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研究生:王皓緯
研究生(外文):Wang,Haowei
論文名稱:固態發酵培養基組成對於樟芝菌絲體活性成份生成之影響
論文名稱(外文):Effect of medium compositionon on the fermentation of bioactive compositions in solid state fermentation of Antrodia cinnamomea
指導教授:楊芳鏘楊芳鏘引用關係
指導教授(外文):Yang,FanChiang
口試委員:顏宏偉林松池王敏盈
口試委員(外文):Yen,HongWeiLin,SungChyrWang,MinYing
口試日期:2011-07-06
學位類別:碩士
校院名稱:東海大學
系所名稱:化學工程與材料工程學系
學門:工程學門
學類:化學工程學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2011
畢業學年度:99
語文別:中文
論文頁數:86
中文關鍵詞:樟芝蕎麥果皮三萜
外文關鍵詞:Antrodia cinnamomeabuckwheatcitrusmetabolites
相關次數:
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近年來,真菌發酵產物與其菇類子實體,其藥理與生理活性成份受到重視。其中以台灣獨有的真菌-樟芝(Antrodia cinnamomea)更是學術研究重點之一。實驗利用添加物,刺激樟芝菌絲體提升二代謝產物含量。結果發現,在添加金桔皮乾燥粉末 1 g/瓶 培養 28天 後分析發酵物基質(Substrate)得知粗三萜含量增加 63.84% ,其次為葡萄柚皮粉末與柚子皮粉末 24.46% 與 19.47%。改變添加濃度變化得知,金桔在 2 g/瓶 可以達到最高的粗三萜含量 32.55 mg/g sub.。將金桔果皮經過水淬取後將水淬取液與殘渣添加進行培養後試驗,得知水淬取與淬取殘渣都可以在第28天提升葡萄糖胺含量,而金桔果皮則會低於控制組;結果顯示三種培養的粗三萜含量都高於控制組,但是總多酚含量和總類黃酮含量則低於控制組。為了探討粗三萜生成機制和總多酚的相關性,選取了本身萜類較少而總多酚含量與柑橘果皮相同的天然物做添加,結果顯示葡萄果皮添加 1 g/瓶 在第28天葡萄糖胺含量與粗三萜類含量皆高於控制組而達到 3.84 mg/g sub.與 28.07 mg/g sub.。實驗結果皆證實使用天然物添加,對於樟芝菌絲體提高代謝產物是有十分明顯的影響與效果。
In recent years many medicinal mushrooms have been well-known to contain various physiological components with bioactive functions. Antrodia cinnamomea is an endemic medical mushroom in Taiwan and their major effective components are polysaccharides, steroids and triterpenoids. However, the fact that the fruiting body grow extremely slow make it difficult to be used very popularly.
The aim of this research was to investigate the feasibility of enhancing the production of bioactive components by adding fruit peels into the media for solid-state fermentation(SSF) of Antrodia cinnamomea. The results show that peel powder made from kumquat, grapefruit, pemole could increase triterpenoid content in mycelia by 63.84%, 26.46% and 19.47%, respectively. In addition, crude triterpenoid concentration reaches to 32.55 mg/g sub at the concentration of 2g kumquat /peck. When different kinds of kunmquat extract(kumquat peel, water extract, kumquat pomace, control) were added and compared, the addition of water extract and kumquat pomace were found to be beneficial to the production of crude triterpenoid and glucosamine at the 28 day. In contrast kumquat peel showed some inhibitory effect on the formation of glucosamine. It is interesting to note that all kind additives had a negative effect on the production of total phenol and flavonoids. In order to investigate the biotransformation mechanism, grape and apple peel, whose fruit peels contain less amounts of terpenoids, were added into the media for SSF. The results reveal that the addition of grape peel could also enhance the formation of crude triterpenoid, which reached to 28.07 mg/g sub at the 28 day. This study demonstrates that the formation of bioactive components in the mycelia of Antrodia cinnamomea could be enhanced by adding fruit peel into the media.
中文摘要 III
目錄 VI
表目錄 X
圖目錄 XI
第一章 緒論 1
1-1 前言 1
1-2 研究動機與目的 2
第二章 文獻回顧 3
2.1 菇類與真菌簡介 3
2.2 真菌次代謝產物 4
2.3 樟芝 5
2.3.1 樟芝的分類 5
2.3.2 樟芝的命名 5
2.3.3 樟芝生理活性成份 6
2.3.4 樟芝的培養方法 11
2.3.5 添加物對於樟芝菌體生長代謝的影響 14
2.4 固態發酵 16
2.4.1 固態發酵概述 16
2.4.2 固態發酵培養特點: 17
2.4.3 固態發酵之優缺點 18
2.4.4 固態發酵培養重要參數 19
2.5 蕎麥 21
2.5.1 蕎麥的介紹 21
2.5.2 蕎麥的生理活性成份與應用 21
2.6 柑橘類果皮與葡萄、蘋果果皮 24
2.6.1 柑橘類果皮與葡萄、蘋果果皮概述 24
2.6.2 柑橘類果皮與葡萄、蘋果果皮的生理活性成份與應用 24
第三章 實驗架構、方法與材料 27
3.1 實驗架構 27
3.2 實驗方法 31
3.2.1 添加物處理 31
3.2.2 不同蕎麥基質對於樟芝菌絲體生成粗三萜的影響 31
3.2.3 不同果皮添加對樟芝菌絲體代謝產物的影響 31
3.2.4 不同濃度添加對於樟芝菌絲體代謝產物的影響 32
3.2.5 金桔水淬液對於樟芝菌絲體代謝產物的影響 33
3.2.6 果皮總多酚對於樟芝菌絲體代謝產物的影響 33
3.3 菌種培養與保存 35
3.3.1 樟芝菌株 35
3.3.2 菌種培養與保存 35
3.4 培養皿平面培養與接菌活化 35
3.4.1 種瓶的製備 36
3.4.2 三角瓶固態培養試驗 36
3.5 實驗藥品和儀器 38
3.5.1 實驗藥品 38
3.5.2 實驗儀器與設備 40
3.6 樣品分析 41
3.6.1 樣品甲醇萃取液 41
3.6.2 固態發酵菌絲菌體濃度測定 41
3.6.3 三萜之分析 42
3.6.4 總多酚分析 43
3.6.5 總類黃酮分析 43
第四章 實驗結果與討論 44
3.1 不同蕎麥基質對於樟芝菌絲體代謝產物的影響 44
3.2 不同添加物對樟芝菌絲體代謝產物的影響 50
3.3 不同濃度對於樟芝菌絲體代謝產物的影響 55
3.4 金桔水萃液對樟芝菌絲體代謝產物的影響 58
4.5 果皮總多酚對樟芝菌絲體代謝產物的影響 63
結論 68
未來展望 69
參考文獻 70

