|
從血清,腹水或細胞培養液中純化出抗體常用的方法有, 鹽析 , 陽離子或
陰離子交換層析及親合性層析.在此研究中, 一個填充 A型或X型沸石之層
析管柱被用來分離免疫球蛋白-白蛋白及免疫球蛋白-攜鐵蛋白之二元混合
物 .而填充之沸石有三種離子交換型式, 鈉離子,銨離子或鉀離子型 .
緩衝液之酸鹼質依據蛋白質之等電位點來調整, 以便控制僅有免疫球蛋白
吸附在沸石上 . 當其它蛋白質被沖離管柱後, 加有高濃度鹽類之緩衝液
便可用來沖提吸附之蛋白質 . 純化後之產物經由 SDS-PAGE 電泳分析其
純度 , 發現鉀離子型的沸石是最佳選擇. 而A型及X型沸石之間則沒有顯
著之分別.經由六氟矽化銨處理之 X 型沸石與未處理之 X型沸石比較 ,發
現去鋁之沸石其沖提液之酸鹼值及導電度值變化更適合用於蛋白質之分
離 . 去鋁之 X型沸石也用來分離含有抗 B型肝炎表面抗原之抗體的老鼠
腹水 . 純化後之抗體其純度及活性都不錯 .而另一種新型的吸附劑
(CaP-A) 是由鈣離子交換後的 A 型沸石經磷酸鹽溶液處理而得到 . 蛋白
質混合物及老鼠腹水也可用此吸附劑來分離 . 回收之抗體純度及活性經
電泳分析及酵素連結免疫吸附分析(ELISA) 結果都很好. 此外一個結合去
鋁X型沸石及 CaP-A 之兩步驟分離程序亦被嘗試用來從老鼠腹水中純化出
抗體 , 此結果顯示沸石吸附與其它層析方法結合之可行性很高.此外沸石
本身還有許多優點 , 如沒有收縮及膨潤之效應 ,良好的機械及耐衝擊強
度 , 容易再生及長時間使用, 以及非常低廉之價格. 總體而言 , 沸石十
分適合用於抗體之純化.
|