臺灣博碩士論文加值系統

本研究探討黃耆之基原植物蒙古黃耆(Astragalus mongholicus)，與其在台灣地區常見代用品多序岩黃耆(Hedysarum polybotrys)，在農藝性狀、組織切片以及分子層次上的差異，供作中藥科學化之參考。首先由蒙古大學所提供之黃耆在台灣試種並觀察適應情形；另收集市售的蒙古黃耆與多序岩黃耆進行其根部藥材組織切片，觀察並比較其間的差異。另一方面利用逢機擴增多型性核酸(Random amplified polymorphism DNA, RAPD)技術，分析黃耆與多序岩黃耆之間 DNA 多型性差異。並將藥之鄉生物科技公司提供之未知樣品進行歸群。
本研究栽種的黃耆，可以由外表粗分成直立型、匍匐型、紅色莖和青色莖四種。就植物性狀及分類學角度，可知匍匐型可能為金翼黃耆或西康黃耆，而直立型為蒙古黃耆。本研究結果顯示，這兩種型態的黃耆對於台灣地區氣候的適應能力沒有明顯差異，皆不耐台灣夏天高溫高溼的氣候。
栽培期間直立型與匍匐型植株葉長皆無顯著差異。在栽培初期直立型小葉較匍匐型長，而匍匐型的小葉隨植株成熟而變寬。整體而言，生長後期直立型與匍匐型的小葉葉片型態沒有明顯差異。
在組織切片方面，本研究的蒙古黃耆切片沒有觀察到通常可在篩部外側、近栓內層處觀察到的石細胞； 在纖維束或薄壁細胞附近也沒有觀察到草酸鈣結晶。但在多序岩黃耆的切片，可以在韌皮纖維束和木質部纖維束的四周觀察到草酸鈣結晶。
而在 RAPD 分析上，用 60 個逢機引子對所有材料進行 RAPD 擴增，其中有 15 個引子在黃耆與多序岩黃耆間可擴增出明顯的多型性產物。多序岩黃耆特有的條帶共 29 條，而蒙古黃耆特有的條帶共 17 條。本研究成功將未知樣品歸群到黃耆屬，且與本試驗的匍匐型黃耆較為接近。本研究結果為鑑定黃耆藥材基原提供分子層次的應用技術。

目錄......ⅰ
圖目錄......ⅱ
表目錄......ⅴ
縮寫字表......ⅶ
壹、緒言......1
貳、前人研究......2
參、材料與方法......12
肆、結果......17
一、黃耆之栽培及其農藝性狀......17
二、分類學外觀之比對......26
三、蒙古黃耆與多序岩黃耆之組織切片研究......30
四、蒙古黃耆與多序岩黃耆之 RAPD 分析......35
伍、討論......53
一、黃耆在台灣地區之生長情況......53
二、黃耆在台灣地區之栽種......53
三、組織切片在黃耆基原鑑定之應用......54
四、蒙古黃耆與多序岩黃耆之 RAPD 分析......55
陸、中文摘要......57
柒、英文摘要......59
捌、參考文獻......61
附錄......68

山本豊、姜東孝、山根千枝、竹内美和、神田博史。1999。生薬“茵陳蒿”と基原植物カワラヨモギArtemisia capillarisに関する研究。 Nat. Med. 53(5)：229-236。
上海中醫學院方藥教研組。1977。中醫臨床手冊。上海人民出版社。pp. 121。
王西芳。1989。57 種中藥材中草酸鈣結晶的初步研究。中國中藥雜誌14（3）：10-14。
中草藥黃芪的種植管理技術。2005年6月。取自：http://www.gpagri.com/ReadNews.asp?NewsID= 1672。
中藥顯微鑑定。2005年6月。取自：http://www.15688.com/ w05.htm。
各種黃耆及其相關生藥製劑之應用。2005年6月。取自：http://tinyurl.com/c2w9h。
安寶貞、羅朝村、謝廷芳、黃秀華。1999。作物病害之非農藥防治。農委會農林廳編印。
吳東霖、林傑斌、劉明德。2001。SAS與統計模式建構。文魁資訊股份有限公司。pp. 14.2-14.13。
吳瑛，周素娣，李萍。2000。DNA分子標記技術在藥用植物分類研究上的應用。海峽藥學 12(4)：103-104。
