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研究生:黃復華
研究生(外文):Fu Hwa Huang
論文名稱:以中草藥複方生產低膽固醇與高卵磷脂含量雞蛋之研究
論文名稱(外文):Study on the Effect of Chinese Medicine Herbal Complexs on the Production of Egg with Low Cholesterol and High Phosphatidylcholine Contents
指導教授:李俊霖李俊霖引用關係
指導教授(外文):Chun-Lin Lee
學位類別:碩士
校院名稱:國立臺東大學
系所名稱:生命科學系碩士班
學門:生命科學學門
學類:生物學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2014
畢業學年度:102
語文別:中文
論文頁數:90
中文關鍵詞:正交 T 值法蛋雞雞蛋膽固醇卵磷脂
外文關鍵詞:orthogonal t value designlaying henseggcholesterolphosphatidylcholine
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雞蛋中膽固醇、卵磷脂為雞胚胎組織器官發育之重要營養來源。膽固醇食用後主要為人體合成維他命 D 及各種類固醇類激素等重要代謝前驅物質,但攝取過多時可導致動脈硬化而發生心血管、中風及糖尿病等疾病。雞蛋為富含各種營養物質,但普遍認為膽固醇含量過高而不敢食用,故需適度調控降低雞蛋中膽固醇含量;而卵磷脂具有預防心血管及神經退化性疾病等之多項生理活性。鑑於目前降低雞蛋膽固醇含量之研究,多以使用降膽固醇藥物或飼料中添加各種礦物質,往往影響雞隻與人體健康,造成雞蛋藥物殘留及雞隻糞尿代謝產物排泄汙染環境。中草藥複方正確使用時,具有多途徑、多效性及多組織器官目標與不易產生抗藥性特性。鑒於中草藥分析方法,除傳統五行邏輯理論及「君、臣、佐、使」配伍用藥理論辯證施治外,亦可以現代科學統計試驗方法分析研究複方。本試驗目的希望以現代統計分析方法分析中草藥複方作用功效,同時生產安全、無藥物殘留及無汙染環境之保健雞蛋。方法係使用複方中草藥以飼料添加劑方式添加於蛋雞飼糧中,藉以降低雞蛋中膽固醇與提高卵磷脂之含量。試驗設計係利用正交 T 值法將黃耆、黨參、刺五加、當歸、淫羊藿、何首烏 6 種中草藥複方型式組合,以正交 T 值表及 2 水平劑量 (添加與不添加) 分為 12 組,每組 10 隻,添加於蛋雞飼糧中,為期 5 週;試驗動物為 12 週齡海蘭蛋雞,飼養至平均每日產蛋率 8 成以上;試驗結束後採集雞蛋及雞隻血清,檢測雞蛋蛋黃中膽固醇、卵磷脂、三酸甘油酯及血清中膽固醇、三酸甘油酯含量。以正交 T 值法分析結果顯示,在複方中草藥主藥或輔助功效藥分析方面,黨參、當歸、淫羊藿於降低膽固醇作用具顯著效果 (p<0.05),刺五加也有降膽固醇作用但未達顯著效果,黃耆ヽ何首烏則為輔助功效;黃耆、淫羊藿、何首烏於提升卵磷脂作用則達顯著效果 (p<0.05),當歸有增加卵磷脂作用但未達顯著效果,黨參、刺五加則為輔助功效。以 Dunnett’s test 分析比較各試驗組 (第1至11組)與對照組 (第12組,未添加中草藥),蛋重方面結果顯示,各試驗組與對照組比較無顯著差異 (p>0.05)。血清中膽固醇含量各試驗組與對照組比較則無顯著差異 (p>0.05),三酸甘油酯全複方試驗組則達顯著差異 (p﹤0.05)。蛋黃中膽固醇含量之結果顯示,黃耆、黨參、刺五加、當歸、淫羊藿、何首烏組顯著低於對照組 (p<0.05)。蛋黃卵磷脂含量之結果顯示,黃耆、黨參、刺五加、當歸、淫羊藿、何首烏組及黃耆、淫羊藿、何首烏組顯著高於對照組 (p<0.05),蛋黃三酸甘油酯之結果顯示,各試驗組與對照組間則無差異性 (p>0.05)。綜合分析顯示含六種中草藥之全複方試驗組具有最合宜及顯著的降膽固醇與提升卵磷脂之效果。在雞隻飼養健康狀況指標評估則檢測血清中肝臟之天門冬酸轉胺酶 (aspartate aminotransferase, AST)、氨基丙酸轉胺酶 (alanine amino transferase, ALT) 及腎臟肌胺酸酶 (creatinine) 酵素,結果顯示,各試驗組與對照組間均無顯著差異 (p>0.05),表示蛋雞試驗期間生長正常。雞蛋內中草藥藥物殘留檢測方面,則使用 high performance liquid chromatography (HPLC) 分別檢測全複方中草藥ヽ添加全複方及未添加中草藥之雞蛋,結果未發現中草藥成分殘留於雞蛋中,驗證本複方中草藥及雞蛋為無藥物殘留,具有食品安全性。試驗結束並採集肝臟組織,肉眼病理觀察無任何病變,組織病理切片化學染色,鏡檢觀察肝臟細部脈管組織及肝細胞型態,均未發現損傷。再則檢驗全複方及各單味中草藥抗氧化能力,全複方中草藥及黃耆ヽ當歸ヽ黨參ヽ刺五加ヽ何首烏ヽ淫羊藿甲醇提取物,中草藥甲醇提取液在濃度3.75 mg/mL 至120 mg/mL 範圍內檢測對 DPPH 自由基清除能力。於提取液固定濃度 15 mg/mL 時比較結果依序為淫羊藿 (96.51±0.54%)ヽ刺五加 (95.37±0.41%)ヽ 當歸 (66.22±1.29%)ヽ 黃耆 (65.95±8.62%)ヽ 全複方中草藥 (61.15±11.72%)ヽ 何首烏 (47.19±13.60%)ヽ 黨參 (42.83±14.79%)。

