚量可達68.9mg/g extract,是未添加的3倍。
而碳氮比愈低,菌絲生長情況愈好,在碳源濃度5%、碳氮比0.78:1下,菌絲乾重最高可達1.52g/100ml,是碳氮比50:1的2.5倍,且總多酚含量與掃除DPPH自由基活性有相關性。
The main purpose of this research was to study the effect of culture conditions on the mycelium production, the formation of antioxidant activity in submerged culture of Antrodia camphorata (BCRC35396).
Shaken-flask cultures were carried out in the medium containing 4.78% of corn starch, 3.19% of YM broth at 25℃, initial pH 5.54 and 100rpm. The supplementation of 10% tween 85 was found to be beneficial to the mycelium growth. The biomass concentration reached 2.39g/100ml, which was two folds higher than that of the control. With the addition of 0.1% polypropylene glycol, DPPH radical scavenging activity could rise to 39.93% and the amount of total polyphenol could reach 68.9(mg/g extract), which was 3 times higher then that of the control. Moreover, 5% of grape seed oil could cause a 1.5 time increase of the amount of total polyphenol.
The media with low C/N ratio was proved to be favorable to the mycelium growth and the biomass concentration could reach 1.52g/100ml at low C/N ratio of 0.78. Compared with shaken-flask cultures, surface cultures could lead to the increase of DPPH radical scavenging activity and antioxidant activity.
目 錄

誌 謝 .....................................................................Ⅰ
中文摘要 .................................................................... Ⅱ
英文摘要 .................................................................... Ⅲ
目 錄 .................................................................... Ⅳ
表 目 錄 .................................................................... Ⅵ
圖 目 錄 .................................................................... Ⅶ


第一章 緒論

1.1 研究動機與背景......................................... 1
1.2 研究目的....................................................... 2

第二章 文獻回顧

2.1 樟芝的介紹 ............................................................ 3
2.1.1 樟芝之命名...................................................... 3
2.1.2 樟芝之分類地位............................................... 3
2.1.3 樟芝之抗氧化效用及其生理活性試驗…...............4
4.2 脂肪酸添加及碳氮比對液態培養之影響.................... 4
2.2.1脂肪酸添加對液態培養之影響............................ 4
2.2.2碳氮比對液態培養之影響............................... 5
2.3 氧化與抗氧化作用…..................................................5
2.3.1脂質自氧化反應…...................................... 5
2.3.2抗氧化劑....…...................................... 7
2-4 多酚類化合物 ......................................................... 9
2.4.1多酚類之化學結構…….................................. 9
2.4.2 多酚類之分析方法......................................... 14
2.4.3 多酚類之功用............................................... 14

第三章 實驗材料與分析方法

3.1 菌株 .................................................................... 15
3.2 實驗藥品 ............................................................. 15
3.3 實驗儀器與設備 ................................................... 16
3.4 實驗方法 ............................................................. 17
3.4.1試管斜面培養…….. ........................... 17
3.4.2 培養皿平面培養............................................. 17
3.4.3 液態種菌培養 ...................................... 18
3.4.3探討添加物對樟芝菌絲生長及抗氧化活性生成之影
響……………………………………………………….18
3.4.5探討靜置及振盪方式之表面通氣交應對樟芝菌絲生成之影響……………………………………………18
3.4.6探討不同碳氮比對樟芝菌絲生長及抗氧化活性生成之影響………………………………………………..19
3.5分析方法………………………………………………………19
3.51 pH值測定………………………………………………19
3.5.2菌體濃度測定……………………………………………19
3.5.3 甲醇萃出物製備………………………………………19
3.5.4 掃除DPPH自由基活性測定………………………20
3.5.5 抗氧化活性測定………………………………………20
3.5.6 總多酚含量測定………………………………………20

第四章 結果與討論

4.1 不同添加物添加物對樟芝菌絲生長及抗氧化活性生成之影響…………………………………………………………22
4.1.1 添加橄欖油................................................. 22
4.1.2 添加葡萄籽油.......................................... 25
4.1.3 添加花生油............................................... 28
4.1.4 添加沙拉油...................................... 31
4.1.5 添加乳化劑Tween20................................... 34
4.1.6 添加乳化劑Tween85................................... 37
4.1.7 添加polypropylene glycol……....................... 40
4.2探討表面通氣效應對樟芝菌絲生長及抗氧化活性生成之影響……………………………………………………………... 43
4.3探討不同碳氮比對樟芝菌生及抗氧化活性生成之影響. 49
4.3.1 碳源濃度5%………………………………………..51
4.3.2 碳源濃度3%……………………………………………53
4.3.3 碳源濃度 1%…………………………………………55

第五章 結論與展望

5-1 結論 ........................................................... 57
5-2 未來展望…............................................. 57

參考文獻 ………………………………………………………………………………………59








表目錄

Table.1-1 樟芝成分中具有藥性之物質……………............. 1
Table.2-1 polyphonels in foods………………............. 12
Table.3-1 實驗藥品 .................................................. 15
Table.3-2 實驗儀器與設備 ........................................ 16