林郁進、張永勳、蔡新聲。1995a。黃耆類藥材之鑑定研究Ⅰ.膜莢黃耆、蒙古黃耆與多序岩黃耆之辯偽。中華農業研究 44 (2)：101-113。
林郁進、蔡新聲、那琦、謝明村、張永勳。1995b。黃耆類藥材之生藥學及膜莢黃耆組織培養之研究。博士論文。中國醫藥學院中國藥學研究所。台中。
前景較好的幾個中藥材種植項目。2005年6月。取自：http://jy.fjnk.org.cn/wz/ReadNews.asp?NewsID = 799。
胡凱康。2001。分子標誌在品種鑑定上之應用。出自”兩岸種苗科技研討會專刊”，沈再發、王小華、黃玉梅主編，pp. 87-97。中華種苗學會。台中。
孫三省，張良君，褚承赤，王吉仁，李明剛。1990。黃耆藥材品種調查與鑑定。中國藥學雜誌 25：643-647。
夏欣、孫常平、張守祿。2000。黃耆化學成分及其對心血管系統影響的機理。牡丹江醫學院學報 21(3)；74-76。
秦偉，程金平。2000。黃耆藥效與開發。時珍國醫國藥11(11)：1039-1040。
陳俊華。1990。貴重中藥及中成藥檢定方法的探討。中國中藥雜誌 15(3)：16-17。
陳麗文。2000。草酸鈣結晶在幾種藥材鑑定中的應用。海峽藥學 12(1)：103。
張永勳。2002。台灣市售易誤用、混用中藥品種之檢討。出自”2002國際中草藥產業技術－品質管制研討會會序及論文集”，pp.163-173。中國醫藥學院。台中。
張明理。2000。用 GIS 技術研究中國簇毛黃耆亞屬(豆科：
黃耆屬)的地理分布式樣。植物學報 42(8)：849-854。
郭兆貴。1980。黃耆用擴張血管作用及與 a-氨酪酸的比較。中醫雜誌。2(5)；73。
郭昭麟、張永勳、林郁進、郭啟文、葉豐次、陳忠川。2002。中藥材之顯微鑑定。出自”2002國際中草藥產業技術－品質管制研討會會序及論文集”，pp. 155-162。中國醫藥學院。台中。
張銀娣。1984。黃耆皂苷甲的抗炎和降壓作用。醫學學報19(5)：333。
許益民、李建新、吳啟南、陳建樓、姜小平。1989。藥用植物中結晶物的類型及分佈述要。中國中藥雜誌14（2）：6-8。
賀正全。1989。草酸鈣結晶體在被子植物中的分佈及其在顯微生藥學中的應用。中國中藥雜誌14（1）：3-5。
喻正刊、劉星諧、鄭基蒙。1992。黃耆注射擊液中對心臟下成長靚力作用的成分分離與鑑定。植物資源與環境 2(1)；4-6。
黃耆（membranous milkvetch）。2005年6月。取自：http://myurl.com.tw/h8ic。
黃耆栽培技術。2005年6月。取自：http://www.wlnjw.gov.cn/ nlj/other/nmpx_G.asp?GetID=2。
曾人和、林隆達、溫國慶。1991。市售黃蓮、黃耆及柴胡藥材之型態組織及化學鑑定。藥物食品檢驗局調查研究年報 9：159-179。
新文豐出版公司編。1985。新編中藥大辭典（下輯）。新文豐出版公司。pp.2102-2105。
蔡淑華。1988。植物組織切片技術綱要。茂昌圖書有限公司。pp. 1-43。
鄭可大。1999。常見柴胡中藥材品種之分子鑑定。行政院衛生署中醫藥年報 17(2)：487-489。
鄭學忠。1987。生藥學。人民衛生出版社。pp.93。
劉星諧，喻正刊。1995。黃耆成分和藥理研究進展。上海醫藥 6(2)：23-24。
劉勝祥。1994。植物資源學。武漢出版社。pp. 185。
樊瑛、楊春清、呂秀茂。1983。黃耆的害蟲及其防治。中草藥 14(2)：31-34。
謝海林。1989。槲皮素及一些中草藥提取物抗自由基作用的初探。蘇州醫學院學報 9(4)；278。
Anderberg, M. 1973. Cluster Analysis for Applications, vol. 19
of Probability and Mathematical Statistics. Academic Press.