Cholesterol and phosphatidylcholine in egg are important source of nutrition of chicken embryonic organ development. Cholesterol mainly for the body to vitamin D and a variety of steroid hormones and other important metabolic precursors, but too much can cause atherosclerosis, cardiovascular disease, stroke and diabetes. Egg is rich in various nutrients, but it is generally believed that a high level of cholesterol and dare not eat, so need to control appropriate lower cholesterol content in egg. Pho-
sphatidylcholine has some protective effects of cardiovascular, neurodegenerative diseases, and physiological activity. In view of the current research on reducing cholesterol content of egg, to drop the use of cholesterol drugs or add a variety of minerals in the feedstuffs, often affect the chicken and human health, causing egg drug residue and chicken excretion and urine excretion of the metabolites of environmental pollution. Chinese herbal medicine when used correctly, has the multi-way, multi-organs and target pleiotropic effects and is not easy to produce drug resistance characteristics. In view of Chinese herbal medicine analysis method, in addition to the traditional five elements theory, can also use methods of modern scientific statistical analysis to study the effects of compound. The objective of the experiment was to use modern statistical analysis method in the analysis of compound Chinese medicine efficacy, and production safety, no drug residue and no pollution to the environment and health egg. The purpose of this study is to investigate the effects of different assembly of dietary Traditional Chinese Medicine herbs (TCM) for decreasing cholesterol and increasing phosphatidylcholine concentration of egg yolk in laying hens. Hyline laying hens of 35-week old were separated into 12 groups fed with basal feedstuffs and treatments with Astragalus membranaceous, Codonopsis tangshen Oliv, Acanthopanax senticosus, Angelica sinensis (Oliv) Diels, Epimedium grandiflorum Morr and Polygonum multiflorum Thunb by orthogonal t value design respectively. The experimental period lasted 5 weeks. Eggs and blood were collected for samples at end. Plasma and egg yolk contents of cholestrol and phosphatidylcholine were measured by Elisa assay kit. In egg yolk cholesterol, the results of experimental group by TCM compound was significantly lower than control group, and phosphatidylcholine was higher statistically significant (p<0.05). Triglyceride contents in egg yolk were no difference (p

中文摘要 II
前言 1
第一章 文獻回顧 2
第一節 雞蛋生產與蛋雞飼養 2
第二節 蛋雞膽固醇與卵磷脂相關生合成代謝 9
第三節 降血脂中草藥方劑研究 24
第四節 中草藥抗氧化能力與降膽固醇之關聯性與檢測體外自由基清除作用方法 28
第二章 實驗動機與實驗架構 30
第一節 實驗動機與目的 30
第二節 實驗架構 31
第三章 材料與方法 33
第一節 實驗材料 33
第二節 實驗方法 35
第三節 試驗檢測方法 41
第四章 結果 44
第一節 雞蛋蛋黃中膽固醇、卵磷脂含量之正交 T 值法分析結果 44
第二節 蛋重ヽ血清中膽固醇、三酸甘油酯與蛋黃中膽固醇、卵磷脂、 三酸甘油酯結果 44
第三節 蛋雞血清 AST、ALT 及 creatinine安全性指標評估檢測 49
第四節 肝臟組織病理切片判讀結果 49
第五節 HPLC檢測雞蛋內中草藥成分殘留分析結果 49
第六節 中草藥及維生素 C DPPH 自由基清除能力分析結果 53
第五章 討論 64
第一節 雞蛋蛋黃中膽固醇、卵磷脂含量之正交 T 值法 64
第二節 、蛋重ヽ血清中膽固醇、三酸甘油酯與蛋黃中膽固醇、卵磷脂、三酸甘油酯 65
第三節 蛋雞血清 AST、ALT 及 creatinine 安全性指標評估檢測 65
第四節 肝臟組織病理切片觀察 66
第五節 HPLC檢測雞蛋內中草藥成分殘留分析 66
第六節 黃耆ヽ當歸ヽ黨參ヽ刺五加ヽ何首烏ヽ淫羊藿抗氧化與降膽固醇作用 66
第六章 結論 68
未來展望 68
第七章 參考文獻 70

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