臺灣博碩士論文加值系統

沙門氏菌是全球都相當重視的公共衛生的議題之一，其中腸道沙
門氏菌（Salmonella enterica）在全球所分離到的血清型已超過2500
種。根據美國CDC 的報告指出人類食物中毒所引發之細菌性腸炎，
70 %是因沙門氏菌感染所致，而在國內2004 年到2007 年間超過95 %
人類沙門氏菌症是經由沙門氏菌血清型B、C1、C2-C3、D1 及E1 感
染所造成。而細菌的抗藥性可經由R-plasmids 或是帶有抗藥基因的
transposons 的獲得有關。
而沙門氏菌有沙門氏菌基因島(Salmonella genomic island, SGI)以
基因島為一段具可移動性具有多重抗藥性(multi-drug resistance, MDR)
基因的插入片段。在不同血清型沙門氏菌有不同的SGI 型。之前實驗
室報導1993 – 1994 年和長庚醫院分離的 Salmonella enterica serovar Virchow 具有SGI1-J3，此SGI 攜帶有chloroamphenicol (CHL)、tetracycline (TET)、sulfamethoxazole /trimethoprim (Sxt)的抗藥基因。
而分析由疾管局在2004 - 2006 年收集的96 株S. Virchow 分離株的抗
藥性，有82%的菌株有SGI1-J3 的抗藥性表現。而抗藥表現對
fluoroquinolone 有intermediate 型的菌株發現其gyrA 基因上的胺基酸有突變。實驗中分離了4 株具有90 kb 大小左右的質體，經由與分離
的年份比對，發現質體並沒有散布的現像。
而這些大質體透過轉型發現有β-lactamase 或aminoglycoside 藥物
的抗藥性基因攜帶在質體上。而菌株中R 質體的存在並不影響菌株的
生長速度，但有可能影響菌株在逆境下的生存。

第一章 文獻探討………………………………………………………1
第一節 沙門氏菌之簡介………………………………………………1
第二節 沙門氏菌之流行病學…………………………………………2
第三節 沙門氏菌之感染與臨床診斷…………………………………4
第四節 沙門氏菌之抗藥性問題………………………………………5
第五節 Salmonella enterica serovar Virchow 之簡介…5
第六節 SGI (Salmonella genomic island) 之簡介…………6
第七節 胺基醣苷類抗生素與抗藥基因介紹…………………………8
第八節 參考文獻………………………………………………………10
第二章 S. Virchow 分離株中質體抗藥表現及基因研究…………17
Abstract………………………………………………………………17
摘要………………………………………………………………………19
第一節 前言……………………………………………………………21
第二節 材料與方法……………………………………………………24
2.1 實驗流程…………………………………………………………24
2.2 菌株來源…………………………………………………………25
2.3 抗生素敏感性測試………………………………………………25
2.3.1 紙錠擴散法……………………………………………………25
2.3.2 Etest 試驗……………………………………………………26
2.4 細菌質體快速試驗………………………………………………27
2.5 抗藥性基因偵測…………………………………………………27
2.5.1 blaCMY-2 及blaTEM 抗藥基因……………………………27
2.5.2 CIP 抗藥基因…………………………………………………28
2.6 質體抽取…………………………………………………………28
2.7 質體DNA 之限制酶分析…………………………………………29
2.8 Gentamicin 藥敏及基因檢測…………………………………29
2.8.1 藥敏測試………………………………………………………29
2.8.2 抗藥基因檢測…………………………………………………30
2.9 基因定序…………………………………………………………30
2.10 質體對菌株的生長分析…………………………………………31
2.11 質體穩定度測試…………………………………………………31
第三節 結果與討論……………………………………………………33
3.1 抗藥性趨勢………………………………………………………33
3.2 Etest……………………………………………………………37
3.3 質體分型…………………………………………………………38
3.4 抗藥基因檢測……………………………………………………41
3.4.1 ciprofloxacin 抗藥基因…………………………………41
3.4.2 ceftazidime 抗藥基因……………………………………41
3.4.3 ampicillin 抗藥基因………………………………………42
3.5 質體轉殖、抗藥性檢測與基因偵測……………………………45
3.6 生長曲線…………………………………………………………49
第四節 結論……………………………………………………………54
第五節 參考文獻………………………………………………………55

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