表目錄
表2- 1從真菌次級代謝物開發新藥優勢 4
表2- 2蕎麥種實成份平均值及其與其他作物種實成份間之比較 22
表2- 3蕎麥粉之蛋白質含量與利用率及與其他作物和食品之比較 22
表3- 1實驗藥品清單 38
表3- 2實驗儀器清單 40
表4-1不同苦蕎麥基質對於樟芝菌絲體發酵的影響 49
表4-2不同種添加物對樟芝菌絲體代謝產物的影響 54
表4-3不同濃度添加物對樟芝菌絲體代謝產物的影響 57
表4-4金桔水淬液對樟芝菌絲體代謝產物的影響 62
表4- 5果皮總多酚對樟芝菌絲體代謝產物的影響 67

圖目錄
圖2-1天然物合成的三大路徑(圖A)(林豔琪,2006) 7
圖2-2萜烯生物合成途径(圖B)( Dorothea Tholl,2006) 8
圖2-3使用平板培養基培養樟芝菌絲體 13
圖2-4段木培養基培樣樟芝菌絲體 13
圖2-5氣舉式發酵槽培養 13
圖3-1實驗架構圖 28
圖3-2代謝路徑圖 30
圖4-1樟芝菌絲體在有殼苦蕎麥為基質的代謝產物變化 46
圖4-2不同苦蕎麥基質對於樟芝菌絲體產粗三萜的影響 46
圖4-3使用磨粉無芯蕎麥殼後培養28天後培養狀況 47
圖4-4使用無芯蕎麥殼培養28天後培養狀況 47
圖4-5使用有殼蕎麥粉末培養第28天 48
圖4-6使用無殼蕎麥培養第28天 48
圖4-7使用台產普通蕎麥培養第28天 48
圖4-8金桔粉末對樟芝菌絲體產生有效物質的影響 52
圖4-9檸檬粉末對樟芝菌絲體產生有效物質的影響 52
圖4-10葡萄柚粉末對樟芝菌絲體產生有效物質的影響 53
圖4-11柚子粉末對樟芝菌絲體產生有效物質的影響 53
圖4-12柳丁粉末對樟芝菌絲體產生有效物質的影響 54
圖4-13使用金桔粉末濃度變化觀察樟芝培養第24天情形 57
圖4-15不同金桔萃取成份對樟芝菌絲體產生葡萄糖胺的影響 60
圖4-16不同金桔萃取成份對樟芝菌絲體產生粗三萜類的影響 60
圖4-17不同金桔萃取成份對樟芝菌絲體產生總類黃酮類的影響 61
圖4-18不同金桔萃取成份對樟芝菌絲體產生總多酚類的影響 61
圖4-19 蘋果與葡萄果皮添加對於樟芝菌絲體生產葡萄糖胺之影響 65
圖4-20蘋果與葡萄果皮添加對於樟芝菌絲體生產粗三萜類之影響 65
圖4-21蘋果與葡萄果皮添加對於樟芝菌絲體生產總多酚之影響 66
圖4-22蘋果與葡萄果皮添加對於樟芝菌絲體生產總類黃酮之影響 66

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