圖目錄

Fig.2.1 樟芝子實體......................................... 3
Fig.2.2常用之人工合成抗氧化劑............................. 8
Fig.2.3人體內之自由基與氧化反應與疾病生成之關係…….9
Fig.2.4 Chemical structures of polyphenols...................... 10
Fig.2.5 Chemical structures of polyphenols.................... 11
Fig.2.6 類黃酮的基本結構…..………………………….......... 13
Fig.2.7各種花青素的結構….…….…….............................. 14
Fig3.1多酚檢量線……….………………………………………21
Fig 4.1添加橄欖油樟芝菌絲生長情況……………….…..…….22
Fig 4.2添加橄欖油對樟芝菌絲生長及發酵液pH值之影響及菌絲體甲醇萃出率之影響……………………………...... 23
Fig 4.3添加橄欖油對樟芝抗氧化、掃除DPPH活性、總多酚含量….……………………………………………………. 24
Fig 4.4添加葡萄籽油樟芝菌絲生長情況……………………...25
Fig 4.5添加葡萄籽油對樟芝菌絲生長及發酵液pH值及菌絲體甲醇萃出率之影響………….………………..……….….26
Fig 4.6添加葡萄籽油對樟芝抗氧化、掃除DPPH活性、總多酚含量之影響…………….………………….………….. 27
Fig 4.7添加花生油樟芝菌絲生長情況...…………….…………28
Fig 4.8添加花生油對樟芝菌絲生長及發酵液pH值及菌絲體甲醇萃出率之影響………….…..………………………..29
Fig 4.9添加花生油對樟芝抗氧化、掃除DPPH活性、總多酚含量之影響………………………………….…... 30
Fig 4.10添加沙拉油樟芝菌絲生長情………………...…..…….31
Fig 4.11 添加沙拉油對樟芝菌絲生長及發酵液pH值及菌絲體甲醇萃出率之影響…………….……………………. 32
Fig 4.12添加沙拉油對樟芝抗氧化、掃除DPPH活性、總多酚含量之影響…….………………………………………33
Fig 4.13添加tween20樟芝菌絲生長情況………………..…….34
Fig4.14添加tween20對樟芝菌絲生長及發酵液pH值及菌絲 體甲醇萃出率之影響…………………….……………. 35
Fig 4.15添加tween20對樟芝抗氧化、掃除DPPH活性、總多酚含量之影響……………………………………….……36
Fig 4.16添加tween20樟芝菌絲生長情況……………...…….37
Fig 4.17添加tween85對樟芝菌絲生長及發酵液pH值及菌絲體甲醇萃出率之影響……….................... 38
Fig 4.18 添加tween85對樟芝抗氧化、掃除DPPH活性、總多酚含量之影響………………………….…………….... 39
Fig 4.19添加tween20樟芝菌絲生長情況………….…..…….40
Fig 4.20 添加ppg對樟芝菌絲生長及發酵液pH值之影響及菌絲體甲醇萃出率之影響..…………….......…....…... 41
Fig 4.21 添加ppg對樟芝抗氧化、掃除DPPH活性、總多酚含量之影響…………………………………………….... 42
Fig 4.22表面通氣樟芝菌絲生長情況(I)…………..……………43
Fig 4.23表面通氣樟芝菌絲生長情況(II)…………………….…44
Fig 4.24表面通氣試驗對樟芝菌絲生長及發酵液pH值及菌絲體之影響(I)………………………………………....…45
Fig 4.25表面通氣試驗對樟芝抗氧化、掃除DPPH活性、總多酚含量及菌絲體甲醇萃出率之影響(I)…………………………………………………………..46
Fig 4.26表面通氣試驗對樟芝菌絲生長及發酵液pH值之影響(II)……………………….…………….………………...47
Fig 4.27表面通氣試驗對樟芝抗氧化、掃除DPPH活性、總多酚含量及菌絲體甲醇萃出率之影響(II)………………………………………..…………...... 48
Fig4.28碳源濃度1%之C/N ratio樟芝菌絲生長情況…………49
Fig 4.29碳源濃度5%之C/N ratio對樟芝菌絲生長及發酵液pH值及甲醇萃出率之影響……...…………………........ 51
Fig 4.30碳源濃度5%之C/N ratio對樟芝抗氧化、掃除D..PPH活性、總多酚含量之影響…………………………..…. 52
Fig 4.31碳源濃度3%之C/N ratio對樟芝菌絲生長及發酵液pH值與甲醇萃出液之影響…………………………….......53
Fig 4.32碳源濃度3%之C/N ratio對樟芝抗氧化、掃除DPPH活性、總多酚含量之影響..……………………………..54
Fig 4.33碳源濃度1%之C/N ratio對樟芝菌絲生長及發酵液pH值之影響………………………………………………55
Fig 4.33碳源濃度1%之C/N ratio對樟芝抗氧化、掃除DPPH活性、總多酚含量之影響………………………………56
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