Cheng K. T., H. C. Chang, C. H. Su and F. K. Hsu. 1997. Identification of dried rhizomes of Coptis species using random amplified polymorphic DNA. Bot. Bull. Acad. Sin. 38:241-244.
Cheng, K. T., H. C. Chang, H. Huang, and C. T. Lin. 2000. RAPD analysis of Lycium medicine in Taiwan market. Bot. Bull. Acad. Sin. 41(1):11-14.
Chiou, F. S., C. Y. Pai, Y. P. Hsu, C. W. Tsai and C. H. Yang. 2001. Extraction of human DNA for PCR from chewed residues of betel quid using a novel "PVP/CTAB" method. J Forensic Sci. 46(5):1174-9.
Cui, X. M., C. K. Lo, K. L. Tip, T. T. X. Dong, and K. W. K. Tsim. 2003. Authentication of Panax notoginseng by 5S-rRNA spacer domain and random amplified polymorphic DNA (RAPD) Analysis. Planta Med. 69:584-586.
Dominique, B. 1992. An alternative, rapid method of plant DNA extraction for PCR analysis. Nucleic Acids Res. 20(17):4676.
Ellswoth, D. L., K. D. Rittenhouse and R. L. Honetcutt. 1993. Antifactual variation in randomly amplified polymorphic DNA banding patterns. BioTechniques 14(2):214-217.
Fushimi, H., K. Komatsu, M. Isobe, and T. Namba. 1997. Application of PCR-RFLP and MASA Analyses on 18S Ribosomal RNA Gene Sequence for the Identification of Three Ginseng Drugs. Biol. Pharm. Bull. 20(7):765-769.
Gerner-Smidt, P., L. M. Graves, S. Hunter, and B. Swaminathan. 1998. Computerized analysis of restriction fragment length polymorphism patterns: comparative evaluation of two commercial software packages. J. Clin. Microbiol. 36:1318-1323.
Gill, G. P., C. F. Harvey, R. C. Gardner, and L. G. Fraser. 1998. Development of sex-linked PCR markers for gender identification in Actinidia. Theor. Appl. Genet. 97:439-445.
Graham, T. L..1991. Flavonoid and isoflavonoid distribution in developing soybean seedling tissues and in seed and root exudates. Plant Physiol. 95:594-603.
Jun, W., H. Wai-Yan, N. Fai-Ngor, B. Paul Pui-Hay, and S. Pang-Chui. 2001. Application of sequence characterized amplified region (SCAR) analysis to authenticate Panax species and their adulterants. Planta Med. 67:781-783.
Kakutani, K., K. Igita, A. Kikuchi, S. Kudou and K. Okubo. 1991. Low isoflavone content in some early maturing cultivars, so-called “summer-type soybeans”(Glycine max L. Merrill). Japan. J. Breed. 41:651-654.
Kang, T. G., T. Kawamura., X. L. Wu, and T. Tanaka. 2000. Pharmacognostical evaluation of Arctii Fructus. (3) Discrimination of the botanical origin based on morphological and histological differences. Natural Medicines 54(4):178-185.
Kovach, W.L. MVSP - Multivariate Statistical Package for Windows, Version 3.1 Pentraeth, Wales, UK. Kovach Computing Services. 1999.
Mihalov, J.J., A. D. Marderosian, and J. C. Pierce. 2000. DNA identification of commercial Ginseng samples. 48:3744-3752.
Murray, M. G. and W. F. Thompson. 1980. Rapid isolation of high molecular weight plant DNA. 8(19):4322-4325.
Namba, T., K. Komatsu, M. Iwai, and G. J. Xu. 1992. Pharmacognostical studies on the Codonopsis plants.Ⅰ. On the anatomical characteristics of the root of subsect. Codonopsis plants. Shoyakugaku Zasshi 46(2):156-164.
Namba, T., X. Wang, M. Mikage, and Z. C. Lou. 1989. Pharmacognostical studies of Chinese crude drug Da-huang (Rhubarb).Ⅲ. Some Rheum species used as Chinese folk medicine (1). Shoyakugaku Zasshi 43(2):109-120.
Paran, I. and R. W. Michelmore. 1993. Development of reliable PCR-based markers linked to downy mildew resistance genes in lettuce. Theor. Appl. Genet. 85:985-993.
Penner, G. A. 1996. RAPD analysis of plant genomes. in: Methods of Genome Analysis in Plants (Jauhar PP ed). CRC Press, Boca Raton, FL. pp. 251-168.
Rafalski, J. A., S. V. Tingey and J. G. K. Williams. 1991. RAPD markers-a new technology for genetic mapping and plant breeding. Ag. Biotech News. Info. 3(4):645-648.
Rogers, S. O., and A. J. Bendich. 1994. Extraction of total cellular DNA from plants, algae and fungi. in: Plant Molecular Biology Manual, DI:1-8, Kluwer Academic Publishers.
Rong-Zhao F., W. Jun, S. Yong-Ru and S. Pang-Chui. 1998. Extraction of genomic DNA suitable for PCR analysis from dried plant rhizomes/roots. BioTechniques. 25（5）:796-801.
Shaw, P. C. and P. P. H. But. 1995. Authentication of Panax species and their adulterants by random-primed polymerase chain reaction. Planta. Med. 61:466-469.
Sharma, A. D., P. K. Gill and P. Singh. 2002. DNA isolation from dry and fresh samples of polysaccharide-rich plants. Plant Mol. Biol. Rep. 20:415a–415f.
Takuchi, M., S. Suzuki, H. Fujino, M. Arisawa, and H. Kohda. 2001a. Evalution of Valeriana plants and their improvement for crude drug production. 1. Phylogenetic relationship in the genu Valeriana a revealed by RAPD markers. Natural Medicines 55(1):17-22.
Takuchi, M., Y. Suzuki, S. Suzuki, H. Fujino, M. Yoshizaki, and H. Kohda. 2001b. Evalution of Valeriana plants and their improvement for crude drug production. 2. Diversity of sesquiterpenoid contents. Natural. Medicines 55(5):225-230.
Takuchi, M., S. Suzuki, H. Fujino, M. Arisawa, and H. Kohda. 2001c. Evalution of Valeriana plants and their improvement for crude drug production. 3. F1 hybrids production and their sesquiterpenoids contents. Natural Medicines 55(5):231-234.
Wang, J., W. Y. HA, F. N. Ngan, P. P. H. But and P. C. Shaw. 2001. Application of sequence characterizes amplified region (SCAR) analysis to authenticate Panax species and their adulterants. Planta. Med. 67:781-783.
Welsh, J., M. McCleuand. 1990. Fingerprinting genomes using PCR with arbitray primers. Nucleic Acids Res. 18(22):7213~7218
Williams, J. G. K., A. R. Kubelik, K. J. Livak, J. A. Rafalski, and S. V. Tingey. 1990. DNA polymorphisms amplified by arbitrary primers are useful as genetic markers. Nucleic Acids Res. 18(22):6531-6535.
Yiping, Z. and R. S. John. 2001. Development of SCAR and CAPS marker linked to the Beta gene in tomato. Crop Sci. 41:1602-1608.
Zheng, T., T. Tanaka, E. Sakai, and K. Tingguo. 1991. Pharmacognostical studies of Plantaginis Herba (8) Morphological and histological studies on the roots of Plantago spp. from China. Shoyakugaku Zasshi 45(2):93-98.